Приложение Б (справочное). Характеристика солоноватоводных зеленых и морских диатомовых микроводорослевых тест-объектов

Приложение Б
(справочное)

Характеристика солоноватоводных зеленых и морских диатомовых микроводорослевых тест-объектов

Б.1 Характеристика тест-объекта Dunaliella salina Teod

Б.1.1 Систематическое положение

Отдел	Chlorophyta
Класс	Euchlorophyceae
Порядок	Volvocales
Семейство	Polyblepharidaceae
Род	Dunaliella Teod.
Вид	Dunaliella salina Teod.

Б.1.2 Местообитание

Род дуналиелла распространен на всех шести континентах Земного шара, включая Антарктиду. Dunaliella salina является солоноватоводной микроводорослью, обитающей при солёности и более. Широко представлена в соленых озерах, морях. Дуналиелла является важным звеном ряда водных биоценозов. Галобионтные водоросли, в том числе дуналиелла - необходимый элемент питания ракообразных.

Б.1.3 Морфология, биология

Dunaliella salina относится к одноклеточным водорослям. Клетки без обособленной оболочки, размножающиеся в подвижном состоянии продольным делением на две клетки эллиптические или яйцевидные без продольных ребер, не сплюснуты. Хроматофор процельный с пиреноидом. Пульсирующих вакуолей нет. Жгутов два. Организмы красноватые от присутствия гематохрома. Вызывает окраску воды и кристаллизующейся соли.

Б.1.4 Культивирование

Для культивирования дуналиеллы используется среда в разбавлении отстоянной дехлорированной водой 1:3. Температура культивирования составляет , освещение от 1000 до 2000 лк, продувка углекислым газом. Культуру фильтруют и обновляют на 1/3 каждые 10 сут. Для сохранения музейной культуры используют агаризованную питательную среду (0,6% агар-агара), после высева ее помещают в люминостат при температуре 5°C, пересев производят через каждые два месяца.

Для подсчета клеток дуналиеллы их необходимо обездвижить, например, нагревом счетной камеры на спиртовке.

Б.2 Характеристика тест-объекта Phaeodactylum tricornutum Boohl

Б.2.1 Систематическое положение

Отдел	Bacillariophyta
Порядок	Naviculales
Семейство	Phaeodactylaceae
Род	Phaeodactylum
Вид	P. tricornutum Boohl.

Phaeodactylum tricornutum относится к диатомовым водорослям. Это единственный вид в роде Phaeodactylum.

Б.2.2 Местообитание

Phaeodactylum tricornutum Boohl. - супралиторальная пеннатная диатомовая водоросль. Эти водоросли являются одними из наиболее чувствительных к загрязнению. История их культивирования насчитывает 80 лет, но до 60-х годов она была известна под названием Nitzschia closterium f. Minutissima (ницшия). В отечественной марикультуре феодактилум (ницшию) применяют для выкармливания молоди устриц, артемии, коловраток.

Б.2.3 Морфология, биология

Phaeodactylum tricornutum - вид, наиболее хорошо поддающимся культивированию в лабораторных условиях. Феодактилум одноклеточная микроводоросль имеет несколько морфологических форм: веретеновидную, трехлучевую, крестообразную и овальную. Настоящий кремневый скелет и четко выраженная потребность в кремнии наблюдается только у овальной формы. Переход от одной формы в другую связан с условиями культивирования, но точные условия до конца не ясны. Размеры трехлучевой составляют от 12 до 15 мкм, веретеновидной - от 20 до 30 мкм. Темп деления 2-3 раза в сутки.

Б.2.4 Получение и культивирование

Выделяют Phaeodactylum tricornutum из природной морской воды. Пробы воды отбирают вдали от берега, затем ее вносят в колбы вместимостью 300 мл, в которые предварительно налита питательная среда, приготовленная согласно таблице В.3 (приложение В). Через 15 дней в большинстве колб водоросли начинают расти. Содержимое колб просматривают и отбирают отличающиеся наиболее интенсивным ростом организмы. В дальнейшем посредством частых пересевов выделяют монокультуры отдельных видов водорослей.

Культивирование феодактилум в лабораторных условиях осуществляют в колбах вместимостью 300 мл при температуре и естественном освещении, избегая прямых солнечных лучей, либо при искусственном освещении 2000 лк (лампы дневного света на высоте 60 см от колб) в люминостате. Пересевать культуру водорослей необходимо один раз в 10 дней в простерилизованную колбу со свежей средой. Пересев необходимо осуществлять над пламенем спиртовки.