Приложение В (справочное). Питательные среды для пресноводных и солоноватоводных микроводорослей

Приложение В
(справочное)

Питательные среды для пресноводных и солоноватоводных микроводорослей

В.1 Питательные среды для пресноводных зеленых микроводорослей

Культуры Scenedesmus obliquus и Chlorella vulgaris имеются в Государственных университетах Москвы, Санкт-Петербурга, ФГБУ "ГХИ" и др.

Зеленые пресноводные микроводоросли выращивают на одной из искусственных питательных сред, состав которых приведен в таблице В.1, и добавляемых в питательную среду микроэлементов (магния, цинка, молибдена, ванадия, меди), состав соединений которых приведен в таблице В.2.

Таблица В.1 - Состав искусственных питательных сред

Наименование реактива	Наименование среды
	Тамия	Мейерса	Успенского	Прата
	Концентрация растворов реактивов,
Калий азотнокислый	5,000	1,2130	0,0250	0,100
Магния сульфат 7-водный	2,500	1,2040	0,0250	0,010
Калия дигидрофосфат	1,250	1,2240	0,0250	0,010
Железа сульфат 7-водный	0,003	-	-	-
Сульфат железа (III)	-	0,0747	-	-
Калия карбонат	-	-	0,0345	-
Кальция нитрат	-	-	0,1000	-
Железо хлорное 6-водное	-	-	-	0,001

Таблица В.2 - Состав раствора микроэлементов, добавляемых в питательную среду

Наименование соединения	Добавляемый раствор
	Концентрация,	Объем раствора, , добавляемого в 1 воды
Кислота борная	2,860	1,0
Хлорид магния 4-водный	81,000
Сульфат цинка	0,125
Молибдена триоксид	0,017
Аммоний ванадиевокислый	0,023
Сульфат цинка	100,000	0,3
Кислота борная	100,000
Магния сульфат	150,000
Меди сульфат 5-водный	3,000

Питательные среды готовят на дистиллированной воде или кипяченой водопроводной воде. Навеску каждого вещества растворяют в небольшом количестве воды, а затем растворы сливают вместе и доводят их объем до 1 .

Среды Мейерса и Тамия перед внесением водорослей разбавляют в 3-5 раз.

Культуру водорослей вносят в среду до тех пор, пока не приобретет видимую светло-зеленую окраску. Колбу закрывают ватно-марлевой пробкой.

Пересевать их можно через 2-3 недели или через месяц.

В.2 Питательные среды для солоноватоводных и морских микроводорослей

Морские одноклеточные микроводоросли выращивают на среде Гольдберга в модификации Кабановой, состав которой приведен в таблице В.3.

Таблица В.3 - Состав питательной среды Гольдберга в модификации Кабановой

Наименование реактива	Навеска реактива в 100 дистиллированной воды, г	Объём раствора, , добавляемого в 1 морской воды
Калий азотнокислый	10,10000	2,0
Калия дигидрофосфат	1,42100	0,5
Марганца хлорид 4-водный	0,01979	1,0
Кобальта хлорид 4-водный	0,02379	-
Железо хлорное 6-водное	0,02703	1,0

Для приготовления питательной среды Гольдберга морскую воду отбирают на условно чистом участке, фильтруют через двойной бумажный или мембранный фильтр N 4, дважды стерилизуют, нагревая на водяной бане до 75°C, и охлаждают до комнатной температуры. В подготовленную таким образом морскую воду последовательно добавляют питательные вещества из четырех заранее приготовленных растворов (см. таблицу В.3). В морскую воду объемом 1 вносят 2 раствора N 1, 0,5 раствора N 2 и 1 раствора N 3, затем среду стерилизуют третий раз, охлаждают и только тогда добавляют 1 раствора N 4, чтобы не образовывался осадок гидроокиси железа. Полученный раствор аэрируют.

Вместо природной морской воды можно использовать искусственную морскую воду или водный раствор профессиональный морской соли (Wiegandt, производство Германия).