Приложение А (справочное). Определение АТФ

Приложение А
(справочное)

Определение АТФ

А.1 Энергия в живых клетках получается гидролизом АТФ до АДФ и/или до АМФ. Химическая формула АТФ: C₁₀H₁₆N₅O₁₃P₃; структура молекулы представлена на рисунке А.1.

Рисунок А.1 - Молекулярное строение АТФ

А.2 В любой момент времени количество АТФ в клетке зависит от ее метаболической активности. Измерение АТФ - один из способов оценки количества активной микробиальной биомассы и уровня роста.

Измерение АТФ основано на реакции люциферина с люциферазой (получаемой от светляков), происходящей в присутствии АТФ. Во время этого процесса возникает свечение.

В оптимальных условиях получается 1 фотон на молекулу АТФ. Производимый свет измеряют с использованием чувствительного фотометра (или люминометра) и выражают в относительных световых единицах (RLU). Затем с использованием коэффициента преобразования рассчитывают содержание АТФ в образце.

,

(А.1)

где - люциферин;

ATP - аденозинтрифосфат;

Е - люцифераза;

AMP - аденозинмонофосфат;

PPi - пирофосфат;

L - оксолюциферин;

- вода.