Приложение 4. Рекомендации к порядку отбора, транспортировки и хранения материала для наблюдения за циркуляцией энтеровирусов

Приложение 4
МР 4.4.0136-18

Рекомендации к порядку отбора, транспортировки и хранения материала для наблюдения за циркуляцией энтеровирусов

1. Фекалии

Фекалии забирают из горшка, подкладного судна или с пеленки. Пробу в количестве 1-2 г (1-2 мл) одноразовой лопаткой или наконечником с аэрозольным барьером переносят в стерильный флакон.

Готовят суспензию фекалий, для чего во флакон вносят 3 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия (при водянистой консистенции фекалий раствор не добавляют). При необходимости хранения материала к суспензии фекалий добавляют глицерин до конечной концентрации 10-15%. После гомогенизации и экспозиции с глицерином в течение 30-40 мин пробы замораживают.

Хранение образцов нативных фекалий или фекальной суспензии при температуре 2-8°С - в течение 1 суток, фекальной суспензии с глицерином при температуре минус 20°С - длительно. Допускается однократное замораживание-оттаивание образца.

Транспортировку образцов к месту проведения анализа осуществляют в течение 2-3 часов без охлаждения, при более длительной транспортировке - в термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом (2-8°С), в замороженном виде - в течение 1 суток.

2. Ликвор

Спинномозговую жидкость получают не менее 0,5-1 мл путем прокола поясничной субокципитальной области или мозговых желудочков одноразовыми пункционными иглами. Материал помещают в одноразовые пластиковые пробирки объемом 1,5 мл.

Предобработка проб не требуется,

Хранение проб и их транспортировку к месту проведения анализа осуществляют так же, как проб фекалий (п. 1 прилож. 4 методических рекомендаций).

3. Кровь

Оптимальными для обнаружений энтеровирусов являются образцы цельной крови. Забор крови проводят из локтевой вены. Кровь переносят в одноразовую пластиковую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1 : 20 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1 : 9), аккуратно перемешивают путем переворачивания пробирки. Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя.

Предобработка проб не требуется.

Хранение образцов цельной крови: при температуре 2-25°С в течение 6 часов с момента взятия материала для количественного определения нуклеиновых кислот; в течение 12 часов - для качественного определения нуклеиновых кислот. При температуре 2-8°С - в течение 1 суток для качественного определения РНК энтеровирусов.

Недопустимо замораживание образцов цельной крови!

Транспортировку образцов к месту проведения анализа осуществляют при температуре 2-8°С в течение 6-12 часов с момента взятия материала.

4. Мазки из ротоглотки

Мазки берут сухим стерильным ватным тампоном с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. Затем тампон помещают в одноразовую пробирку, содержащую стерильный изотонический раствор хлорида натрия.

Предобработка проб не требуется.

Хранение проб и их транспортировку к месту проведения анализа осуществляют так же, как проб фекалий (п. 1 прилож. 4 методических рекомендаций).

5. Мазки с конъюнктивы глаз

Мазки берут сухим стерильным ватным тампоном (зондом). Оттянув нижнее веко, вращающими движениями проводят зонд 4-5 раз по конъюнктиве, захватывая внешний и внутренний углы глаза. После забора материала рабочую часть зонда помещают в пробирку с изотоническим раствором, вращают зонд в течение 10-15 секунд, затем зонд вынимают из раствора, отжимая избытки жидкости о стенку пробирки. Пробирку закрывают.

Предобработки проб не требуется.

Хранение проб и их транспортировку к месту проведения анализа осуществляют так же, как проб фекалий (п. 1 прилож. 4 методических рекомендаций).

6. Содержимое везикул

Участок кожи протирают спиртом, везикулу прокалывают стерильной иглой, вытекающую жидкость собирают на сухой ватный тампон, .которым также протирают везикулу. На один тампон собирают содержимое трех-пяти везикул. Тампон помещают в 1 мл транспортной среды.

Предобработки проб не требуется.

Хранение проб и их транспортировку к месту проведения анализа осуществляют так же, как проб фекалий (п. 1 прилож. 4 методических рекомендаций).

7. Образцы сточной воды и водных концентратов

Образцы сточной воды и водных концентратов получают, хранят и транспортируют в соответствии с законодательством в области обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения¹⁷.