Приложение А (обязательное). Методика приготовления растворов аттестованных смесей и образцов для контроля, применяемых при измерении массовой концентрации приоритетных компонентов ПАУ в пробах атмосферного воздуха методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Приложение А
(обязательное)

Методика приготовления растворов аттестованных смесей и образцов для контроля, применяемых при измерении массовой концентрации приоритетных компонентов ПАУ в пробах атмосферного воздуха методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

А.1 Назначение и область применения

А.1.1 Методика предназначена для приготовления растворов аттестованных смесей (АС), применяемых для установления (построения) градуировочной характеристики ВЭЖХ и для приготовления с использованием АС образцов для контроля (ОК) характеристик погрешности измерений по методике определения массовой концентрации приоритетных ПАУ в пробах атмосферного воздуха методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

А.1.2 Методика приготовления растворов АС разработана в соответствии с требованиями РМГ-60. АС представляют собой растворы определяемых приоритетных компонентов ПАУ в ацетонитриле, которые готовят либо из ГСО, СОП, либо из индивидуальных чистых ПАУ объемно-весовым методом с последующим разбавлением до необходимой концентрации. Приготовление ОК проводят путем внесения соответствующих аликвот растворов АС в заданных количествах на фильтр из фильтроткани ФПП-15-1,5.

А.2 Метрологические характеристики

А.2.1 Метрологические характеристики растворов АС рассчитывают по формулам, приведенным в РМГ 60 (пункт 7.10).

Оценку и расчеты показателей прецизионности (повторяемости, воспроизводимости или внутрилабораторной прецизионности) методики измерений (анализа) с использованием АС и ОК проводят в соответствии с требованиями и по формулам, приведенным РМГ 61.

А.2.2 Процедура приготовления растворов АС и ОК позволяет получить аттестованные смеси и образцы для контроля, в которых истинные концентрации приоритетных ПАУ с вероятностью P = 0,95 отличаются от приписанных не более, чем на величины предельных значений погрешностей, указанных в таблицах А.1 и А.2.

А.2.3 Значения концентраций приоритетных компонентов ПАУ даны в указанных таблицах в виде диапазонов, поскольку при выполнении операции взвешивания навесок на аналитических весах для приготовления АС из индивидуальных веществ, а также из ГСО и СОП их массы по техническим причинам могут быть отличными от строго установленного значения.

Таблица А.1 - Значения массовой концентрации приоритетных компонентов ПАУ в аттестованных смесях и характеристики погрешности аттестованного значения

Наименование вещества	Значения массовой концентрации , и границы погрешности при , для АС
Бенз[a]пирен	100-200		1-2		0,01-0,02		0,002-0,004
Дибенз[a,h]антрацен	100-200		1-2		0,01-0,02		0,002-0,004
Бенз[g,h,i]перилен	100-200		1-2		0,01-0,02		0,002-0,004
Антрацен, флуорантен, пирен, хризен, перилен, тетрафен, бенз[b]флуорантен, бенз[k]флуорантен, бенз[e]пирен	100-500		1-5		0,01-0,05		0,002-0,005

Таблица А.2 - Значения массовой концентрации приоритетных компонентов ПАУ в образцах для контроля и характеристики погрешности аттестованного значения

Наименование вещества	Значения массовой концентрации , и границы погрешности при , для ОК
Бенз[a]пирен			1-2		0,01-0,02		0,001-0,002
Дибенз[a,h]антрацен			1-2		0,01-0,02		0,001-0,002
Бенз[g,h,i]перилен			1-2		0,01-0,02		0,001-0,004
Антрацен, флуорантен, пирен, хризен, перилен, тетрафен, бенз[b]флуорантен, бенз[k]флуорантен, бенз[e]пирен			1-5		0,01-0,05		0,001-0,005

А.3 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы, реактивы

А.3.1 При выполнении измерений применяют следующие средства измерений:

- высокоэффективный жидкостной хроматограф (ВЭЖХ), например, типа "Твинкл" с флуоресцетным детектором FP-210 японской фирмы "Джаско" [5] - модернизированный вариант прибора, оснащенного аналого-цифровым преобразователем (АЦП) [6] и программным обеспечением "НетХром" отечественной фирмы ООО НПФ "Мета Хром" [7], предназначенный для автоматизированного измерения и обработки хроматографического сигнала, хранения результатов измерений на базе персонального компьютера или другой аналогичный автоматизированный ВЭЖХ отечественного или зарубежного производства;

- автоматический самопишущий потенциометр КСП-4 со шкалой регистрации 0-10 мВ, пределом допустимой погрешности измерения по ГОСТ 12997-84;

- микрошприцы типа "Hamilton" вместимостью 25, 100 и 250 с пределом допустимой погрешности ;

- весы специального класса точности по ГОСТ Р 53228-2008 с наибольшим пределом взвешивания 210 г и пределами допустимой погрешности, равными:

а) мг при взвешивании в интервале от 0,01 до 50 г включ.,

б) мг при взвешивании в интервале от 50 до 200 г включ.,

в) мг при взвешивании в интервале от 200 до 210 г включ.;

- гиря для юстировки весов массой 200 г типа Е 2 по ГОСТ OML R-111-1-2009;

- газовый счетчик ВК-G 25, расход , , российский сертификат N 30261 Государственного реестра средств измерений под N 36707-08 с пределами погрешности измерения:

а) в диапазоне расходов от до включ. - ,

б) в диапазоне расходов от до включ. - ;

- барометр-анероид типа М-67 по ТУ 2504-1797-75;

- гигрометр психрометрический типа ВИТ-2 по ТУ 25-11.1645-84, российский сертификат Государственного реестра средств измерений под N 9364-08 с пределами погрешности измерения относительной влажности и температуры воздуха в помещении:

а) в диапазоне относительной влажности от 20% до 90% включ. и температуре по "сухому" термометру от 5°С до 40°С включ. - ,

б) в диапазоне температуры от 15°С до 40°С включ. - ;

- колбы мерные исполнения 1 и 2, 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100, 250, 500, 1000 по ГОСТ 1770-74;

- цилиндры мерные исполнения 2, 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 100, 500 по ГОСТ 1770-74;

- пробирки мерные исполнения 2, 2-го класса точности вместимостью 10, 25 по ГОСТ 1770-74;

- пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1, 2, 5, 10 по ГОСТ 29227-91;

А.3.2 При выполнении измерений применяют следующие вспомогательные устройства и оборудование:

- электроаспиратор - пробоотборная фильтрующая установка производительностью по расходу воздуха до 40 по ТУ 25-11-1660-85, аналог описан в ГОСТ Р ИСО 12884-2007 (раздел 7);

- колонка хроматографическая (аналитическая) стальная 150х3 мм с Сепарон SYXRP-S - 5 мкм или Силосорб - 5 мкм фирмы "Элсико";

- колонка хроматографическая (предколонка) стальная 50х3 мм с Сепарон SYXRP-S - 5 мкм или Силосорб - 5 мкм фирмы "Элсико";

- комплект набора для фильтрации образцов проб с держателем на 13 мм фирмы "Диа-М";

- колонка хроматографическая стеклянная диаметром 1,5-2,0 и длиной 25-30 см с краником, предназначенная для очистки экстрактов проб;

- аппарат ультразвуковой для экстракции (импортный);

- аппарат для встряхивания типа АВУ-6-С по ТУ 64-1-24-51-78;

- установка лабораторная стеклянная для перегонки растворителя

- ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1М по ГОСТ 28165-89;

- компрессор воздушный типа УК-40 по ТУ 61-1-29-85;

- печь муфельная лабораторная типа ПМ-10 вместимостью камеры 6,5 , диапазон автоматического регулирования температур от 100°С до 1000°С по ТУ 79-337-72;

- плитка электрическая с закрытой спиралью типа ЭПШ 1-0,8/220 по ГОСТ 14919-83;

- баня водяная типа БВЛ по ТУ 79-231-77;

- шкаф сушильный лабораторный типа SNOL по ТУ 16-681.032-84;

- шкаф сушильный типа ШС-3 по ТУ 16-531-299-88

- дистиллятор по ТУ 61-1-721-79;

- бидистиллятор стеклянный по ТУ 25-11-1592-81;

- прибор для получения особо чистой воды типа "Водолей" по ТУ 2.115.000.000, сертификат N 020010166 Государственного реестра средств измерений;

- воронка Бюхнера по ГОСТ 9147-73;

- эксикатор диаметром от 15 до 30 см по ГОСТ 25336-82;

- колбы конические исполнения 1 вместимостью 100 и 250 по ГОСТ 25336-82;

- колбы грушевидные исполнения 1 вместимостью 50 и 100 по ГОСТ 25336-82;

- стаканы типа В исполнения 1 номинальной вместимостью 100 и 1000 по ГОСТ 25336-82;

- стаканчики для взвешивания (бюксы) вместимостью 10, 25 по ГОСТ 25336-82;

- воронки стеклянные химические типа В диаметром 56, 75 мм по ГОСТ 25336-82;

- воронки типа ВД исполнения 3 вместимостью 1000 и 2000 по ГОСТ 25336-82;

- флаконы стеклянные вместимостью 2, 5, 10, 20 и 50 с завинчивающими крышками, снабженными прокладками с тефлоновым покрытием;

- персональный компьютер в комплекте с монитором и принтером;

- холодильник бытовой;

- пинцет пластмассовый или металлический;

- ножницы.

А.3.3 При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы:

- государственный стандартный образец состава раствора бенз[а]пирена в ацетонитриле, массовая концентрация ГСО N 7515-98;

- стандартный образец предприятия состава раствора бенз[g,h,i]перилена в ацетонитриле, массовая концентрация СОП 0117-03;

- стандартный образец предприятия состава раствора дибенз[a,h]антрацена в ацетонитриле, массовая концентрация СОП 0108-03 ER-РАН 11 по ТУ 26-033-56278322-2008.

- индивидуальные соединения ПАУ импортные или отечественные марки х.ч.: антрацнен, флуорантен, пирен, тетрафен, хризен, бенз[b]флуорантен, бенз[k]флуорантен, бенз[е]пирен, бенз[а]пирен, перилен, бенз[g,h,i]перилен, дибенз[a,h]антрацен;

- ацетонитрил для ВЭЖХ марки ОП-3 или Ф-198 нм по ТУ 6-09-14-2167-84 или по СТП ТУ соmр 30-074-06 или фирмы "Scharlau";

- н-гексан марки ч. по ТУ 2631-00-5807999-98 или марки ЧДА по ТУ 2631-003-05807999-98;

- алюминий оксид для хроматографии по МРТУ 6-09-5296-98;

- ацетон марки ч. или ч.д.а. по ГОСТ 2603-79;

- вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;

- спирт этиловый ректификат по ГОСТ Р 51652-2000;

- натрий сернокислый безводный марки ч.д.а. по ГОСТ 4166-76;

- кислота серная концентрированная марки х.ч. по ГОСТ 4204-77;

- натрий углекислый кислый марки х.ч. по ГОСТ 4201-79;

- калий двухромовокислый по ГОСТ 4220-75;

- фильтроткань ФПП-15-1,5 по ТУ 2568-411-05795731-2008;

- фильтры мембранные капроновые диаметром 13 мм и 50 мм фирмы "Диа-М" или анологичные "Владипор МФАС-ОС-2", 0,45 мкм по ТУ 6-55-221-1-29-89;

- стекловата типа УТВ по ТУ 16-50-30-85;

- асбест листовой по ТУ 6-09-4010-75;

- бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026-76;

- универсальная индикаторная бумага, производитель "Лахема";

- шланги силиконовые диаметром 6 мм по ТУ 38106152-77;

- трубки из нержавеющей стали и полиэтилена длиной от 2 до 5 м, внутренним диаметром от 2 до 4 мм по ТУ 6-05-041-760-85;

- вата медицинская;

- синтетическое моющее средство (бесфосфатное);

- калька бумажная рулонная;

- пакеты бумажные.

Примечание - Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования, реактивов и материалов, в том числе импортных с характеристиками и квалификацией не хуже, чем у приведенных в разделе А.3 и обеспечивающих точность измерений, указанную в таблицах 1 и 2 раздела 4.

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Имеется в виду "таблицах 1 и 2 раздела 3"

А.4 Процедура приготовления

А.4.1 Приготовление исходных растворов аттестованных смесей приоритетных компонентов ПАУ из индивидуальных веществ

готовят растворением соответствующих навесок индивидуальных компонентов ПАУ в ацетонитриле или в гексане.

На весах специального класса точности в отдельных бюксах взвешивают по 10-20 мг бенз[а]пирена, дибенз[a,h]антрацена бенз[g,h,i]перилена, и 10-50 мг каждого из остальных ПАУ. С помощью растворителя навеску вещества количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 (для каждого вещества берут свою мерную колбу). При перемешивании полностью растворяют вещество, находящееся в колбе. При этом объем растворителя не должен превышать примерно половины вместимости колбы. Затем объем раствора доводят растворителем до метки на колбе.

Полученным растворам аттестованных смесей приписывают соответствующие массовые концентрации: 100-200 для бенз[а]пирена, дибенз[a,h]антрацена бенз[g,h,i]перилена, и 100-500 для каждого из остальных ПАУ (см. таблицу А.1).

В качестве используют также выпускаемые готовые растворы ГСО с паспортными значениями массовой концентрации индивидуального компонента ПАУ, предварительно разбавив их ацетонитрилом в 1000 раз. Для этого берут 1 ГСО, СОП, помещают в мерную колбу на 1000 , добавляя в нее порциями ацетонитрил до метки на колбе.

А.4.2 Приготовление растворов аттестованных смесей

Приготовление растворов проводят путем разбавления аликвот ацетонитрилом по следующей процедуре: в мерную колбу вместимостью 100 вносят через воронку 20-30 чистого ацетонитрила и добавляют туда 1 отобранного пипеткой вместимостью на 1 раствора смеси . Для каждого вещества берут свою колбу и пипетку. Пипетку многократно промывают ацетонитрилом, который сливают в ту же мерную колбу. Смесь тщательно перемешивают и доводят объем до метки на колбе ацетонитрилом. Полученным растворам смесей приписывают соответствующие массовые концентрации (см. таблицу А.1).

А.4.3 Приготовление аттестованных смесей и

Приготовление растворов смесей и проводят путем разбавления аликвот ацетонитрилом по той же процедуре, которая изложена в А.4.2.

Для приготовления растворов смесей отбирают пипеткой вместимостью на 1 соответствующие аликвоты и переносят их количественно в мерные колбы вместимостью на 100 (получают растворы ) и на 500 (получают растворы ). Для приготовления растворов смесей и могут быть использованы также мерные колбы вместимостью на 50, и 250 соответственно при условии уменьшения аликвоты раствора в 2 раза.

Полученным растворам смесей и приписывают соответствующие массовые концентрации (см. таблицу А.1).

Срок хранения растворов АС составляет не более 6 месяцев.

А.4.4 Приготовление образцов для контроля характеристик погрешности измерений

Для приготовления образца ОК-1 в коническую колбу вместимостью 100-250 помещают чистый (неэкспонированный) фильтр из фильтроткани ФПП-15-1,5 диаметром 160 мм. Пипеткой вместимостью на 1 отбирают по 1 раствора определяемых компонентов ПАУ и количественно переносят их в химический стакан, в котором содержится 50-70 перегнанного гексана, используя при этом растворитель - тот же гексан для смыва остатков раствора в пипетке. Полученный раствор количественно переносят в коническую колбу с фильтром и содержимое колбы тщательно перемешивают на аппарате для встряхивания. Затем постепенно удаляют растворитель путем его сдува потоком азота о.с.ч. со скоростью 5-10 периодически перемешивая образец.

Аналогичным образом готовят образцы для контроля ОК-2 и ОК-3 с тем отличием, что для приготовления ОК-2 и ОК-3 отбирают пипеткой вместимостью на 1 по 1 растворов и соответственно.

Полученным образцам ОК приписывают соответствующие массовые концентрации компонентов ПАУ (см. таблицу А.2) и погрешности аттестации.

Сухие образцы для контроля хранят в закрытых конических колбах в холодильнике. Срок хранения - не более 6 месяцев.

А.5 Алгоритм расчета характеристики погрешности установления концентраций приоритетных ПАУ в растворах аттестованных смесей и в образцах для контроля

А.5.1 Оценивание характеристики погрешности (при P = 0,95) приготовления исходных растворов аттестованных смесей проводят по формуле

, (А.1)

где - погрешность приготовления аттестованной смеси, ;

- приписываемые концентрации растворов , приготовленные из индивидуальных веществ (отдельно для каждого компонента ПАУ), ;

m - навеска индивидуального вещества (отдельно для каждого компонента ПАУ), мг;

- погрешность взвешивания, мг;

- массовая доля вещества в реактиве, %;

- погрешность установления массовой доли вещества, %

- вместимость мерной колбы, в которой готовился раствор, ;

- значение отклонения вместимости мерной колбы от номинального значения, .

А.5.2 Расчет предельного возможного значения нормы погрешности установления массовых концентраций компонентов ПАУ в растворах АС проводят по формуле

, (А.2)

где - погрешность приготовления аттестованной смеси, ;

- предельно допустимое отклонение значения вместимости пипетки от номинального значения, ;

- значение номинальной вместимости пипетки, ;

- предельно допустимое отклонение значения вместимости мерной колбы от номинального значения, ;

- значение номинальной вместимости мерной колбы, ;

- погрешность приготовления растворов исходных смесей , ;

- массовые концентрации компонентов ПАУ растворов , ;

- массовые концентрации компонентов ПАУ растворов АС, .

А.5.3 Расчет предельного возможного значения нормы погрешности установления массовых концентраций компонентов ПАУ в образцах для контроля проводят по формуле:

, (А.3)

где - погрешность приготовления образца для контроля, мкг/пробу;

- предельно допустимое отклонение значения вместимости пипетки от номинального значения, ;

- значение номинальной вместимости пипетки, ;

- погрешность приготовления растворов или , ;

- массовые концентрации компонентов ПАУ растворов или , ;

- массовые концентрации компонентов ПАУ в образцах для контроля, ;

А.5.4 Числовые значения величин погрешности приготовления растворов АС и ОК приведены в таблицах А.1 и А.2.

А.6 Требования безопасности и охраны окружающей среды

При выполнении процедур по приготовлению растворов АС должны соблюдаться правила техники безопасности, изложенными в [3], [4] и касающиеся правил и мер предосторожности при работе с токсичными и канцерогенными углеводородами, летучими органическими растворителями.

Оператор должен соблюдать правила техники безопасности при работе с электрическими установками, рассчитанными на напряжение 220/380 В. Он должен пройти инструктаж по технике безопасности при работе в химической лаборатории.

Мероприятия по обеспечению охраны окружающей среды от загрязнения сводятся к ликвидации и утилизации всех жидких и твердых отходов, образующихся при приготовлении стандартных растворов. Жидкие отходы - отработанные растворители собираются раздельно в стеклянные бутыли с пробками, по мере накопления они подвергаются очистке и повторно используются в работе.

Жидкие отходы временно хранятся либо в вытяжном шкафу, либо в металлическом сейфе, расположенном на территории предприятия.

Водные отработанные смеси не содержат загрязняющие вещества с превышением установленных норм ПДК, поэтому они сливаются в канализацию с разбавлением водой.

Твердые нетоксичные отходы - отработанные сорбенты, фильтры утилизируются как твердые бытовые отходы (ТБО), т.е. вывозятся на полигон для захоронения ТБО или на мусороперерабатывающие предприятия.

А.7 Требования к квалификации оператора

К выполнению процедур по приготовлению растворов могут быть допущены инженер или техник, имеющие химическое образование, навыки работы в химической лаборатории и опыт работ в области аналитической химии.

А.8 Требования к маркировке и хранению

А.8.1 Маркировку колб с аттестованными смесями и образцами для контроля проводят с указанием названия и номера смеси и массовой концентрации в ней приоритетных ПАУ, а также даты приготовления растворов.

А.8.2 Аттестованные смеси и образцы для контроля хранят в соответствии с требованиями, изложенными в А.4.3 и А.4.4.