Приложение 3. Временные рекомендации по лабораторной диагностике новой коронавирусной инфекции, вызванной 2019-nCoV

Приложение 3
к приказу министерства здравоохранения
Новосибирской области
от 29 января 2020 г. N 174

Временные рекомендации по лабораторной диагностике новой коронавирусной инфекции, вызванной 2019-nCoV

1. Рекомендации предназначены для специалистов диагностических лабораторий и заинтересованных сторон, участвующих в лабораторном обследовании пациентов, которые соответствуют определению предполагаемого случая инфекции, ассоциированного с новым коронавирусом 2019-nCoV (далее - заболевание 2019-nCoV), выявленным в г. Ухань (Китайская Народная Республика).

2. Организация лабораторной диагностики 2019-nCoV до особого распоряжения осуществляется в соответствии с требованиями санитарного законодательства по работе с микроорганизмами II групп патогенности.

3. От больных или контактных с заболевшими отбираются пробы для проведения лабораторной диагностики заболевания 2019-nCoV.

4. Образцы, подлежащие сбору (Таблица 1):

4.1. Респираторный материал* (мазок из носоглотки и ротоглотки, мокрота (при наличии) и/или эндотрахеальный аспират или бронхоальвеолярный лаваж);

4.2. Сыворотка для серологического исследования, образец, отобранный в острый период и в период реконвалесценции (дополнительно к респираторным материалам, что может поддержать идентификацию истинного агента, как только серологический анализ будет доступен).

5. Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет работник медицинской организации, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность микроорганизмами II группы патогенности.

Выбор времени забора клинического материала очень важен, так как, предположительно, наиболее высокое содержание вируса в дыхательных органах человека может быть в течение первых 4-х дней после появления признаков заболевания. Образцы должны быть собраны в течение 3-х суток после появления клинических признаков заболевания.

От одного больного отбирают не менее 3-х видов клинического материала. Обязательно забираются мазки из полости носа, носо- и ротоглотки.

Для посмертной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки.

Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.

Обследованию подлежат:

1) больные с тяжелыми формами ОРВИ, находящиеся на лечении в отделении реанимации, не зависимо от эпидемиологического анамнеза и факта пребывания в Китае;

2) больные с диагнозом ОРВИ любой степени тяжести, при наличии в анамнезе пребывание в Китае не позднее 14 дней до начала заболевания.

Таблица 1. Образцы материала от людей, подлежащие сбору для лабораторной диагностики 2019-nCoV

Тип образца	Требования к сбору материала	Транспортировка	Условия хранения до тестирования	Комментарии
Мазок из зева 2 образца	Пластиковые пробирки и тампоны для мазков**	4° С	Менее 5 дней: 4 °С Более 5 дней*: - 70°С	тампоны ДОЛЖНЫ быть помещены в разные (2) пробирки
Мазок из носа 2 образца	Пластиковые пробирки и тампоны для мазков**	4° С	Менее 5 дней: 4°С Более 5 дней*: - 70°С	тампоны ДОЛЖНЫ быть помещены в разные (2) пробирки
Ткани биопсии или аутопсии включая легкие	Стерильный контейнер с физиологически м раствором**	4° С	менее 24 часов: 4°С более 24 часов*: - 70°С

* - при невозможности обеспечить хранение при минус 70° С, образцы хранить при минус 20°С;

** - для транспортировки образцов используют пластиковые стерильные пробирки емкостью 5 мл с закручивающейся пробкой с универсальной транспортной средой для выделения вирусов (можно приобрести готовые пробирки); или готовится раствор по следующей прописи: на 1 литр 0,9% стерильного физраствора добавляется 2 млн ЕД пенициллина, 200 мг стрептомицина и 200 мл гентамицина. В пробирке должно быть не менее 1,5 мл. транспортной среды.

Избегать повторного замораживания и оттаивания образцов.

6. Все образцы, собранные для лабораторных исследований, должны рассматриваться как потенциально инфекционные, и медицинский персонал, который собирает или перевозит клинические образцы, должны строго соблюдать требования биологической безопасности как при работе с микроорганизмами II группы патогенности.

Медицинские работники, которые собирают образцы, должны использовать соответствующие СИЗ.

Медицинские работники, выполняющие аэрозольные процедуры (например, аспирацию или открытое отсасывание образцов дыхательных путей, интубацию, сердечно-легочную реанимацию, бронхоскопию), используют:

1) респираторы типа FFP2 или эквивалент, или более высокий уровень защиты (пневмошлем),

2) очки для защиты глаз или защитный экран,

3) противочумный халат и перчатки, водонепроницаемый фартук при проведении процедур, где ожидается, что жидкость может попасть на халат или специальные защитные комплекты.

Необходимо ограничить число лиц, присутствующих в комнате, до минимума, необходимого для сбора образцов. Обязательно следовать требованиям санитарных правил по использованию СИЗ согласно инструкции по применению.

Все используемые материалы должны быть утилизированы надлежащим образом. Дезинфекция рабочих зон и обеззараживание возможных разливов крови или инфекционных жидкостей организма должны проводиться в соответствии с утвержденными процедурами с использованием дезинфекционных средств на основе хлора.

7. На настоящем этапе первичное исследование материала, подозрительного на содержание коронавируса 2019-nCoV, осуществляют методами полимеразной цепной реакции (далее - ПЦР) на базе Федерального бюджетного учреждения науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (далее - ФБУН "ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора).

Доставка материала из медицинских организаций Новосибирской области осуществляется в лабораторию особо-опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области" по адресу: г. Новосибирск, ул. Челюскинцев, 7а, а далее лаборатория направляет образцы в ФБУН "ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора.

Единичный отрицательный результат теста, особенно если это образец из верхних дыхательных путей, не исключает инфекции. Отбор проб из нижних дыхательных путей должен быть проверен на содержание нового коронавируса 2019-nCoV, особенно при тяжелом или прогрессирующем заболевании. Обнаружение любого другого патогена в образцах от больного не исключает заболевания 2020-nCoV, поскольку пока мало известно о роли микст-инфекций в развитии заболевания.

8. Перевозка образцов должна осуществляться в соответствии с требованиями санитарного законодательства по отношению к микроорганизмам II группы патогенности:

1) в транспортной емкости (плотно закрывающиеся пластмассовые пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками, проверенные на герметичность);

2) плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируют различными пластификаторами (парафин, парафилм и др.);

3) емкость маркируют;

4) транспортную емкость помещают в плотную упаковку подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве достаточном для адсорбции всего образца в случае его протечки;

5) упаковка должна быть герметична заклеена или запаяна;

6) в отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают бланк направления с указанием следующих данных: наименование направляющего материал учреждения, ФИО больного, его возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, сопутствующие заболевания (при наличии), вид материала, дата и время отбора материала.

Запрещается упаковывать образцы клинического материала от разных людей в одну упаковку.

Герметично закрытые упаковки помещают в герметично закрывающийся металлический контейнер для транспортировки биологических материалов.

Контейнер помещают в пенопластовый термоконтейнер с охлаждающими термоэлементами. К наружной стенке термоконтейнера необходимо прикрепить этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения.

Результаты лабораторных исследований оформляются соответствующими документами и направляются в адрес соответствующей медицинской организации.

При получении положительных на 2020-nCoV результатов на любом из этапов диагностики информация немедленно направляется в Управление Роспотребнадзора по Новосибирской области в соответствии с порядком оповещения.