Национальный стандарт РФ ГОСТ Р 58483-2019 "Средства родентицидные. Методы оценки биологической эффективности" (утв. и введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 8 августа 2019 г. N 464-ст)

Rodenticides. Methods for biological performance evaluations

ОКС 13.02.01
Т58

Дата введения - 1 июня 2020 г.
Введен впервые

Предисловие

1 Разработан Федеральным бюджетным учреждением науки "Научно-исследовательский институт дезинфектологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Негосударственным научно-образовательным учреждением "Институт пест-менеджмента"

2 Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 339 "Безопасность сырья, материалов и веществ"

3 Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 8 августа 2019 г. N 464-ст

4 Введен впервые

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на родентицидные средства и устанавливает методы оценки их биологической эффективности в лабораторных условиях.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использована нормативная ссылка на следующий стандарт:

ГОСТ Р 58482 Средства родентицидные. Методы определения токсикологических показателей

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального органа исполнительной власти в сфере стандартизации в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1

пестициды: Химические или биологические препараты, используемые для борьбы с вредителями и болезнями растений, сорными растениями, вредителями хранящейся сельскохозяйственной продукции, бытовыми вредителями и внешними паразитами животных, а также для регулирования роста растений, предуборочного удаления листьев (дефолианты), предуборочного подсушивания растений (десиканты). [Федеральный закон [1], статья 1]

3.2 родентицидное средство: Пестицид, используемый для уничтожения грызунов.

Примечание - Родентицидные средства должны содержать заданное количество действующего вещества, краситель, пищевую горечь (битрекс). В зависимости от способа применения их готовят на пищевой основе (родентицидные приманки) или другой основе (родентицидные покрытия).

3.3 действующее вещество; ДВ: Химическое вещество или смесь химических веществ в составе родентицидного средства, вызывающее(ая) гибель грызунов.

3.4 биологическая (целевая) эффективность родентицидного средства: Результат применения родентицидного средства, выраженный количественными показателями гибели грызунов в процентах от общего числа грызунов.

Примечание - Количественными показателями целевой эффективности родентицидного средства являются: относительная поедаемость родентицидной приманки в процентах от общего количества съеденного корма и относительное количество погибших животных в процентах от общего числа животных (для родентицидной приманки и родентицидного покрытия).

3.5 родентицидный концентрат: Родентицидное средство с повышенной концентрацией действующего вещества, содержащее краситель, битрекс и другие добавки, предназначенное для приготовления родентицидных приманок.

Примечание - Родентицидные концентраты, как правило, содержат количество ДВ в 30-100 раз превышающее его содержание в родентицидной приманке. Например, родентицидные концентраты (антикоагулянты второго поколения) содержат, как правило, от 0,15 % до 0,5 % действующего вещества, в зависимости от его токсичности, и имеются в продаже в виде водных, гликолевых или масляных растворов, эмульсий, гелей, паст, порошков, сухих концентратов и др.

3.6 родентицидная приманка: Готовое к применению родентицидное средство с заданной концентрацией действующего вещества или приготовленное из родентицидного концентрата путем смешивания с пищевой основой, окрашенное в предостерегающий цвет, вызывающее гибель грызуна в результате поедания средства.

Примечание - Готовые к применению родентицидные приманки имеются в продаже в виде мягких, тесто-сырных, парафинированных брикетов, зерновых и гранулированных приманок и др. и содержат, например 0,005 % ДВ (для антикоагулянтов второго поколения).

3.7 родентицидное покрытие: Родентицидное средство с заданной концентрацией действующего вещества (дуст, паста, пена и др.), наносимое на поверхности в местах перемещения грызунов и вызывающее их гибель после контакта с обработанной поверхностью в результате слизывания покрытия с покровов тела.

3.8 родентицидное средство кумулятивного действия: Родентицидное средство, содержащее химическое вещество или смесь химических веществ, вызывающих гибель грызунов в результате их накопления при многократном потреблении (в том числе небольшими дозами) в течение 3-6 сут.

3.9 родентицидное средство острого действия: Родентицидное средство, содержащее химическое вещество или смесь химических веществ, однократное потребление которого вызывает гибель грызунов в срок до 48 час.

3.10 родентицидное средство подострого действия: Родентицидное средство, содержащее химическое вещество или смесь химических веществ, однократное потребление которого вызывает гибель грызунов в срок более 48 час.

4 Общие положения

4.1 Подопытные животные

4.1.1 Для испытаний используют потомков диких грызунов (крыс, мышей, полевок и др.) до четвертого поколения включительно, выращенных в условиях вивария. Диких грызунов для испытаний не используют.

4.1.2 Для испытаний отбирают здоровых половозрелых грызунов возрастом от двух мес, массой тела - серые крысы от 150 до 350 г, домовые мыши от 12 до 30 г, рыжие и серые полевки от 17 до 35 г, исключая беременных и лактирующих самок.

Массу тела грызуна определяют в начале испытания и при его окончании.

4.2 Условия содержания подопытных животных

Лабораторное помещение для проведения испытаний должно быть изолировано от других помещений вивария, иметь естественное или искусственное освещение с чередованием - 12 ч свет и 12 ч темнота. В помещении поддерживают температуру окружающей среды от 20 °С до 26 °С и относительную влажность воздуха от 30 % до 70 %. Значения температуры и относительной влажности воздуха ежедневно регистрируют в журнале в соответствии с [2] и [3].

Используют стандартный рацион питания и неограниченный доступ к питьевой воде. Основной рацион составляет гранулированный корм, соответствующий виду животных [2]. Допускается использовать зерновую смесь и зерно. Используют питьевую воду без постороннего запаха и привкуса с рН 6,8-7,0. Конструкция автоматических поилок должна исключать загрязнение воды.

Перед началом испытания грызунов в течение трех дней выдерживают в экспериментальных клетках для адаптации к условиям содержания и кормления.

5 Биологическая (целевая) эффективность родентицидных средств

5.1 Биологическая (целевая) эффективность родентицидной приманки

Биологическую эффективность родентицидной приманки определяют по ее воздействию на грызунов, выражаемую показателями гибели целевых грызунов, в соответствии с таблицей А.1 (приложение А).

Биологическую эффективность родентицидной приманки в лабораторных условиях определяют по двум показателям:

- относительной поедаемости приманки в процентах от общего количества съеденного корма;

- относительному количеству погибших животных в процентах от их общего числа.

5.2 Биологическая (целевая) эффективность родентицидного покрытия

Биологическую эффективность родентицидного покрытия, выражаемую показателями гибели целевых грызунов, оценивают по относительному количеству погибших животных в процентах от общего числа животных и определяют в соответствии с таблицей А.1 (приложение А).

6 Определение биологической (целевой) эффективности родентицидной приманки

6.1 Определение дозы действующего вещества в родентицидной приманке

6.1.1 Определение дозы ДВ в родентицидной приманке основано на значении дозы ДВ, вызывающей гибель 50 % животных (LD₅₀), определенном по ГОСТ Р 58482 или представленном изготовителем.

6.1.2 Число подопытных животных

Для каждого испытания используют 10 особей одного вида разного пола (5 самцов и 5 самок) при одиночном содержании животных.

Во время испытаний животным обеспечивают свободный доступ к воде и корму.

Для первой подопытной группы используют родентицидную приманку, содержащую дозу ДВ, соответствующую значению LD₅₀.

Готовую родентицидную приманку используют без предварительной подготовки.

Заданное содержание ДВ в родентицидной приманке в процентах вычисляют, исходя из ее среднесуточного потребления грызунами. Всем животным первой подопытной группы в кормушки помещают приманку с заданным значением содержания ДВ.

Вычисляют среднеарифметическое значение массы крыс m_Vx в начале эксперимента по формуле

,

(1)

где - значение массы каждой крысы (от 1 до n) в начале эксперимента, г;

n - число крыс в начале эксперимента;

- значение суммы массы n крыс в начале эксперимента.

Пример

Значение LD₅₀ действующего вещества острого действия для серых крыс составляет 5 мг/кг массы тела:

вычисляют среднеарифметическое значение массы тела крысы в испытании по формуле (1) с точностью до второго десятичного знака в килограммах. Получено значение - 0,20 кг;

крыса за время испытания должна получить не менее n мг ДВ, то есть

n = 5 мг/кг  0,20 кг = 1 мг.

Крыса в сутки потребляет приблизительно 30 г родентицидной приманки.

Время испытания - 2 суток.

Вычисляют общее предполагаемое количество родентицидной приманки N, г, которое будет съедено крысой за время испытания N = 30  2 = 60 г.

Соответственно, в 60 г приманки должно содержаться 0,001 г (1 мг) ДВ.

Вычисляют заданное содержание ДВ₂ острого действия в приманке в процентах по формуле

.

Количество родентицидного концентрата K, г, необходимое для приготовления родентицидной приманки, вычисляют по формуле

,

(2)

где П - масса овсяной крупы, необходимая для испытания, г;

- заданное содержание исследуемого ДВ в родентицидной приманке, %;

- содержание ДВ в концентрате, %.

6.1.3 Приготовление родентицидной приманки из концентрата

Для приготовления родентицидной приманки используют родентицидный концентрат, который смешивают с пищевой основой - овсяной крупой. Качество перемешивания контролируют по равномерности окрашивания приманки.

Поедаемость родентицидной приманки (готовой и приготовленной из концентрата) определяют по количеству корма, съеденного грызуном в течение одних суток. С этой целью ежедневно взвешивают остаток корма в кормушке и определяют разницу между первоначальным весом корма и весом остатка.

Испытания проводят:

- в течение двух сут с родентицидами острого действия;

- в течение семи сут с родентицидами кумулятивного и подострого действия.

Затем животных переводят на стандартный рацион питания с неограниченным потреблением воды и продолжают наблюдения:

- в течение 3 сут - для родентицидов острого действия;

- 14 сут - для родентицидов кумулятивного и подострого действия [2].

За всеми животными наблюдают до момента гибели или не менее 14 сут.

Гибель грызунов или их выживание фиксируют в журнале в соответствии с [2].

6.1.4 Определения минимальной дозы ДВ в родентицидной приманке, вызывающей гибель 100 % грызунов

Для определения минимальной дозы ДВ в родентицидной приманке, вызывающей гибель грызунов, соответствующую данным, приведенным в таблице А.1 (приложение А), проводят испытание родентицидных приманок с разным процентным содержанием ДВ.

Содержание ДВ в родентицидных приманках для последующих подопытных групп изменяют двукратно в большую или меньшую сторону в зависимости от результата испытания дозы со значением LD₅₀. Процедуру испытаний по 6.1.3 повторяют, пока не будет достигнута гибель грызунов, соответствующая данным, приведенным в таблице А.1 (приложение А).

За всеми животными наблюдают до момента гибели или не менее 14 сут.

Гибель грызунов или их выживание фиксируют в журнале в соответствии с [2].

6.1.5 Определение относительной поедаемости родентицидной приманки

Для определения относительной поедаемости родентицидной приманки используют родентицидную приманку и контрольный корм, не содержащий действующего вещества, помещаемые в разные маркированные кормушки. Готовую родентицидную приманку используют без предварительной подготовки.

Кормушки размещают на противоположных стенках клетки, ежедневно меняя местами для исключения привыкания грызунов к одному месту кормления. В качестве контрольного (альтернативного) корма используют овсяную крупу, не содержащую действующего вещества. Качество контрольного корма и родентицидной приманки при проведении испытаний должно быть постоянным.

Для одного испытания используют 10 животных (пять самцов и пять самок). В кормушку для крыс помещают не менее 100 г контрольного корма или родентицидной приманки, для мышей - не менее 50 г. Не допускают полного поедания контрольного корма или родентицидной приманки. Кормушки ежедневно взвешивают и добавляют корм до первоначальной массы. Показатель поедаемости определяют по отношению ко