Приложение N 2. Руководство по оценке качества и исследованию биоэквивалентности лекарственных препаратов для парентерального введения, покрытых оболочкой из наночастиц, и лекарственных препаратов на основе коллоидного железа для внутривенного введения

Приложение N 2
к Рекомендации Коллегии
Евразийской экономической комиссии
от 15 сентября 2020 г. N 15

Руководство по оценке качества и исследованию биоэквивалентности лекарственных препаратов для парентерального введения, покрытых оболочкой из наночастиц, и лекарственных препаратов на основе коллоидного железа для внутривенного введения

I. Общая характеристика лекарственных препаратов для парентерального введения, покрытых оболочкой из наночастиц

1. Поверхность лекарственных препаратов для парентерального введения, покрытых оболочкой из наночастиц (далее - нанопрепараты), создается искусственно и взаимодействует с биологической средой, свойства которой зависят от предполагаемого клинического применения и пути введения нанопрепарата в организм (например, с плазмой крови после внутривенного введения).

2. Большинство нанопрепаратов в качестве интегрального компонента структуры имеют нековалентно или ковалентно связанную оболочку. Такая оболочка, как правило, используется для минимизации агрегации и улучшения стабильности готовой лекарственной формы нанопрепарата (например, растворов солей железа для лечения анемии) или в некоторых случаях для минимизации клиренса нанопрепарата ретикулоэндотелиальной системой после внутривенного введения с целью увеличения времени циркуляции вещества в плазме и улучшения направленной доставки к специфическим клеточным мишеням (например, пегилирование в случае с пегилированными липосомами).

3. Оболочка нанопрепарата используется также для гемосовместимости и ограничения антигенности. Данные явления могут возникнуть в связи со специфическим физико-химическим составом нанопрепарата или из-за поверхностной адсорбции биомолекул из биологической среды, в которой они находятся (например, взаимодействие белков плазмы, в результате которого образуется белковая корона).

4. Наличие оболочки позволяет воздействовать на важнейшие свойства нанопрепаратов с точки зрения безопасности и эффективности. Физико-химическая природа оболочки, равномерность ее покрытия и стабильность (в части приверженности и склонности к деградации) будут регулировать фармакокинетику, биораспределение нанопрепарата и его внутриклеточный путь. Помимо этого, клинически наблюдаемые реакции на некоторые нанопрепараты, связанные с их инфузией (например, растворы железа и пегилированные липосомы), могут быть обусловлены физико-химическими свойствами материала оболочки нанопрепарата, специфическим биомолекулярным взаимодействием с нанопрепаратами (например, активация комплемента) и (или) клеточным взаимодействием. В некоторых случаях материал оболочки может вызывать новые биореакции, не отмечавшиеся в отношении материала оболочки или немодифицированной поверхности нанопрепарата в отдельности.

5. Продолжающиеся исследования быстро приводят к появлению более сложных модификаций поверхностей нанопрепаратов и некоторых продуктов наномедицины уже на стадии клинической разработки (например, липосомы, предназначенные для рецепторно-опосредованного наведения). В связи с этим использование лигандов (например, белков) для продвижения рецепторно-опосредованного наведения требует тщательного изучения химического механизма, используемого для их прикрепления. Контроль лигандной ориентации важен, поскольку неоднородность будет влиять на фармакокинетику и биораспределение нанопрепарата. Кроме того, случайная ориентация может привести к новой модели биомолекулярной ассоциации с поверхностью нанопрепарата, что, в свою очередь, может повлиять на его безопасность.

6. При фармацевтической разработке нанопрепаратов необходимо тщательно изучить как ковалентно, так и нековалентно связанные оболочки с точки зрения их потенциального влияния на безопасность и эффективность нанопрепарата.

Согласно пункту 26 Правил регистрации и экспертизы лекарственных средств для медицинского применения, утвержденных Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. N 78, заявитель вправе обратиться в уполномоченные органы или экспертные организации государств - членов Евразийского экономического союза (далее - государства-члены) за научной и предрегистрационной консультацией в соответствии с законодательством государств-членов при разработке каждого конкретного вида нанопрепаратов.

7. Общие вопросы для рассмотрения в процессе разработки нанопрепаратов с ковалетно или нековалентно связанной оболочкой включают в себя:

а) влияние оболочки на стабильность готовой лекарственной формы нанопрепарата (например, липосомы с полимерным покрытием);

б) влияние оболочки на фармакокинетику и биораспределение действующего вещества нанопрепарата (например, липосомы с полимерным покрытием);

в) влияние оболочки (физико-химические характеристики) на биомолекулярное взаимодействие (включая опсонизацию) и клеточное взаимодействие в биологической среде предполагаемого применения;

г) возможность материала оболочки вызывать неспецифическую (как правило, зарядово-зависимые и гидрофобные взаимодействия) и (или) рецепторно-опосредованную клеточную направленную доставку (например, рецепторы полисахаридов (глюкозы)). Например, изменение в структуре клеток печени (клетки Купфера: соотношение гепатоцитов);

д) вероятность влияния оболочки на метаболический путь инкапсулированного активного вещества.

II. Представление информации о нанопрепарате в регистрационном досье

8. Изучение и описание показателей качества, данных доклинических и клинических исследований необходимы для корректной оценки безопасности, качества и эффективности нанопрепаратов. В целях выполнения оценки безопасности, качества и эффективности нанопрепарата в регистрационном досье должны быть представлены:

полное описание материала оболочки нанопрепарата (включая состав и контроль показателей качества оболочки). В случае если покрывающий агент (или при добавлении специфического к определенным мишеням лиганда) включает в себя сложную молекулу (например, белки или антитела), для оценки их совместимости и воспроизводимости могут потребоваться дополнительные характеристики;

полная валидация этапов покрытия нанопрепарата оболочкой (включая описание химических веществ, отвечающих за прикрепление нековалентных оболочек или конъюгацию ковалентно связанного материала оболочки), а также определение физико-химических свойств поверхности нанопрепарата, к которой оболочка присоединяется или с которой ковалентно связывается;

оценка потенциального влияния неоднородности покрытия оболочки нанопрепарата на его безопасность и эффективность;

определение ориентации и конформационного статуса лиганда, участвующего в активном формировании остатков, специфичных для мишеней на поверхности нанопрепарата;

оценка стабильности оболочки нанопрепарата (устойчивость при хранении и в процессе применения) и ее способности к отделению и (или) разрушению (деградации). Преждевременное отделение материала оболочки и (или) ее разрушение (деградация) могут иметь важное значение для появления новых функциональных групп на поверхности нанопрепарата. Возможные последствия этого процесса с точки зрения эффективности и безопасности нанопрепарата должны быть изучены и проанализированы;

определение in vitro физико-химической стабильности оболочки нанопрепарата в отношении предполагаемого использования в условиях, соответствующих способу введения, фармакокинетике и биораспределению для целевого заболевания;

результаты анализа воздействия in vivo разных покрывающих материалов (покрытий поверхности нанопрепарата) на фармакокинетику и биораспределение.

Необходимо изучить биораспределение высвобождающегося материала из оболочки нанопрепарата и метаболитов этого материала.

Контроль и обеспечение качества нанопрепаратов не могут осуществляться только на основании набора технических показателей качества (спецификаций на выпуск) готового нанопрепарата. Требуется четко определенный и контролируемый производственный процесс, дополняемый соответствующей стратегией контроля (адекватный процесс контроля критических этапов производства, включая процесс покрытия оболочкой).

9. При разработке нанопрепарата необходимо тщательно проанализировать возможное влияние оболочки на эффективность и безопасность нанопрепарата. Данная информация имеет решающее значение при оценке исследований, которые планируются с целью:

а) подтверждения клинической эффективности и безопасности первого применения нанопрепарата в отношении человека;

б) изучения клинической эффективности и безопасности нанопрепарата на предрегистрационном или пострегистрационном этапе при внесении изменений в процесс его производства;

в) подтверждения сопоставимости (эквивалентности) нанопрепарата и разработанного воспроизведенного аналога референтного нанопрепарата.

III. Представление информации в регистрационном досье воспроизведенных лекарственных коллоидных нанопрепаратов железа для внутривенного введения

10. При сравнении воспроизведенных лекарственных коллоидных нанопрепаратов железа для внутривенного введения (далее - наноколлоидные препараты железа) определение характеристик качества не является достаточной гарантией сопоставимости (эквивалентности) 2 лекарственных средств (референтного и воспроизведенного), даже если их подобие было установлено на основании качественного анализа. Для доказательства сопоставимости (эквивалентности) воспроизведенных наноколлоидных препаратов железа используется подход, основанный на комплексной оценке данных исследований качества, доклинических исследований и исследований фармакокинетики с участием человека.

11. Наноколлоидные препараты железа, применяемые для лечения дефицита железа, состоят из многоядерного центра, содержащего атомы железа, преимущественно в виде железа (III) оксигидроксида, стабилизированного углеводным комплексом, что обусловливает их наноколлоидную структуру.

12. При парентеральном введении комплекс наножелеза попадает в клетки путем эндоцитоза (то есть через клетки ретикулоэндотелиальной системы). После внутривенного введения различных препаратов железа отмечалось, что они обнаруживаются в макрофагах печени или гепатоцитах.

13. Высвобождение железа зависит от размера и свойств поверхности коллоидного комплекса железа и матрицы. Кроме того, подверженность углеводов внутриклеточному распаду (высокая скорость распада) также может оказывать влияние на высвобождение железа. Транспорт (перенос) и (или) аккумуляция наноколлоидных препаратов железа в клетках любого типа могут создать риски для применения.

14. Сложность исчерпывающего установления характеристик и определения частиц комплекса железа только с помощью методов качественного анализа, а также неопределенный характер взаимосвязи качественных показателей с показателями in vivo фармакокинетики наноколлоидных препаратов железа требуют проведения дополнительных исследований. Сопоставление качества референтного и воспроизведенного наноколлоидных препаратов железа и подтверждение подобия концентраций железа в плазме (стандартное исследование биоэквивалентности) являются недостаточными для подтверждения сопоставимости (эквивалентности) путей метаболизма in vivo этих препаратов и их токсического и фармакологического действия. В связи с этим в дополнение к клиническим данным по фармакокинетике требуются доклинические данные. Требуемый объем дополнительных доклинических и клинических данных зависит от того, насколько точно результаты физико-химических и доклинических исследований позволяют прогнозировать различия, которые могут повлиять на эффективность и безопасность лекарственного препарата. Дальнейшие клинические исследования могут потребоваться в случае, если результаты исследований качества, фармакокинетики с участием человека и доклинических исследований не содержат весомые доказательства подобия препаратов.

15. В настоящем разделе приведены указания по представлению сравнительных данных исследований качества, доклинических исследований и клинических исследований фармакокинетики, необходимых для регистрации воспроизведенных наноколлоидных препаратов железа, включая:

а) фармацевтические данные, необходимые для подтверждения сопоставимости (эквивалентности) воспроизведенного и референтного препаратов, содержащие одинаковые сравнительные данные о безопасности и эффективности;

б) выбор типов доклинических и клинических исследований, необходимых для подтверждения данных, доказывающих подобие препаратов.

16. Указанные в настоящем разделе принципы следует учитывать при установлении требований к данным, на основании которых вносятся изменения в производственный процесс и систему контроля существующих наноколлоидных препаратов железа.

1. Исследование качества

17. Расширенная оценка сопоставимости с референтным лекарственным препаратом необходима для подтверждения высокой степени подобия профиля качества воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа. Такая оценка включает в себя всесторонний непосредственный анализ воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа с использованием чувствительных методов для определения не только подобных свойств, но и потенциальных различий в характеристиках качества.

18. Потенциальное влияние каких-либо различий в характеристиках качества на безопасность и эффективность воспроизведенного наноколлоидного препарата железа должно быть надлежащим образом установлено. Если такие существенные различия в характеристиках качества подтверждаются, наноколлоидный препарат железа не следует рассматривать как воспроизведенный и предпочтительным является его регистрация в качестве референтного лекарственного препарата. С целью устранения установленных различий заявитель может внести в производственной процесс изменения, которые позволят зарегистрировать наноколлоидный препарат железа в качестве воспроизведенного лекарственного препарата.

19. Установление химических и физических характеристик является важным инструментом для подтверждения сопоставимости воспроизведенного наноколлоидного препарата железа с референтным наноколлоидным препаратом железа. Необходимо гарантировать постоянное качество комплексных препаратов железа за счет четкого определения и контроля производственного процесса и всестороннего описания свойств лекарственного препарата. Результаты могут отличаться в зависимости от используемых методов, и по возможности следует использовать 2 и более дополняющих друг друга аналитических метода для подтверждения сопоставимости и гарантирования постоянства характеристик.

20. Характеристики качества наноколлоидных препаратов железа, которые могут оказывать существенное влияние на эффективность и безопасность препарата, включают в себя:

а) стабильность железо-углеводного комплекса (фракция лабильного железа, высвобождаемая в момент введения препарата, а также краткосрочная стабильность в плазме), поскольку лабильное железо оказывает прямой токсический эффект и может влиять на фармакокинетику и распределение препарата в организме;

б) физико-химические свойства углеводной матрицы, связанные с:

вероятностью возникновения анафилактических (псевдоанафилактических) реакций;

влиянием на фармакокинетику и распределение в организме;

образованием специфических продуктов распада углеводной оболочки;

в) физико-химические свойства железа и железо-углеводного комплекса, включая размер железосодержащего ядра, размер железо-углеводного комплекса и его распределение по размеру.

Установление характеристик качества воспроизведенного наноколлоидного препарата железа

21. Корректное определение параметров, описывающих релевантные физико-химические свойства наноколлоидного препарата железа, является исключительно важным для гарантии его качества.

22. При составлении регистрационного досье на любой тип наноколлоидных препаратов железа необходимо представить сведения о следующих параметрах:

а) стандарт качества для углеводов, используемых в производстве фармацевтических субстанций и готовых препаратов (описание, источник установления характеристик, производство, количественный анализ, состав примесей и характеристики стабильности);

б) строение и состав углеводной матрицы;

в) спектроскопические свойства (например, ПМР на ядрах , ЯМР на ядрах , ИК-спектрометрия, оптическая спектроскопия, масс-спектрометрия, рентгенодифракционный анализ);

г) определение и контроль ключевых промежуточных продуктов в производственном процессе;

д) размер железосодержащего ядра;

е) объем лабильного железа, высвобождаемый из препарата при введении;

ж) полиморфные формы железа, составляющего ядро;

з) примеси (например, соотношение двухвалентного и трехвалентного железа);

и) морфология (например, микроскопический анализ поверхности препарата);

к) соотношение связанных углеводов и железа;

л) размер частиц, распределение по размеру, заряд и свойства поверхности железо-углеводных комплексов;

м) путь распада железо-углеводного комплекса;

н) разработанный надежный и дискриминативный метод для определения кинетики распада наноколлоидных препаратов железа (в случае, если это обосновано). Следует принимать во внимание, что изучение деградации наноколлоидных препаратов железа в кислой среде не является надежным и дискриминативным методом;

о) стабильность препарата при хранении;

п) стабильность препарата при применении (включая препарат, восстановленный при помощи рекомендуемых для применения растворителей) с учетом указаний по применению, изложенных в общей характеристике референтного препарата (например, определенная концентрация).

23. От качества и чистоты исходного материала (углеводов) в большой степени зависит качество готового наноколлоидного препарата железа, следовательно, важно осуществлять надлежащее описание характеристик и спецификаций исходного материала. В некоторых случаях исходный материал углеводов в дальнейшем модифицируется. Зачастую углеводы активируются для инициирования их связывания. Обработка при высоких температурах или даже стерилизация паром готового препарата (по возможности) могут повлиять на состав углеводной матрицы. Необходимо контролировать различные типы углеводов и их содержание в исходном материале. Исходные материалы, предусмотренные Фармакопеей Евразийского экономического союза или фармакопеями государств-членов, должны соответствовать по показателям качества фармакопейным требованиям. При этом для подтверждения соответствия референтного лекарственного средства требуются более детальные спецификации в отношении отдельных параметров. При использовании компонентов из разных источников потребуется установление дополнительных характеристик и проведение исследования сопоставимости.

24. Должен быть утвержден список необходимых плановых испытаний наноколлоидных препаратов железа с учетом соответствующих статей Фармакопеи Евразийского экономического союза, а при отсутствии в ней - соответствующих статей фармакопей государств-членов. Данный список должен быть составлен на основании параметров, используемых для установления характеристик лекарственной формы, как описано выше. Необходимо разработать аналитические методы для установления характеристик и проведения контрольных испытаний для гарантии целостности и стабильности комплексов железа в процессе аналитических исследований (например, отсутствия изменений размеров комплекса при разбавлении).

25. Для обеспечения безопасности наноколлоидных препаратов железа и исключения рисков, связанных с лабильным железом, важным этапом является разработка методов определения лабильного железа in vitro для подтверждения подобия препаратов, гарантии однородности выпускаемых серий и определения влияния вносимых изменений на производственные процессы.

26. Измерение содержания лабильного железа может осуществляться разными методами, но индикаторными в отношении лабильного железа являются следующие методы:

а) исследования кинетики восстановления железа (III) при деструкции наноколлоидного препарата железа под действием кислоты с УФ-детектированием. Такие исследования также включаются в спецификацию на наноколлоидные препараты железа. Допустимые пределы (как нижний, так и верхний) должны устанавливаться на основании характеристик серий, в которых установлено высвобождение необходимого объема лабильного железа в испытаниях in vitro;

б) исследования передачи лабильного железа in vitro, направленные на измерение прямой передачи лабильного железа от лекарственного препарата трансферрину in vitro и проводимые путем добавления наноколлоидного препарата железа в раствор трансферрина или в сыворотку крови (человека или животного). Данные исследования могут использоваться для подтверждения сопоставимости воспроизведенного препарата с референтным наноколлоидным препаратом железа. Данные об исследовании передачи лабильного железа in vitro должны быть включены в спецификацию лекарственного препарата изначально. До накопления производственного опыта интервалы между повторными исследованиями должны быть сокращены.

Установление фармацевтической сопоставимости между воспроизведенным и референтным наноколлоидными препаратами железа

27. Состав разработанного воспроизведенного наноколлоидного препарата железа по качественным и количественным характеристикам должен быть идентичен или практически идентичен составу референтного наноколлоидного препарата железа.

28. Для осуществления всестороннего анализа и составления показательного профиля качества следует использовать несколько различных серий референтного лекарственного средства.

29. Для установления целевого профиля качества необходимо также учитывать дату производства отдельных серий референтного лекарственного средства.

30. Необходимо описать химический состав углеводов и сравнить его с составом референтного наноколлоидного препарата железа в рамках оценки химического подобия препаратов. Любые различия в составе углеводной матрицы могут привести к повышению требований к данным с целью подтверждения подобия воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа, а также могут привести к возникновению серьезных замечаний со стороны уполномоченного органа государства-члена при рассмотрении подобия химического состава.

31. Как правило, заявитель не имеет доступа к сведениям о процессе производства референтного наноколлоидного препарата железа. Следовательно, необходимо провести всесторонние исследования с помощью самых современных методов установления характеристик параллельно для обоих препаратов с целью предоставления полной гарантии того, что их характеристики сопоставимы. Такие исследования должны включать в себя все испытания, необходимые для адекватного описания воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа. Следует рассмотреть пригодность отобранных испытаний для установления эквивалентности действия лекарственного препарата in vivo. Любые различия между препаратами, установленные в процессе исследований сопоставимости, должны быть рассмотрены, детально проанализированы и обоснованы в рамках их потенциального влияния на безопасность (эффективность).

32. Для обеспечения производства препарата надлежащего качества на постоянной основе требуется четко определенный производственный процесс с надлежащим контролем. Критические параметры производственного процесса должны определяться на основании подходящей стратегии контроля.

33. Некоторые критические характеристики, связанные с показателями in vivo, невозможно точно оценить с использованием только 1 критерия (например, размер частиц, форма, площадь поверхности и ее свойства). В таком случае по возможности предпочтительно использовать 2 и более дополняющих аналитических метода, основанных на разных принципах, с целью подтверждения большей сопоставимости 2 препаратов.

34. Помимо исследований для установления характеристик в нормальных условиях, необходимо также проводить ускоренные испытания стабильности наноколлоидных препаратов железа с целью сравнения их физической и химической деградации.

35. Все серии референтного препарата, участвующие в исследованиях для установления характеристик, должны быть проанализированы до истечения срока годности и до проведения анализа должны храниться при соблюдении рекомендуемых условий.

36. Любые отличия от референтного наноколлоидного препарата железа, установленные в ходе исследований сопоставимости, должны быть изучены и детально проанализированы. Для принятия решения о необходимости дальнейших исследований, требуемых для подтверждения того, что разработанный воспроизведенный и референтный наноколлоидные препараты железа оказывают подобное терапевтическое действие, следует руководствоваться принципами, изложенными в главах 9.1 и 9.2 Правил проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза, утвержденных Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. N 89.

37. Подход к определению влияния любых изменений зависит от конкретного производственного процесса, от наноколлоидного препарата железа, от опытности и компетентности производителя и собранных данных о разработке. Необходимо проводить сравнительные исследования при внесении изменений в производственный процесс на этапе разработки, а также после получения регистрационного удостоверения лекарственного препарата (например, для увеличения объемов производства). Сравнительные исследования разработанного воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа также должны проводиться в случае изменения места производства воспроизведенного наноколлоидного препарата железа.

2. Доклинические исследования наноколлоидных препаратов железа

Аналитические методы

38. Для сравнения воспроизведенного наноколлоидного препарата железа с референтным препаратом требуются разработка и валидация аналитических методов количественного определения аналитов в крови (плазме) и в тканях. Следует подробно изучить влияние всех процедур обработки образцов в процессе разработки аналитических методов количественного определения аналитов в крови (плазме) и в тканях с применением методологии для подтверждения пригодности и интерпретируемости всех результатов биоанализа.

39. Должны быть приведены нижние пороги количественного определения и степени извлечения для плазмы, тканей и при необходимости для отдельных исследуемых тканей по форме, приведенной в таблице.

Таблица

Депо, задействованные в распределении наноколлоидных препаратов железа для лечения дефицита железа

Вид депо (примерный перечень)	Предел количественного определения	Степень извлечения
1. Плазма (или сыворотка) и эритроциты
2. Макрофаги РЭС
селезенка
печень (клетки Купфера)
3. Фармакологические ткани-мишени
костный мозг
4. Токсикологические ткани-мишени
ночки
печень (гепатоциты)
легкие
сердце

Исследования биораспределения наноколлоидных препаратов железа

40. Доклинические исследования планируются с целью подтверждения сопоставимости воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа. Исследования должны проводиться в соответствии с Правилами надлежащей лабораторной практики Евразийского экономического союза в сфере обращения лекарственных средств, утвержденными Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. N 81, если не обосновано иное (например, необходимость использования специализированных тест-систем).

41. Доклинические исследования воспроизведенного и референтного наноколлоидных препаратов железа проводятся после детального установления их характеристик. Воспроизведенный наноколлоидный препарат железа должен быть изготовлен в ходе полномасштабного (промышленного) процесса и предпочтительно взят из той же серии, которая будет использована в клинических исследованиях.

42. Считается, что при парентеральном введении наночастицы железа распознаются ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, лимфатические узлы, костный мозг, легкие и т. д.) и подвергаются фагоцитозу макрофагами, но также могут перерабатываться эндотелиальными или эпителиальными клетками (например, гепатоцитами) путем эндоцитоза. Интернализация железа может проходить разными путями в зависимости от свойств поверхности наночастиц и адсорбции белков (формирование белковой короны). Следовательно, фагоцитоз, вызываемый явлениями, подобными опсонизации, будет проходить разными путями и с разной скоростью, что с большой долей вероятности приведет к существенной межвидовой вариабельности.

43. Некоторые аспекты фармакокинетики наноколлоидных препаратов железа у человека могут быт