Методические указания МУК 4.1.1398-03 "Определение остаточных количеств пропамокарб гидрохлорида в воде, почве, капусте, огурцах и томатах газохроматографическим методом" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Методические указания
МУК 4.1.1398-03
"Определение остаточных количеств пропамокарб гидрохлорида в воде, почве, капусте, огурцах и томатах газохроматографическим методом"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Дата введения: 30 июня 2003 г.
Введены впервые

2. Методика определения остаточных количеств пропамокарб гидрохлорида в воде, почве, капусте, огурцах и томатах газохроматографическим методом

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на газохроматографическом определении пропамокарб гидрохлорида с ТИД на неподвижной фазе FFAP после экстракции его из воды диизопропиловым эфиром, из почвы и растительного материала - подкисленным метанолом, очистки экстракта перераспределением в системе растворителей.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании капусты, огурцов и томатов.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Таблица

Метрологическая характеристика метода

Анализируемый объект	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	предел обнаружения, мг/дм3, мг/кг	диапазон определяемых концентраций, мг/дм3, мг/кг	среднее значение определения, %	стандартное отклонение, S,%	доверительный интервал среднего результата, %
Вода	0,0025	0,0025 - 0,025	87,8	4,7	+- 4,4
Почва	0,025	0,025 - 0,20	82,3	5,9	+- 5,5
Капуста	0,05	0,05 - 0,5	86,4	8,4	+- 7,8
Огурцы	0,05	0,05 - 0,5	89,6	6,8	+- 6,3
Томаты	0,05	0,05 - 0,5	86,5	3,8	+- 3,5

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Пропамокарб гидрохлорид с содержанием д.в. 76,6%
Пропамокарб (свободное основание) с содержанием д.в. 98,4%
Спирт метиловый, хч	ГОСТ 6995-77
Хлороформ	ГОСТ 20015-74
Эфир диизопропиловый, хч	ТУ 6-09-3704-84
Вода дистиллированная	ГОСТ 7602-72
Кислота хлороводородная, хч	ГОСТ 3118-77
Натрия гидроксид, хч	ГОСТ 4328-77
Натрия хлорид	ГОСТ 4233-77
Азот газообразный, осч	ГОСТ 9293-74
Водород, получаемый из генератора водорода	ГОСТ 3023-80
Воздух из баллона	ГОСТ 9.010-80
Вата хлопковая
Стекловата
Целит 535 (2 - 15 мкм) /Серва, Германия/
Фильтры бумажные "синяя лента"	ТУ 6-09-1678
10 н и 32%-ные водные растворы гидроксида натрия
0,1 и 1 н водные растворы хлороводородной кислоты

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф газовый "Цвет-560" с термоионным детектором или другой аналогичного типа
Хроматографическая колонка металлическая (1800 х 2 мм), неподвижня фаза - 5% FFAP на Supelcoport (0,15 - 0,18 мм)
Аппарат для встряхивания или аналогичный	ТУ 64-1-1081-73
Аппарат Сокслета с бумажными патронами	ОСТ 10075-39
Весы аналитические ВЛР-200 или аналогичные	ГОСТ 19401-74
Гомогенизатор	МРТУ 42-1505-63
Насос водоструйный	ГОСТ 10696-75
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-74
Воронки делительные на 50, 100 и 250 мл	ГОСТ 25336-82Е
Воронка Бюхнера РФ-3, вместимостью 120 мл	ГОСТ 0147-73
Колба Бунзена, вместимостью 250 - 300 мл	ГОСТ 9737-70

ГАРАНТ:

Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г. взамен ГОСТ 9737-70 с 1 января 1995 г. принят ГОСТ 9737-93

Колбы плоскодонные на 250 и 500 мл	ГОСТ 9737-70
Колбы мерные на 50 и 100 мл	ГОСТ 1770-74
Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 500 мл	ГОСТ 9737-70
Колбы грушевидные, вместимостью 50, 100, 250 и 500 мл	ГОСТ 25336-82
Пипетки мерные на 5,0 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки градуированные с притертыми пробками на 5, 10 и 25 мл	ГОСТ 10515-75
Цилиндры мерные на 50, 100 и 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10Ф	ТУ 64-1-2850

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10696-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

По-видимому, в 10 абзаце таблицы допущена опечатка. Имеется в виду "ГОСТ 9147-73"

Взамен ГОСТ 10515-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

Отобранные пробы воды, почвы и растительного материала хранят в стеклянной таре в холодильнике не более суток. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике; пробы капусты, огурцов и томатов замораживают и хранят до анализа в морозильной камере при минус 18°С. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 0,1 мм, а растительный материал измельчают.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками.

2.5.2. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% FFAP на Supelcoport) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 230°С в течение 8 - 10 ч.

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

При определении открываемости метода в модельные матрицы вносят аликвоты стандартных растворов пропамокарб гидрохлорида. Основной стандартный раствор пропамокарб гидрохлорида с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,013 г препарата, содержащего 76,6% д.в., в 1 н HCl в мерной колбе на 100 мл. Рабочие растворы с концентрациями 1, 5 и 10 мкг/мл получают разбавлением соответственно 1, 5 и 10 мл основного стандартного раствора 1 н HCl до объема 100 мл. Все растворы хранят в холодильнике не более трех месяцев.

Для построения калибровочного графика используют растворы пропамокарба (свободное основание). Основной стандартный раствор пропамокарба с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества в диизопропиловом эфире в мерной колбе на 100 мл. Рабочий раствор с концентрацией 10 мкг/мл получают разбавлением 10 мл основного стандартного раствора диизопропиловым эфиром до объема 100 мл. Все растворы хранят в холодильнике не более трех месяцев.

2.5.4. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика используют растворы с концентрациями 0,25; 0,5; 1,25 и 2,5 мкг/мл, получаемые соответствующим разведением рабочего раствора пропамокарба (свободное основание). Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика вещества в мм от содержания пропамокарба в пробе в мкг/мл.

2.6. Описание определения

2.6.1. Экстракция пропамокарб гидрохлорида

2.6.1.1. Вода. 100 мл предварительно отфильтрованной воды подкисляют 2 мл 1 н р-ра НСl, упаривают на роторном испарителе при температуре 50°С (разряжение не ниже 50 мм рт.ст.) до объема 5 - 10 мл, переносят в делительную воронку емкостью 50 мл, добавляют 0,4 г хлорида натрия, 5 мл 10 н р-ра гидроксида натрия и дважды экстрагируют диизопропиловым эфиром порциями по 2,5 мл при энергичном встряхивании в течение 1 мин. Объединенный эфирный экстракт упаривают в градуированной пробирке на роторном испарителе при температуре 30°С до объема около 0,5 мл, доводят конечный объем до 1 мл диизопропиловым эфиром и анализируют на содержание пропамокарба по п. 2.7.

2.6.1.2. Растительный материал (капуста, огурцы, томаты). Навеску (50 г) измельченного растительного материала помещают в аппарат Сокслета и экстрагируют 300 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра HCl, в течение 2,5 ч. Экстракт упаривают на роторном испарителе при температуре 40°С до объема около 2 мл. К воднму остатку добавляют 20 мл 0,1 н р-ра НСl и переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, приливают 4 мл 10 н р-ра гидроксида натрия (рН р-ра больше 10) и дважды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл при встряхивании в течение 1 минуты. Для четкого разделения фаз экстракт центрифугируют при 4 000 g 5 мин при температуре около 10°С (в случае почвенных образцов разделение фаз происходит без центрифугирования). Объединенный хлороформный экстракт переносят в делительную воронку и трижды экстрагируют 1 н р-ром HCL (2 х 30 и 1 х 40 мл) при встряхивании в течение 1 мин. Объединенную водную фазу упаривают на роторном испарителе при температуре 50°С до объема около 5 мл, переносят в 50 мл делительную воронку, добавляют 4 г хлорида натрия и 10 мл 10 н р-ра гидроксида натрия (рН раствора больше 10) и экстрагируют дважды по 4,5 мл диизопропилового эфира (почвенные образцы экстрагируют дважды по 2 мл диизопропилового эфира). Эфирную фазу переносят в градуированную пробирку с притертой пробкой, доводят объем до 10 мл диизопропиловым эфиром (в случае почвенных образцов конечный объем доводят до 5 мл диизопропиловым эфиром) и анализируют на содержание пропамокарба по п. 2.7.

2.6.1.3. Почва. Навеску (50 г) подготовленной почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра HCl, и перемешивают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Затем добавляют 2 г целита и экстракт фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 500 мл. Осадок на фильтре промывают 20 мл подкисленного метанола. Пропамокарб гидрохлорид из почвы повторно экстрагируют 100 мл метанола, подкисленного 2 мл 1 н р-ра HCl. Объединенный фильтрат упаривают на роторном испарителе при 40°С до объема около 2 мл. Водный остаток переносят 20 мл 0,1 н р-ра HCl в делительную воронку емкостью 250 мл и последовательно обрабатывают хлороформом (2 х 50 мл) и диизопропиловым эфиром (1 х 50 мл). Органические фазы отбрасывают. Дальнейшую очистку оставшейся водной фазы проводят так, как описано в п. 2.6.1.2. Анализ очищенного экстракта на содержание пропамокарба проводят по п. 2.7.

2.7. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф "Цвет-560" с термоионным детектором с пределом детектирования на азотсодержащие вещества, предел детектирования по азоту (в азобензоле) - 1,5 х 10(-9) мг/см3.

Показания электрометра	8 х 10(10)
Скорость движения ленты самописца	25,4 см/ч.
Колонка металлическая, спиральная (1 800 х 2 мм); неподвижная фаза - 5% FFAP на Supelcoport (0,15 - 0,18 мм).
Температура испарителя	240°С;
термостата колонки	180°С;
детектора	350°С.
Скорость потока газа-носителя (азота)	29 мл/мин.
Расход водорода	14,1 мл/мин.
Расход воздуха	180 мл/мин.
Объем вводимой пробы	2 мкл.
Время удерживания пропамокарба	1 мин 54 с.
Предел детектирования	0,4 нг.
Линейный диапазон детектирования	0,4 - 5,0 нг.

Альтернативная фаза: 2% карбовакса 20 М на Хроматоне N-AW-HMDS (0,20 - 0,25 мм); колонка стеклянная 2 000 х 2 мм; условия хроматографирования те же/

Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 3,0 мкг/мл, разбавляют диизопропиловым эфиром.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание пропамокарб гидрохлорида рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                              Н x А x V x М

                               1           1

                          X = --------------, где

                                Н x m x М

                                 0       0

    Х - содержание пропамокарб гидрохлорида в пробе, мг/кг; мг/дм3;

    H - высота пика образца, мм;

     1

    Н - высота пика стандарта, мм;

     0

    А - концентрация стандартного раствора пропамокарба, мкг/мл;

    V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

    m - масса (или объем) анализируемого образца, г (мл);

    М - молекулярная масса пропамокарб гидрохлорида, г;

     1

    М - молекулярная масса пропамокарба, г.

     0

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

ГАРАНТ:

Взамен МИ 2335-95 Госстандартом России введена в действие с 1 октября 2003 г. рекомендация МИ 2335-2003

5. Разработчики

Дубовая Л.В.; Талалакина Т.Н.; Макеев А.М., к. биол. н.; Чкаников Д.И., д. биол. н.

ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко