Методика бактериологического исследования кормов на энтерококки (утв. Главным управлением ветеринарии Государственного агропромышленного комитета СССР 21 марта 1986 г.)

1. Общие положения

1.1. Бактериологическое исследование кормов на обнаружение энтерококков проводят для уточнения этиологии желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных и птицы (молодняка).

1.2. Метод основан на двухэтапном посеве на ингибирующие среды, подавляющие рост грамотрицательных и частично грамположительных микробов.

1.3. Пробы корма отбираются согласно общепринятым методам.

2. Проведение исследований

2.1. В колбу с 450 мл стерильного физиологического раствора помещают 50 г корма (разведение 1:10), тщательно встряхивают на шуттель-аппарате 30 минут. Из полученной взвеси готовят последовательные разведения 1:100, 1:1000, 1:10000. Из каждого разведения вносят по 1 мл в пробирки с щелочно-полимиксиновой средой (приложение 1). Посевы инкубируют в термостате при 37° в течение 18-24 часов.

2.2. Из пробирок с измененным цветом среды в зеленый или желтый делают посев на плотную молочно-ингибиторную среду МИС (приложение 1) в бактериологических чашках. Посевы инкубируют в термостате при 37° в течение 24-48 часов.

2.3. Через 24-48 часов изучают рост колоний на среде МИС, идентифицируя разные виды и варианты энтерококков: и его варианты образуют на молочно-ингибиторной среде круглые, выпуклые, с ровными краями, черные, с металлическим блеском колонии. имеет способность кроме того образовывать вокруг колоний зону просветления с ободком помутнения по ее периферии. на среде МИС растет в виде мелких, сероватых, иногда почти бесцветных колоний.

2.4. У выделенных культур со среды МИС определяют морфологические и культурально-биохимические свойства согласно (таблица 1) основных дифференциальных признаков энтерококков и сходных с ними микроорганизмов.

2.5. Патогенные свойства энтерококков определяют биологической пробой на белых мышах. Для этого заражают внутрибрюшинно трех мышей массой 18-20 г в дозе 0,5 суспензией суточной культуры со скошенного МПА, с концентрацией бактерий, соответствующей 5 ЕД по оптическому стандарту мутности. Для смыва культур с МПА и получения суспензии необходимой концентрации используют физиологический раствор. Патогенные культуры обычно вызывают гибель одной или более мышей в первые 3-е суток после заражения. Наблюдение за подопытными животными ведут в течение 5 суток.

3. Ветеринарно-санитарная оценка кормов

3.1. Корма, в которых обнаружены патогенные энтерококки, запрещается использовать без термической обработки. Их подвергают проварке при температуре не ниже 100° в течение 1 часа в соответствии с действующими Правилами бактериологического исследования кормов.

______________________________

* Методика бактериологического исследования кормов на энтерококки разработана Всесоюзным научно-исследовательским институтом ветеринарной санитарии и Центральной ветеринарной лабораторией Главветупра Госагропрома СССР

Дифференциальные признаки энтерококков и сходных с ними микроорганизмов

Заместитель начальника Главного управления ветеринарии

Л.П. Маланин