Методические указания по измерению концентраций 1-хлор-2(4-оксифенил)-1,2-дифенилэтилен (смесь цис и транс-изомеров) (Кломифен фенола) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии МУК 4.1.1570-03 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания по измерению концентраций 1-хлор-2(4-оксифенил)-1,2-дифенилэтилен (смесь цис и транс-изомеров) (Кломифен фенола) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
МУК 4.1.1570-03
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

		М.м. 306,81

Кломифен фенол - белый или белый с кремовым оттенком кристаллический порошок с температурой плавления 117-120°C. Нерастворим в воде, растворим в этаноле, метаноле, хлороформе, бензоле, петролейном эфире.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает раздражающим действием на кожу и слизистые, легко проникает через неповрежденные кожные покровы, оказывая специфическое действие на организм. 1 класс опасности.

Концентрация кломифен фенола в воздухе рабочей зоны не должна превышать 0,001 .

Характеристика метода

Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр АФА-ХА-20.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (50 мкл) - 0,25 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,001 (при отборе 1000 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,001 до 0,02 .

Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания, хранения и фасовки вещества.

Определению не мешают бензол, пиридин, хлорангидрид фенилпропионовой кислоты.

Суммарная погрешность измерения не превышает .

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 4 часа.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка размером 250*8,2 мм, заполненная твердым сорбентом силикагель "для хроматографии" фирмы "Zorbak" с размером частиц 4,0-5,0 мкм, диаметром пор 6-60 нм, устойчивым в водных растворах в интервале pH I-II.

Весы аналитические ВЛА-200, 2-го кл., ГОСТ 24104-88 Е.

Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86.

Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.

Пробирки колориметрические с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82.

Воронки химические диаметром 30 мм, ГОСТ 25336-82Е.

Грушевидные колбы вместимостью 50 мл, ГОСТ 10394-72

Роторный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-91776.

Секундомер, ГОСТ 5072-97.

Линейка измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.

Лупа измерительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.

pH-метр ЭВ-74.

Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.

Дистиллятор, ТУ 61-1-721-79.

Реактивы, растворы, материалы

Кломифен фенол (полупродукт в синтезе кломифен цитрата. Временный технологический регламент на производство кломифен цитрата. ПЭЗ ВНИХФИ (М., 1992 г.)

Метиловый спирт, х.ч., ГОСТ 6995-77.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 200 мкг/мл кломифен фенола готовят растворением 0,0200 г вещества в метаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

АФА-ХА-20, ТУ 85-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 100 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХА-20. В патрон за фильтром следует установить металлическую сетку. Для определения 0,001 следует отобрать 1000 л воздуха. Пробы хранят в течение суток в холодильнике.

Подготовка к измерению

Хроматографическую колонку промышленного изготовления, заполненную силикагелем "для хроматографии", промывают в течение 10-15 мин метиловым спиртом до получения стабильной нулевой линии.

Градуировочные растворы с концентрацией от 5 до 100 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением основного стандартного раствора метанолом.

50 мкл каждого раствора вводят в инжектор хроматографа.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки	50°C
Скорость подачи элюента	0,7 мл/мин
Чувствительность измерения детектора	0,4
Длина волны УФ-детектора	280 нм
Скорость движения диаграммной ленты	1 мм/мин
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания кломифен фенола	15 мин 48 сек.

На основании полученных хроматограмм строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пиков от количества вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, заливают 10 мл метанола и оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра - 98,4%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха в роторном испарителе при 70°C. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл метанола.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное содержание кломифен фенола в хроматографируемом объеме (мкг) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию кломифен фенола (C, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

a - количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

- хроматографируемый объем пробы, взятый для анализа, мл;

в - общий объем раствора пробы, мл;

v - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (Приложение 1)

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко