Методические указания по измерению концентраций 4-[(2-гидрокси-3-изопропиламино)пропокси]фенилацетамида бензоата (бензоата атенолола) в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии МУК 4.1.892-99 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 30 декабря 1999 г.)

Методические указания по измерению концентраций 4-[(2-гидрокси-3-изопропиламино)пропокси]фенилацетамида бензоата (бензоата атенолола) в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
МУК 4.1.892-99
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 30 декабря 1999 г.)

Дата введения: с момента утверждения

М. м. 388,48

Бензоат атенолола. Кристаллический порошок белого цвета с температурой плавления 156-158 °С. Растворим в воде и этаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ПДК в воздухе - 1,0 .

Характеристика метода

Определение основано на хроматографировании вещества в тонком слое на пластинках Сорбфил с последующим обнаружением хроматограмм раствором нингидрина и денситометрировании окрашенных зон при длине волны 513 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме - 4 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе - 0,5 (при отборе 40,0 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,5 до 5,0 .

Определению не мешают 4-[(2,3-эпокси)пропокси]фенилацетамид, этиловый и изопропиловый спирт.

Суммарная погрешность измерения не превышает .

Время выполнения измерения 2 часа 30 мин, включая отбор проб.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели.

Хроматографическая камера для ТСХ размером 10х20 см, ГОСТ 23932-79.

Пластинки для тонкослойной хроматографии Сорбфил ПТСХ-П-А, ТУ 26-11-17-89.

Хроматографическая камера для ТСХ, ГОСТ 23932-79.

Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 19908-80.

Вакуумная установка.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79.

Посуда стеклянная лабораторная, ГОСТ 1770-74Е, 20292-74.

Сушильный шкаф.

Реактивы, растворы, материалы

Бензоат атенолола фармакопейный с содержанием не менее 99,0%.

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.

Метиловый спирт, ГОСТ 6965-77.

Хлороформ, ТУ 6-09-4263-76.

Аммиак водный, 25% раствор, ГОСТ 3760-79.

Нингидрин, х.ч. (ЧСФР).

Подвижный растворитель: хлороформ-метанол (50:10) мл. В камеру дополнительно помещают бюкс с 25 мл 25% раствора аммиака.

Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в этаноле при нагревании, охлаждают, доводят объем раствора до метки и перемешивают.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 40-60-100-200-300-400 мкг/мл вещества готовят соответствующим разбавлением этанолом стандартного раствора N 1. Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 40,0 л воздуха. Хранение проб допускается в течение 3 суток в холодильнике.

Подготовка к измерению

На линию старта (от края 1,5 см) наносят с помощью микропипетки по 0,1 мл растворов с концентрацией вещества от 40 до 400 мкг/мл, которые готовят аналогично пробам (но растворяют в 1 мл этанола). Диаметр пятна не должен превышать 0,5 см. Пластинку высушивают на воздухе в течение 3 мин и помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей хлороформ-метанол (50:10) мл и бюксом вместимостью 25 мл с 25% раствором аммиака.

После того как фронт растворителя пройдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф при температуре 120°С на 5 мин. Затем пластинку опрыскивают проявляющим реактивом и помещают в сушильный шкаф при температуре 120°С на 3 мин. Бензоат атенолола проявляется в виде оранжево-коричневых пятен на светлом фоне с .

Интенсивность окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют отражение (Т) в %. Оптическая плотность (Д) и отражение (Т) связаны между собой соотношением:

Д = -lg T,

где Т - выражено в %, тогда:

или Д = 2 - lgТ

По средним результатам из пяти определений строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс - соответствующее им количество вещества в мкг в градуировочном растворе.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, доливают 6 мл этанола и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра - 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60-65°С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этанола и используют полученный раствор для анализа.

Далее поступают аналогично градуировочным растворам.

При использовании планиметра количество вещества "М" (в мкг) в анализируемом объеме пробы находят по формуле:

где:

m - содержание вещества на пятне стандарта, мкг;

- площадь пятна пробы, ;

- площадь пятна стандарта, .

При использовании денситометра содержание вещества в анализируемом объеме находят по градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию бензоата атенолола в воздухе "С" вычисляют по формуле:

где:

а - содержание вещества, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко