Приложение 3. Приготовление рабочих растворов для проведения исследований методом MALDI-TOF масс-спектрометрии

Приложение 3
к МУК 4.2.3733-21

Приготовление рабочих растворов для проведения исследований методом MALDI-TOF масс-спектрометрии

1. Приготовление раствора матрицы ( кислоты; 2,5-дигидроксибензойной кислоты).

1.1. Для приготовления "стандартного растворителя" в микропробирку объемом 1 мл вносят 475 мкл деионизованной воды, 25 мкл 100% трифторуксусной кислоты и 500 мкл ацетонитрила.

1.2. Смесь тщательно перемешивают на вортексе. Переносят 250 мкл стандартного растворителя в пробирку с сухой порционной матрицей массой 2,5 мг.

1.3. Растворяют матрицу перемешиванием при комнатной температуре до просветления раствора на вортексе (все кристаллы должны раствориться). Конечная концентрация матричного раствора составляет 10 мг/мл.

1.4. Для приготовления не порционной матрицы взвешивают навеску сухой матрицы массой 5 мг, переносят в микропробирку объемом 1 мл. В микропробирку вносят 500 мкл стандартного растворителя. Растворяют матрицу перемешиванием при комнатной температуре до просветления раствора на вортексе.

Примечание. Приготовленный раствор матрицы хранят в темном месте (во избежание ультрафиолетового воздействия) при комнатной температуре в течение 7 дней.

2. Приготовление 100 мл 70% этанола.

2.1. В мерный стакан с помощью градуированного цилиндра объемом 100 мл вносят 27 мл деионизованной воды.

2.2. Добавляют 73 мл 96% этанола и тщательно перемешивают.

3. Приготовление 100 мкл 80% раствора трифторуксусной кислоты:

3.1. В микропробирку объемом 1,5 мл вносят 20 мкл деионизованной воды.

3.2. Добавляют 80 мкл 100% трифторуксусной кислоты.

3.3. Перемешивают на вортексе.

4. Приготовление 100 мкл 70% раствора муравьиной кислоты.

4.1. В микропробирку объемом 1,5 мл вносят 30 мкл деионизованной воды.

4.2. Осторожно добавляют 70 мкл 100% муравьиной кислоты.

4.3. Тщательно перемешивают на вортексе.