Приложение Г (обязательное). Методика определения полноты протравливания посевного материала препаратами, содержащими в качестве действующего вещества тетраметилтиурамдисульфид (ТМТД)

Приложение Г
(обязательное)

Методика
определения полноты протравливания посевного материала препаратами, содержащими в качестве действующего вещества тетраметилтиурамдисульфид (ТМТД)

Принцип метода определения полноты протравливания основан на превращении ТМТД в медную соль диметилцитиокарбаминовой кислоты и колориметрическом измерении оптической плотности полученного окрашенного раствора.

Г.1 Избираемость метода

Присутствие микроэлементов (медь, бор, цинк, марганец, магний) в концентрациях, применяемых в современных технологиях протравливания, колориметрическому анализу ТМТД не мешает.

Г.2 Подготовка к определению

Приготовление реактива на ТМТД 0,1 г сульфаминовой кислоты, 0,3 г гидрохинона и 0,06 г сернокислой меди растворяют в 100 см ³ дистиллированной воды. Хранят в холодильнике не более 20 дней.

Г.3 Приготовление стандартного раствора ТМТД

0,1 г чистого ТМТД (Д.В) растворяют в ацетоне в 100 см ³ мерной колбе; 10 см ³ этого раствора переносят в другую мерную колбу на 100 см ³ и доводят ацетоном до метки. Получают раствор с концентрацией 0,1 мг/см ³. Очистку ТМТД проводят переосаждением этанолом из раствора хлороформа. С этой целью 15 г ТМТД растворяют в 70 см ³ хлороформа и добавляют 150 см ³ этилового спирта. Выпавшие белые кристаллы отфильтровывают и сушат на воздухе при комнатной температуре. Стандартный раствор хранят в холодильнике. Раствор устойчив в течение двух месяцев. Для приготовления шкалы растворов в пробирки наливают от 0,2 до 2,0 см ³ стандартного раствора ТМТД. Состав растворов для построения градуировочной кривой приведен в таблице Г.1.

Таблица Г.1 - Состав растворов для построения градуировочной кривой

Компоненты градуировочных растворов	Номер градуировочных растворов и их объем, см 3
	1 *	2	3	4	5	6	7	8	9
Стандартный раствор ТМТД 0,1 мг/см 3	-	0,2	0,5	0,7	1,0	1,2	1,5	1,7	2,0
Ацетон	5,0	4,8	4,5	4,3	4,0	3,8	3,5	3,3	3,0
Реактив на ТМТД	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9
Содержание ТМТД, мкг	-	20	50	70	100	120	150	170	200
* Контроль.

Фактическая плотность приготовленных растворов измеряется на фотоэлектроколориметре при  нм в кюветах толщиной 1 см. Колориметрирование растворов может проводиться на фотоэлектроколориметре любого типа. Размер кюветы и светофильтр подбирают в соответствии с руководством по фотоэлектроколориметру. Количественную оценку результатов дают по калибровочному графику, построенному в координатах: оптическая плотность окрашенного раствора и концентрация ТМТД, мг.

Г.4 Определение полноты протравливания семян

Из средней пробы массой 400 г отбирают навеску обработанных семян массой 25 г (в трех повторностях), помещают в коническую колбу вместимостью 250 см ³, добавляют 25 см ³ воды, встряхивают в течение 1 мин. Часть экстракта фильтруют. В пробирки отбирают 0,1-0,5 см ³ (в зависимости от полноты протравливания данного образца) отфильтрованного экстракта, добавляют 4,5-4,9 см ³ ацетона и 0,9 см ³ реактива, закрывают их пробкой, встряхивают и через 10-15 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на фотоэлектроколориметре при  нм в кюветах толщиной 1 см. Контролем является раствор тех же компонентов, но с использованием необработанных протравителем семян.