Межгосударственный стандарт ГОСТ EN 16343-2016 "Продукция косметическая. Определение содержания 3-йодо-2-пропинилбутилкарбамата (IPBC) методами жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии" (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 4 апреля 2024 г. N 423-ст)

Products cosmetic. Determination of 3-iodo-2-propynyl butylcarbamate (IPBC) content by LC-MS methods

УДК 665.57/.58:543.544.5(083.74)
МКС 71.100.70

Дата введения - 1 января 2025 г.
с правом досрочного применения
Введен впервые

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 Подготовлен Научно-производственным республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации" (БелГИСС)

2 Внесен Госстандартом Республики Беларусь

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по результатам голосования (протокол от 27 июля 2016 г. N 89-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения	AM	ЗАО "Национальный орган по стандартизации и метрологии" Республики Армения
Беларусь	BY	Госстандарт Республики Беларусь
Грузия	GE	Грузстандарт
Казахстан	KZ	Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия	KG	Кыргызстандарт
Молдова	MD	Молдова-Стандарт
Россия	RU	Росстандарт
Таджикистан	TJ	Таджикстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 4 апреля 2024 г. N 423-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 16343-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2025 г. с правом досрочного применения

5 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту EN 16343:2013 "Косметика. Анализ косметической продукции. Определение 3-йод-2-пропинилбутилкарбамата (IPBC) в косметических средствах, методы жидкостной хроматографии с массовой спектрометрией" ("Cosmetics - Analysis of cosmetic products - Determination of 3-iodo-2-propynyl butylcarbamate (IPBC) in cosmetic preparations, LC-MS methods", IDT).

Европейский стандарт разработан техническим комитетом по стандартизации CEN/TC 392 "Косметика" Европейского комитета по стандартизации (CEN).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5-2001 (подраздел 3.6)

6 Введен впервые

1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод количественного определения 3-йодо-2-пропинилбутилкарбамата (IPBC), используемого в косметической продукции в качестве консерванта, при его содержании в диапазоне от 0,005 до 0,1 г/100 г.

2 Сущность метода

IPBC экстрагируют из косметической продукции, используя метанол. IPBC, присутствующий в экстракте пробы, отделяют методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с масс-селективным детектированием (LC-MS) или жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS). Количественное определение IPBC осуществляют методом калибровки с использованием внешнего стандарта или методом стандартных добавок.

3 Реактивы

3.1 Общие требования

Если не указано иное, используют только реактивы аналитической или более высокой степени чистоты; используемая вода должна быть дистиллированной или соответствующей ей по чистоте. "Раствором" следует считать водный раствор, если не указано иное.

3.2 Йодопропинилбутилкарбамат, номер CAS: 55406-53-6 (поставщик: Sigma-Aldrich ¹⁾ (521949), Dr. Ehrenstorfer GmbH ¹⁾ (С 14335000)).

-----------------------------

¹⁾ Пример пригодной продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой данной продукции со стороны CEN. Аналогичная продукция может использоваться, если подтверждено, что она обеспечивает получение таких же результатов.

-----------------------------

3.3 Метанол для ВЭЖХ, номер СAS: 67-56-1.

3.4 Муравьиная кислота, номер CAS: 64-18-6.

3.5 Тетрагидрофуран (THF), номер CAS: 109-99-9.

3.6 Пропан-2-ол, номер CAS: 67-63-0.

3.7 Подвижные фазы (элюенты)

3.7.1 Элюент А: 1 см ³ муравьиной кислоты (3.4) смешивают с 1000 см ³ воды.

3.7.2 Элюент В: метанол (3.3).

3.8 Основной раствор IPBC концентрацией с = 1 мг/см ³.

Взвешивают приблизительно 0,05 г IPBC (3.2) в мерную колбу вместимостью 50 см ³. Вначале разбавляют небольшим количеством метанола (3.3), затем добавляют метанол до метки. Срок хранения раствора в холодильной камере 8 нед.

3.9 Калибровочные растворы (стандартные растворы)

Аликвотную часть основного раствора объемом 5,0 см ³ (3.8) переносят в мерную колбу вместимостью 50 см ³ и добавляют метанол (3.3) до метки (с = 0,1 или 100 мкг/см ³). Из полученного раствора путем разбавления приготавливают 5 или более растворов с концентрацией IPBC от с = 0,05 мкг/см ³ до с = 1,0 мкг/см ³. Срок хранения растворов в холодильной камере 8 нед. Примеры разбавлений приведены в таблице 1.

Таблица 1 - Калибровочные растворы

Номер	Калибровочный раствор	Разбавление	Концентрация, мкг/см 3
3.9	Аликвотная часть основного раствора объемом 5,0 см 3 по 3.8 разбавляют до 50 см 3	1:10	100
3.10	10 см 3 раствора по 3.9 разбавляют до 100 см 3	1:100	10
3.11	10 см 3 раствора по 3.10 разбавляют до 100 см 3	1:1000	1
3.12	4 см 3 раствора по 3.10 разбавляют до 50 см 3	1:1250	0,8
3.13	5 см 3 раствора по 3.10 разбавляют до 100 см 3	1:1200	0,5
3.14	10 см 3 раствора по 3.11 разбавляют до 50 см 3	1:5000	0,2
3.15	5 см 3 раствора по 3.11 разбавляют до 50 см 3	1:10 000	0,1

4 Оборудование

4.1 Стандартное лабораторное оборудование

4.2 Мембранный фильтр в виде одноразового шприцевого фильтра с размером отверстий 0,2 мкм ¹⁾.

-----------------------------

¹⁾ Круговые испытания были проведены с использованием фильтра с размером отверстий 0,2 мкм.

-----------------------------

4.3 Высокоэффективный жидкостный хроматограф, пригодный для градиентного элюирования, с масс-детектором.

4.4 Аналитическая разделительная колонка, имеющая следующие параметры: фаза RP 18, 5 мкм, 150 мм х 2 мм, Zorbax, Spherisorb, Phenomenex-Luna или аналогичные. Если используется предколонка, она должна иметь такие же аналитические характеристики, как и разделительная колонка.

5 Проведение испытаний

5.1 Подготовка пробы

Взвешивают 200 мг пробы с точностью до 0,1 мг в мерную колбу вместимостью 20 см ³ (или вместимостью 50 см ³). Добавляют 1,5 см ³ тетрагидрофурана (3.5) и встряхивают. Добавляют 10 см ³ метанола (3.3) и помещают колбу на 5 мин в ультразвуковую баню при комнатной температуре с целью растворения или суспендирования. Затем охлаждают до комнатной температуры и добавляют до метки метанол (3.3). Раствор пробы разбавляют метанолом (3.3) в соотношении 1:10, фильтруют через мембранный фильтр (4.2), а затем анализируют посредством LC-MS или LC-MS/MS.

Для плохо растворимых или суспендируемых матриц рекомендуется частично растворять пробу путем добавления 2 см ³ пропан-2-ола (3.6) взамен тетрагидрофурана (3.5) или перемешиванием ее с помощью магнитной мешалки в течение 30 мин перед обработкой в ультразвуковой бане.

Круговые испытания были проведены с использованием фильтра с размером отверстий 0,2 мкм.

5.2 Условия жидкостной хроматографии

При использовании хроматографа (4.3) и колонки (4.4) следующие условия являются наиболее подходящими (см. таблицу 2):

Таблица 2 - Градиентная программа

Время, мин	Доля элюента А, %	Доля элюента В, %
0	85	15
8	10	90
12	10	90
13	85	15
25	85	15

Колонка: фаза RP 18,5 мкм, 150 х 2 мм.

Объем впрыскиваемой пробы: 1-10 мкл.

Скорость потока: 0,2 см ³/мин.

Температура колоночного термостата: 25 °С.

5.3 Обнаружение

5.3.1 Общие требования

Качественное и количественное определение может быть выполнено путем оценки следовых количеств IPBC или фрагментарных ионов. Чтобы избежать заниженных результатов из-за образования аддукта в режиме мониторинга множественных реакций (MRM) метода ионизации электрораспылением (ESI), ионизацию следует проводить химическим методом при атмосферном давлении (APCI).

5.3.2 MS-детектирование в режиме мониторинга селективных ионов (SIM)

Следовые количества: m/z 282 [М + Н] ⁺ и m/z 304 [М + Na] ⁺.

Оценка основывается на полном ионном потоке (из суммы двух масс).

5.3.3 MS-детектирование в режиме мониторинга множественных реакций (MRM)

Положительно заряженный молекулярный ион: 282 [М + Н] ⁺.

Фрагментарный ион 1: 57.

Фрагментарный ион 2: 165.

Оценка основывается на наиболее чувствительном фрагментарном ионе.

Поскольку анализируемое вещество может образовывать аддукты с ионами натрия, заниженные результаты можно получить, если большое количество ионов натрия присутствует в пробе. Поэтому при использовании метода ионизации электрораспылением (ESI) для получения достоверных результатов количественного определения необходимо введение стандартной добавки в режиме мониторинга множественных реакций (MRM). При введении стандартной добавки содержание добавленного IPBC не должно превышать предполагаемое содержание его в пробе.

6 Обработка результатов

6.1 Качественное и количественное определение

IPBC определяют путем сравнения времени удерживания пробы с временем удерживания калибровочных растворов.

Количественное определение анализируемого вещества осуществляют на основании калибровочной кривой или с помощью метода стандартной добавки. Калибровочные растворы хроматографируют в условиях, указанных в 5.2. Концентрацию IPBC рассчитывают посредством линейной регрессии на основании полученных площадей пиков.

6.2 Вычисления

Содержание консерванта (IPBC) w, г/100 г, в пробе вычисляют по формуле

,

(1)

где w - содержание IPBC, г/100 г;

с - концентрация IPBC в растворе пробы, определенная по калибровочной кривой, мкг/см ³;

m - исходная масса пробы, г;

V - объем испытуемого раствора пробы, см ³;

F - коэффициент разбавления (в случае разбавления).

Результат выражается в граммах на 100 г с округлением до третьего десятичного знака.

7 Протокол испытания

Протокол испытания должен содержать:

a) сведения, необходимые для идентификации пробы (вид, состав и наименование пробы);

b) ссылку на настоящий стандарт;

c) наименование лаборатории, проводившей испытание;

d) дату и метод отбора пробы (если это известно);

e) дату поступления пробы и выдачи результатов испытания;

f) дату проведения испытания;

g) результаты испытания и единицы измерений, в которых они выражены;

h) обоснование отклонений от метода данного стандарта;

i) операции, не указанные в методе или рассматриваемые как дополнительные, которые могли бы повлиять на результаты.

Библиография

[1]

Frauen М., Steinhart Н., Rapp С., Hintze U. (2001): Rapid quantification of iodopropynyl butylcarbamate as the preservative in cosmetic formulations using high-performance liquid chromatography-electrospray mass spectrometry. J Pharm Biomed Anal. 25 (5-6): 965-70 (Экспресс-метод количественного определения йодопропинилбутилкарбамата в качестве консерванта в косметических препаратах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией)

Ключевые слова: продукция косметическая, определение содержания 3-йодо-2-пропинилбутилкарбамата (IPBC) методами жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии.