Приложение. Приготовление среды Ридера

Приложение

Приготовление среды Ридера. Среду Ридера можно применять вместо суслового агара. Для ее приготовления готовят основной и два дополнительных раствора.

Приготовление основного раствора N 1. Берут 800 мл кипяченой и профильтрованной водопроводной воды и растворяют в ней компоненты в следующей последовательности: сульфат аммония (NH ₄) ₂SО ₄, ч.д.а., ГОСТ 3769-60 - 5 г; сульфат магния, MgSO ₄ ^.H ₂О, ч.д.а., ГОСТ 4523-67 - 0,7 г; хлорид натрия, NaCl, ч.д.а., ГОСТ 4233-66 - 0,5 г; сахароза ч.д.а., ГОСТ 5733-54 - 8 г; дрожжевой автолизат, ТУ 10П-308-69 - 10 г; агар-агар - 20 г.

Основной раствор N 1 стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.

Приготовление раствора N 2. В 200 мл дистиллированной воды растворяют 1 г дигидрофосфата калия (КH ₂РО ₄, ч.д.а., ГОСТ 4198-65) и 0,2 г гидрофосфата калия (К ₂НРО ₄, ч.д.а., ГОСТ 2413-65). Раствор стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.

Раствор N 2 добавляют стерильно к основному раствору N 1.

Приготовление раствора N 3. Смесь микроэлементов. Раствор готовят по следующей прописи: борная кислота, Н ₃ВО ₃, ч.д.а., ГОСТ 9656-61 - 50 мг; сульфат меди, CuSО ₄ ^.5H ₂О, ч.д.а., ГОСТ 4165-68 - 4; йодит калия, KI. ч.д.а., ГОСТ 4232-65 - 10; сульфат марганца, MnSО ₄·7H ₂О, ч.д.а., ГОСТ 435-67 - 40; натрий молибденовокислый, Na ₂MoО ₄, ч.д.а., ГОСТ 10931-64 - 20; сульфат цинка, ZnSО ₄ ^.7H ₂О, ч.д.а., ГОСТ 4174-69 - 40 мг; вода дистиллированная - до 100 мл.

Смесь микроэлементов перед употреблением кипятят на слабом огне в течение 15-20 мин, взбалтывают и 1 мл раствора стерильно вносят в стерильный основной раствор N 1.

Используемые дрожжевые тест-культуры на среде Ридера проявляют ростовые характеристики, аналогичные росту на сусло-агаре.