Приложение 8. Методика приготовления питательных сред

Приложение 8

Методика приготовления питательных сред

1. Картофельный агар
Пептон	- 5,0 г
Мел	- 1,0 г
Агар	- 25,0 г
Картофельная вода	- 1000 мл
рН 7,1 +- 0,1

Сырой картофель (из расчета 200 г очищенного картофеля на 1 л водопроводной воды) тщательно моют, очищают от кожуры и глазков, нарезают мелкими ломтиками, заливают водопроводной водой и кипятят 30 минут после закипания (молодой картофель употреблять нельзя). Отвар отстаивают и фильтруют в холодном состоянии через ватно-марлевый фильтр. Доводят объем фильтрата до первоначального. Устанавливают рН 7,1+-0,1. Добавляют пептон и агар. Нагревают, помешивая, до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, после чего добавляют мел. Разливают по флаконам, стерилизуют при 120°С в течение 30 минут. После стерилизации среду во флаконах скашивают.

2. Пшеничный агар

Пшеничная крупа "Артек" (или "Полтавская")	- 500 г
Агар	- 25,0 г
Дистиллированная вода	- 1000 мл
рН 7,3+-0,1

Пшеничную крупу "Артек" (или "Полтавская") заливают дистиллированной водой. Через 12 часов настой аккуратно сливают, не выжимая, доводят до первоначального объема, добавляют агар и растапливают на водяной бане или автоклаве (текучим паром 1 час). Остывший агар выкладывают на противень и срезают осадок. Агар растапливают на водяной бане, постоянно помешивая. Устанавливают рН 7,3+-0,1. Разливают в нужную посуду. Стерилизуют текучим паром по 1 часу в течение 3 суток. После стерилизации среду скашивают.

3. Бульон Хоттингера

Мясной перевар по Хоттингеру до разведения аминного азота от 140 до 160 мг%

Натрий хлористый	- 5,0 г
Глюкоза	- 5,0 г
Вода дистиллированная	- до 1000 мл
рН 7,3+-0,1

Смешивают мясной перевар по Хоттингеру с водой в таком соотношении, чтобы в среде содержалось от 140 до 160 мг% аминного азота, добавляют хлористый натрий. Кипятят на слабом огне с закрытой крышкой 10 минут до полного растворения соли. Если есть выкипание, доводят объем до первоначального дистиллированной водой. Устанавливают рН 7,3+-0,1, кипятят повторно. Фильтруют, прибавляют глюкозу. Разливают в стерильную посуду. Стерилизуют при 110°С в течение 30 минут.

4. Агар Хоттингера

Мясной перевар по Хоттингеру (аминный азот 140-160 мг%)

Натрий хлористый	- 5,0 г
Агар	- 20,0 г
Вода дистиллированная	- до 1000 мл
рН 7,3+-0,1

К готовому бульону Хоттингера (содержание аминного азота от 140 до 160 мг%) без глюкозы добавляют агар и кипятят на слабом огне при постоянном помешивании до полного расплавления. Фильтруют и стерилизуют при температуре 120°С в течение 30 минут.

5. Полусинтетическая среда с индикатором феноловым красным

Аммоний фосфорнокислый однозамещенный (NH4H2PО4)	- 1,0 г
Магнии сернокислый (MgSО4)	- 0,2 г
Калий хлористый (KCl)	- 0,2 г
Глюкоза	- 5,0 г
Феноловый красный	- 0,02 г
Бульон Хоттингера (содержание аминного азота от 140 до 160 мг%)	- 200
Дистиллированная вода	- 800 мл
рН 6,7+-0,1

Компоненты смешивают и растворяют при нагревании на водяной бане. Доводят ph до 7,7+=0,1, разливают во флаконы и стерилизуют при 110°С в течение 30 минут.

6. Питательный бульон сухой (Дагестанский НИИ питательных сред, г. Махачкала, ул. Леваневского, 24)

Триптический гидролизат кильки	- 10,05 г
Натрия хлорид	- 4,95 г
рН 7,1+=0,1

Готовят согласно прописи на этикетке. Для приготовления бульона с глюкозой добавить 0,5% глюкозы.

7. Питательный агар сухой (Дагестанский НИИ питательных сред, г. Махачкала, ул. Леваневского, 24)

Гидролизат кильки	- 17,9 г
Агар	- 11,2 г
Натрия хлорид	- 5,9 г
рН 7,3+=0,1

Готовят согласно прописи на этикетке.

8. Среда питательная для контроля стерильности сухая. (Предприятие Центрального НИИВС им. И.М. Мечникова, 143422, Моск. обл., Красногорский р-н, с. Петрово-Дальнее)

Ферментативный гидролизат казеина неглубокой степени расщепления	- 15,0 г
Витаминный препарат ЭКД	- 5,0 г
Натрий хлористый	- 6,4 г
Глюкоза медицинская	- 5,0 г
Тиогликолят натрия	- 0,5 г
Цестеин дигидрохлорид	- 0,75 г
Агар порошкообразный	- 0,6 г
Натрий углекислый	- 0,5-0,95 г
рН 7,0+-0,1

Готовят согласно прописи на этикетке.

9. Бульон из перевара кровяных сгустков

Методика приготовления изложена в "Справочнике по микробиологическим и вирусологическим методам исследований" (Под ред. М.О. Биргера. М., Медицина, 1982). Для приготовления бульона с глюкозой добавить 0,5% глюкозы.