Методические указания МУК 4.1.1496-03 "Определение массовой доли октаацетата сахарозы в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех видов сырья методом газожидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1496-03
"Определение массовой доли октаацетата сахарозы в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех видов сырья методом газожидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: 30 июня 2003 г.

Введены впервые

ГАРАНТ:

Об определении содержания денатурированных добавок (ингредиентов) в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех видов сырья см. справку

1. Введение

Настоящий документ устанавливает газохроматографический метод определения массовой концентрации октаацетата сахарозы в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех видов сырья в диапазоне 0,01 - 0,2% масс.

Сахароза октаацетат - октаацетат альфа-D-глюкопиранозил-бета-D-фруктофуранозида.

C28H38O19

М. м. 678,6

Твердое вещество белого или желтоватого цвета.

2. Характеристика погрешности измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью (дельта), не превышающей +- 13%, при доверительной вероятности 0,95.

3. Метод измерений

Метод основан на измерении концентрации вещества с помощью газовой хроматографии с использованием детектора ионизации в пламени.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме пробы (0,5 мм3) - 0,4 мкг.

Измерению не мешают диэтиловый эфир, уксусный и кротоновый альдегиды, диэтилфталат, метиловый, н-пропиловый, изопропиловый и трет-бутиловый спирты, ацетон.

4. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

4.1. Средства измерений

Газовый хроматограф "Цвет-570", снабженный пламенно-ионизационным детектором с пределом детектирования по нонану 0,8 х 10(-11) г/см3
Весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности, например, (ВЛР-200)	ГОСТ 24104
Пипетки градуированные 2-го класса точности, вместимостью 0,1; 2,0; 5,0 и 10,0 см3	ГОСТ 29227
Микрошприц МШ-1	ГОСТ 8043
Колбы мерные 2-50-2 и 2-100-2	ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.

4.2. Реактивы

Октаацетат сахарозы	Фармакопейная статья
Спирт этиловый ректификованный	ГОСТ Р 51652
или	ГОСТ 18300

4.3. Вспомогательные устройства и материалы

Азот газообразный из баллона, осч	ГОСТ 9293
Вата стеклянная или стеклоткань
Водород газообразный из баллона	ГОСТ 3022
Воздух газообразный из баллона	ГОСТ 9-010
Воронки химические конусные N 2 и 3	ГОСТ 8613
Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм
Колбы круглодонные или плоскодонные на шлифе, вместимостью 100 см3	ГОСТ 10394
Насос водоструйный стеклянный	ГОСТ 25336
Газхром Q (0,16 - 0,20 мм) с 5% OV-210, Хемапол, Чехия

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 8613-75 и ГОСТ 10394-72 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

Допускается применение другого оборудования и хроматографических колонок с аналогичными техническими характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение.

5. Требования безопасности

При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на прибор.

Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда осуществляется по ГОСТ 12.0.004.

6. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают специалиста, имеющего высшее или среднее специальное химическое образование или опыт работы в химической лаборатории, прошедшего обучение, освоившего метод в процессе тренировки и уложившегося в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.

7. Условия выполнения измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

-	температура воздуха	(20 +- 5)°С;
-	атмосферное давление	84,0 - 106,7 кПа (630 - 800 мм рт. ст.);
-	влажность воздуха	не более 80% при температуре 25°С;
-	напряжение в сети	от 187 до 242 В;
-	частота переменного тока	(50 +- 1) Гц.

8. Подготовка к выполнению измерений

8.1. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% OV-210 на Газхроме Q) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270°С в течение 10 - 12 ч.

8.2. Приготовление рабочих растворов для градуировки прибора

Для приготовления основного стандартного раствора октаацетата сахарозы с концентрацией 1,0% масс. во взвешенную на аналитических весах мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1,0 г октаацетата сахарозы, добавляют спирт этиловый ректификованный до общей массы содержимого колбы 80,0 г.

Для приготовления рабочего стандартного раствора октаацетата сахарозы с массовой долей 0,2% масс. в мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 10 см3 основного стандартного раствора, добавляют спирт этиловый ректификованный до метки.

Для приготовления рабочих стандартных растворов октаацетата сахарозы с массовой долей 0,01; 0,02; 0,05; 0,1% масс. в пять мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 10, 5, 2 и 1 см3 основного стандартного раствора, добавляют спирт этиловый ректификованный до метки.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 3 месяцев.

8.3. Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с ГОСТ 5964-93.

ГАРАНТ:

Приказом Ростехрегулирования от 23 апреля 2007 г. N 72-ст применение ГОСТ 5964-93 прекращено на территории РФ с 1 января 2010 г.

8.4. Установление и контроль градуировочной характеристики

Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 0,5 м3 рабочих стандартных растворов с содержанием 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 и 0,2% масс.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации.

Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика от содержания октаацетата сахарозы в растворе, % масс.

Градуировочный график проверяют ежедневно по одному-двум стандартным растворам различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на 10% от данных, заложенных на графике, градуировочную характеристику строят заново, используя свежеприготовленые рабочие стандартные растворы.

8.5. Условия хроматографирования градуированных и анализируемых растворов

Хроматограф газовый "Цвет-570" с пламенно-ионизационным детектором.

Неподвижная фаза - Газхром Q (0,16 - 0,20 мм) с 5% OV-210.

Колонка стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

Рабочая шкала электрометра	32 х 10(9) Ом.
Скорость движения ленты самописца	240 мм/ч.
Температура термостата колонки	270°С;
детектора	320°С;
испарителя	280°С.
Скорость газа-носителя (азота)	(60 +- 2) см3/мин;
водорода	(30 +- 1) см3/мин;
воздуха	200 см3/мин.
Объем вводимой пробы	0,5 мкл.
Абсолютное время удерживания	(185 +- 1) с.
Линейный диапазон детектирования	0,01 - 0,20% масс.

9. Выполнение измерений

Пробу анализируемого вещества в количестве 0,5 мм3 вводят в колонку при помощи микрошприца через головку испарителя, прокалывая резиновую мембрану. Иглу вводят на полную длину и быстро впрыскивают пробу.

Среднюю высоту пика вычисляют по результатам двух последовательных вводов пробы.

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2% масс. разбавляют этанолом.

10. Обработка и оформление результатов измерений

Массовую концентрацию октаацетата сахарозы в пробе (% масс.) определяют по градуировочному графику, построенному методом абсолютной калибровки.

За окончательный результат анализа принимается среднее арифметическое (C_ср.) результатов двух параллельных определений, допустимые расхождения между которыми не должны превышать +- 23%.

Указывается значение погрешности результата Дельта (% об.):

                                      _

                             дельта х Х

                    Дельта = ----------, где

                                100

дельта - граница  допускаемой погрешности измерения массовой концентрации

         октаацетата сахарозы, (п. 2), % масс.

Результат измерения должен заканчиваться тем же десятичным разрядом, что и погрешность. Результаты измерений оформляются записью в журнале и удостоверяются специалистом, проводившим измерения.

11. Контроль погрешности измерений

Внутренний оперативный контроль (ВОК) качества результатов измерений проводят в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 и МИ 2335-95.

ГАРАНТ:

Взамен МИ 2335-95 Госстандартом России введена в действие с 1 октября 2003 г. рекомендация МИ 2335-2003

11.1. Контроль погрешности измерений

Внутренний оперативный контроль погрешности измерений проводят в лаборатории до и после проведения серии измерений рабочих проб. Образцами для контроля служат градуировочные стандартные растворы октаацетата сахарозы с массовыми концентрациями 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 и 0,2% масс. Процедура контроля состоит в приготовлении растворов по п. 8.2, определении содержания октаацетата сахарозы в образцах по п. 9.

Измерения считают соответствующими нормативу оперативного контроля погрешности, если выполняется условие:

                       |X - X | < 0,01 х Х  х К, где

                             m            m

К  - норматив оперативного контроля погрешности, равный 13%;

Х  - результат определения  концентрации  октаацетата  сахарозы, (п. 2),

     % масс.

Х  - содержание октаацетата  сахарозы в контрольном растворе, % масс.

 m

При превышении норматива оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Результаты контрольных измерений заносят в рабочий журнал.

11.2. Контроль сходимости результатов параллельных измерений

Внутренний оперативный контроль сходимости результатов параллельных определений осуществляют в процессе измерений по размаху результатов.

Решение об удовлетворительной сходимости принимают при выполнении условия:

                                         _

                      |Х  - Х | < 0,01 x X x D, где

                        1    2

X  и Х  - результаты двух определений концентрации октаацетата сахарозы,

 1    2   (п. 2), % масс.

_

X       - среднее арифметическое X_1 и Х_2, % масс.;

D       - норматив оперативного  контроля  воспроизводимости  измерений,

          равный 23%.

При превышении норматива оперативного контроля сходимости проводят два дополнительных измерения, отбрасывают наибольший и наименьший результат и проводят повторный контроль сходимости. При превышении норматива измерения приостанавливают, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Результаты измерений заносят в рабочий журнал.

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волчек С.И., Волкова В.Н. (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана).

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко