Приложение 5 (обязательное). Определение безвредности и "остаточной" токсигенности штамма холерного вибриона при внутрикишечном введении кроликам-сосункам

Приложение 5
(обязательное)

Определение безвредности и "остаточной" токсигенности штамма холерного вибриона при внутрикишечном введении кроликам-сосункам

Методика подготовки испытуемого штамма для данных испытаний аналогична описанной в прилож. 3.

Для изучения безвредности, "остаточной" токсигенности и возможного восстановления вирулентности испытуемого штамма производят десятикратные пассажи на кроликах-сосунках 10 - 12-дневного возраста массой 100 - 120 г, которым внутрикишечно вводят 10(7) холерных вибрионов испытуемого штамма в 0,2 мл 0,9%-го раствора натрия хлорида. Для опытов берут по 2 кролика на пассаж. В качестве контроля при первом и десятом пассажах двум животным внутрикишечно вводят вместо микробов испытуемого штамма 0,2 мл физиологического раствора. Животных умерщвляют с помощью хлороформа через 48 ч после начала опыта. Всех крольчат вскрывают, регистрируют патологоанатомическую картину и производят высев содержимого толстого и тонкого кишечника, а у павших животных и мазков-отпечатков из внутренних органов - на питательные среды для идентификации холерных вибрионов. Для гистологического исследования от всех животных берут по 3 - 4 отрезка тонкого и толстого кишечника и кусочки из внутренних органов (печени, почек, надпочечников, селезенки, сердца, легких, мезентериальных лимфатических узлов). Дальнейшую гистологическую обработку морфологического материала ведут по общепринятой методике.