Приложение 4. Валидация методов определения химических и физико-химических показателей при производстве и контроле МИБП. Определение показателей точности метода в одной лаборатории (в одной организации)

Приложение 4

Валидация методов определения химических и физико-химических показателей при производстве и контроле МИБП
Определение показателей точности метода в одной лаборатории (в одной организации)

При валидации методов, использующихся при производстве и контроле МИБП для определения химических и физико-химических показателей оценивают следующие показатели точности:

- прецизионность;

- повторяемость;

- воспроизводимость;

- правильность.

1. Общие положения

1.1. Оценку показателей точности методов контроля получают на основе результатов внутрилабораторных или межлабораторных испытаний, проведенных в одной организации.

1.2. Показатель точности метода контроля, полученный в одной организации, не может быть использован при внедрении метода контроля в другой организации. При внедрении метода контроля в другой организации необходимо проведение валидации в полном объеме в соответствии с данными методическими указаниями.

1.3. Описание метода контроля, подлежащего валидации, должно быть сделано в соответствии с требованиями прилож. 2, должен быть указан способ представления и округления результатов испытаний. В методе контроля должны быть оговорены все условия, которые могут влиять на результат определения.

1.4. В проведении валидации должны принимать участие исполнители, освоившие метод контроля. Пробы, полученные для проведения валидации, не должны использоваться для освоения метода контроля.

1.5. Порядок проведения валидации определяется программой, составленной в соответствии с разделом 3 настоящих методических указаний. Составление программы валидации и обработка результатов должна проводиться с участием специалиста в области метрологии и математической статистики.

1.6. Желательно проведение валидации при участии нескольких исполнителей.

1.7. Концентрации определяемого вещества в препаратах МИБП, использующихся при валидации, должны быть по возможности равномерно распределены в пределах, установленных для определяемого показателя, и охватить нижний предел плюс 20%, среднее значение +- 10% и верхний предел минус 20% диапазоны ожидаемых пределов. Желательно, чтобы количество препаратов в каждом диапазоне было не менее 2, соответственно в трех диапазонах - не менее 6.

1.8. Пробы МИБП предоставляются исполнителям, принимающим участие в валидации, в закодированном виде. Кодирование проб производится путем присвоения каждой пробе отдельного неповторяющегося номера.

1.9. На случай утери или порчи отдельных проб, руководитель этапа валидации должен иметь в резерве некоторое количество каждой пробы с тем, чтобы обеспечить им исполнителей, нуждающихся в проведении повторного определения.

1.10. В программе валидации должны быть оговорены условия хранения МИБП (температура помещения, освещенность и т.п.) в соответствии с требованиями ФСП на препарат.

1.11. Для получения достаточно надежных оценок повторяемости метода необходимо, чтобы эти оценки были получены как минимум при 30 степенях свободы для каждого диапазона концентраций. Только в этом случае полученная оценка повторяемости метода характеризует предел расхождения между двумя единичными результатами испытаний в условиях повторяемости и является средней оценкой указанных расхождений для изучаемого диапазона концентраций.

1.12. Первоначальные пробы (препараты МИБП или другие материалы), предназначенные для проведения валидации, разделяют на части. Количество частей равно количеству аналитических серий, которое будет проведено всеми участниками валидации.

1.13. В аналитической серии исполнитель использует одну часть каждой первоначальной пробы. Количество аналитических серий и количество проб в каждой аналитической серии у каждого исполнителя должно быть одинаковым.

1.14. Каждую последующую аналитическую серию проводят после окончания работы с предыдущей аналитической серией.

1.15. Последовательность проб в каждой аналитической серии устанавливают в случайном порядке и указывают в программе валидации.

1.16. Исполнитель обязан вносить в протокол валидации каждый полученный результат. В протокол вносятся все замечания по валидации.

1.17. Все результаты вносят в сводную таблицу результатов валидации. К сводной таблице прилагают протоколы валидации.

2. Отбор, распределение в хранение проб

2.1. Соблюдение установленных правил отбора, распределения и хранения проб МИБП имеет важное значение для получения достоверных результатов валидации.

2.2. Для обеспечения идентичности всех частей проб, предоставляемых исполнителям, вначале отбирают первоначальную пробу (1 серия готовой продукции, полуфабриката, субстанции или другой материал), а затем делят ее на (DL + N) частей, где:

D - общее количество аналитических серий для каждого исполнителя;

L - количество исполнителей;

N - количество частей пробы, оставляемых руководителем в качестве резерва.

Если для валидации используют субстанцию или неразлитый полуфабрикат, при разделении первоначальной пробы на необходимое количество частей должны соблюдаться меры, обеспечивающие однородность всех частей пробы.

Размер одной части пробы, передаваемой исполнителю, должен обеспечивать получение одного результата. Если в методе контроля имеется указание о том, что результат получается как среднее из двух или большего количества определений, то размер каждой пробы должен обеспечивать проведение всех определений, входящих в результат.

Количество первоначальных проб выбирают в соответствии с п. 1.7 настоящего приложения.

2.3. Отбор проб МИБП для проведения валидации проводят в соответствии с СОП на отбор проб при контроле МИБП.

2.4. Подготовка проб должна быть отражена в протоколе валидации.

2.5. Пробы МИБП должны храниться в условиях, обеспечивающих сохранность всех свойств пробы. Условия хранения проб указываются в программе проведения валидации.

3. Правила округления результатов

3.1. Значение результата определения округляют до одной десятой известной (или предполагаемой) величины повторяемости.

3.2. Способ округления должен быть указан в программе валидации.

3.3. Шаг округления результатов указывается в СОП на метод контроля.

Примечание.

Способы округления

1) Шаг округления выбирают из ряда 5; 2; 1; 0,5; 0,2; 0,1 и т.д. Если в этом ряду не будет чисел, равных точно одной десятой повторяемости (r) метода испытаний, то в качестве шага округления берут ближайшее меньшее число. Например, если повторяемость метода равна 5,0, то результат испытания округляют с шагом 0,5. Если повторяемость метода равна 4,0, то результат испытания округляют с шагом не 0,4, а с шагом, равным ближайшему меньшему значению шага округления, т.е. 0,2.

2) При округлении результат испытания округляют до ближайшего числа, кратного шагу округления. Если результат испытания лежит посередине между ближайшими округленными числами, то его округляют в сторону числа, четного, по отношению к шагу округления. Например, при принятом шаге округления 0,1 число 23,55 округляют до 23,6, а число 23,45 округляют до 23,4. При принятом шаге округления 0,02 число 5,03 округляют до 5,04, а число 5,01 до 5,00 и т.д.

3) В некоторых случаях процедура округления результатов испытаний определяется спецификой метода и задается на основе иных правил. Например, для грубой оценки допускается округление в соответствии с правилами приближенного вычисления, т.е., если число больше или равно 5, то цифру увеличивают на 1 единицу разряда, если число меньше 5, то сохраняют цифру предшествующего разряда без изменений.

4. Порядок кодирования проб и процедура определения очередности испытаний проб

4.1. Исполнители получают кодированные (зашифрованные) пробы. Кодирование проб - присвоение каждой пробе отдельного неповторяющегося номера. Другой информации для идентификации пробы исполнитель не получает.

4.2. Принцип кодирования указывают в программе валидации (например, пробы кодируют четырехзначными номерами, в которых первые две цифры (01, 02, 03 и т.д.) обозначают номер микросерии и номер аналитической серии, а последние цифры - номер пробы).

4.3. Код пробы указывается на контейнерах или емкостях, в которых проба хранится и транспортируется.

4.4. Очередность использования проб во всех аналитических сериях устанавливает руководитель этапа валидации. Для определения очередности испытаний проб может быть использован, например, метод случайных чисел. Способ определения очередности указывают в программе валидации.

4.5. Руководитель этапа валидации составляет таблицу кодов всех проб, которая прилагается к отчету.

5. Определение повторяемости

Повторяемость характеризуется стандартным отклонением повторяемости S_r Стандартное отклонение определяют при многократном определении нескольких образцов.

Многократное определение проводят при максимально одинаковых условиях, а именно в условиях повторяемости (получают независимые результаты), т.е. проводят несколько серий определений один за другим в одной лаборатории, с применением одного метода, на идентичных частях одной и той же пробы, одним и тем же оператором, на одном и том же комплекте (экземпляре) испытательного оборудования и средств измерения.

Для оценки повторяемости проводят определение показателя в образцах, выбранных и приготовленных в соответствии с п.п. 1.7 и 2.2 настоящего приложения. Число образцов в каждом диапазоне должно быть одинаковым. Для получения достаточно надежных оценок повторяемости метода необходимо, чтобы эти оценки были получены как минимум при 30 степенях свободы для каждого диапазона концентраций. Если статистический план, на основании которого проводилось исследование, не обеспечивает 30 степеней свободы, то оценку параметров эмпирического распределения нельзя считать представительной.

Рассчитывают стандартное отклонение повторяемости и доверительный интервал разности двух результатов, полученных в условиях повторяемости.

Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента, предусмотренного в программе валидации.

Пример плана эксперимента для оценки повторяемости метода определения белкового азота, позволяющий максимально упростить расчеты, приведен в прилож. 8.

6. Определение внутрилабораторной воспроизводимости (в одной лаборатории или в одной организации)

Для определения внутрилабораторной воспроизводимости проводят определение показателя в образцах, выбранных и приготовленных в соответствии с п.п. 1.7 и 2.2 настоящего приложения, в одной организации одним и тем же методом на идентичных частях одной и той же пробы в одной или нескольких лабораториях, меняя следующие факторы:

- разные операторы;

- различные комплекты (экземпляры) испытательного оборудования и средств измерения, предусмотренные в НД на метод.

Воспроизводимость характеризуется стандартным отклонением вопроизводимости S_R.

Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента, предусмотренного в программе валидации.

Для получения достаточно надежных оценок внутрилабораторной воспроизводимости метода необходимо, чтобы эти оценки были получены как минимум при 30 степенях свободы для каждого диапазона концентраций. Если статистический план, на основании которого проводилось исследование, не обеспечивает 30 степеней свободы, то оценку параметров эмпирического распределения нельзя считать представительной.

7. Определение правильности

Для нового метода с целью определения правильности применяют два основных подхода:

1. Предлагаемый метод сравнивается со вторым методом, точность которого установлена. Метод сравнения может быть методом, приведенным в ГФ или в общей фармакопейной статье ФС 42-3874-99.

2. Используется метод добавок. Анализируемое вещество и образцы плацебо с внесенным в них веществом, охватывающие заданный диапазон концентраций, исследуются в соответствии с методом. По результатам анализа строят график, для построения которого отмечается на оси ОХ - ожидаемое количество анализируемого соединения; на оси ОУ - измеренное количество анализируемого соединения.

При отсутствии систематической ошибки измеренные значения должны лежать на прямой линии, проходящей через начало координат и имеющей наклон.

Рассчитывают стандартное отклонение и доверительный интервал точки пересечения графика с осью ОУ и угол наклона графика. Для построения графика используют, как правило, метод наименьших квадратов, для расчета коэффициентов - регрессионный анализ. Конкретный алгоритм расчета зависит от метода анализа и плана эксперимента по валидации, предусмотренного в программе валидации.

Правильность считают удовлетворительной при соблюдении следующих условий:

1. Значения, полученные по обеим методикам анализа, не должны различаться на значительную величину (не должны превышать доверительный интервал среднего значения).

2. а) Среднее выявление должно, как правило, находиться в диапазоне от 98 до 102% от добавленной величины.

б) Доверительный интервал (Р = 95%) точки пересечения графика с осью ОУ должен включать начало координат и не превышать +- 10% от измеряемой величины. Доверительный интервал (Р = 95%) наклона линии регрессии должен включать 1 и быть в пределах 0,9 - 1,1.

Для определения правильности проводят определение показателя в образцах, содержащих анализируемое вещество в необходимом диапазоне (низкая, средняя, высокая концентрация). Анализ проводят не менее 5 - 6 раз.