Приложение 3. Валидация методов определения химических и физико-химических показателей при производстве и контроле МИБП. Определение характеристики (свойств) метода

Приложение 3

Валидация методов определения химических и физико-химических показателей при производстве и контроле МИБП
Определение характеристики (свойств) метода

При валидации методов, использующихся при производстве и контроле МИБП для определения химических и физико-химических показателей (далее - валидации методов), оценивают в зависимости от назначения метода следующие характеристики (свойства):

- специфичность;

- линейность;

- диапазон определяемых величин;

- предел обнаружения или предел количественного определения (для примеси и остаточных количеств веществ);

- чувствительность.

Кроме того, должна быть проведена оценка устойчивости метода, которая включает изучение продолжительности и условий хранения рабочих растворов реактивов и стандартных образцов, а также изучение влияния параметров окружающей среды на результаты анализа.

Характеристики (свойства) метода, как правило, должны быть установлены в процессе его разработки.

Для валидации метод должен быть изложен в виде стандартной операционной процедуры в соответствии с требованиями прилож. 2 (за исключением показателей точности, согласовывающих и утверждающих подписей).

Специфичность

Специфичность - это способность метода определять исключительно анализируемое вещество.

Специфический метод дает возможность определять анализируемое вещество в присутствии других веществ и/или примесей других веществ.

При оценке специфичности устанавливают факторы, мешающие или влияющие на определение. При наличии таких факторов они должны быть указаны в НД на метод.

Для оценки специфичности может быть использован метод добавок и стандартные образцы. При использовании метода добавок процент выявления не должен превышать +- 10% от добавленного количества анализируемого вещества.

Линейность

Линейность метода определяют, проводя анализ проб с различной концентрацией (при разработке метода - не менее 5 концентраций, при ревалидации достаточно трех концентраций) анализируемого вещества или образцов плацебо с внесенным веществом в диапазоне, предусмотренном методом контроля. По результатам анализа строят график вручную или с помощью машинной обработки, для построения графика отмечают на оси ОХ - ожидаемое количество анализируемого соединения; на оси ОУ - величину аналитического сигнала.

Стандартное отклонение и доверительный интервал точки пересечения графика с осью ОУ (интерсепт, коэффициент сдвига) и наклона линии регрессии могут быть вычислены, например, методом наименьших квадратов или с помощью машинной обработки с пакетом статистических программ для регрессионного анализа, например, Microsoft Excel.

Вывод о линейности может быть сделан в следующих случаях:

при визуальной оценке:

- измеренные значения должны лежать на линии регрессии или быть равномерно распределены по обе стороны от нее (отклонение не должно превышать 10%).

при машинной обработке:

- если коэффициент корреляции превышает 0,9;

- если начало координат находится внутри доверительного интервала точки пересечения графика с осью ОУ (если график должен проходить через 0, например, при оценке примесей).

Если метод является линейным лишь в определенном диапазоне, должна быть указана область линейности.

Должны быть регламентированы требования к построению калибровочного графика. При последующей валидации должен быть установлен доверительный интервал для линии регрессии.

Чувствительность

Чувствительность - это способность метода регистрировать минимальные изменения концентрации. Мерой чувствительности является наклон линии регрессии при определении линейности.

Диапазон определяемых величин

Диапазон определяемых величин - это интервал между верхним и нижним значениями концентрации анализируемого вещества (включая эти значения), для которого продемонстрирована пригодность данной методики с точки зрения линейности, повторяемости, воспроизводимости и правильности в одной лаборатории.

Предел обнаружения

Предел обнаружения характеризует минимальное количество вещества, которое может выявлять метод. Данная характеристика необходима для методов, предназначенных для испытания на чистоту или выявления остаточных количеств веществ, которые были использованы при получении препарата.

Предел обнаружения может быть установлен с использованием визуальной или инструментальной оценки. При использовании инструментальной оценки предел обнаружения устанавливают расчетным путем - по соотношению аналитического сигнала анализируемой пробы и контрольного раствора (это соотношение должно быть не менее 3:1).

Предел количественного определения

Предел количественного определения характеризует минимальное количество вещества, которое может быть количественно определено. Данная характеристика необходима для методов определения примесей, например, примесей в субстанции или лекарственных формах.

Установление предела количественного определения может проводиться расчетным путем на основании величины стандартного отклонения и угла наклона графика при определении линейности.