Методические указания МУК 4.1.1461-03 "Определение остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1461-03
"Определение остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 24 июня 2003 г.)

Дата введения: 30 июня 2003 г.

Введены впервые

2. Методика определения остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на определении феноксапроп-П-этила и его метаболита феноксапроп-П с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором после извлечения препарата из воды гексаном и очистки его на концентрирующем патроне Диапак С16, и экстракции метаболита из подкисленной воды диэтиловым эфиром, из почвы, растительного материала и масла водным ацетонитрилом при ультразвуковой обработке, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с силикагелем.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания зерновых культур, сахарной и столовой свеклы, подсолнечника, сои, льна и рапса.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Таблица

Анализируемый объект	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	предел обнаружения, мг/дм3, мг/кг	диапазон определяемых концентраций, мг/дм3, мг/кг	среднее значение определения, %	стандартное отклонение, S, %	относительное отклонение, %	доверительный интервал среднего, %
Феноксапроп-П-этил
Вода	0,0003	0,0003-0,003	93,3	6,3	2,8	+-5,8
Феноксапроп-П
Вода	0,0003	0,0003-0,003	92,4	6,8	3,0	+-6,3
Почва	0,02	0,02-0,2	83,1	6,8	3,0	+-6,3
Зерно	0,01	0,01-0,1	80,1	7,7	3,4	+-7,1
Солома	0,05	0,05-0,5	82,5	8,9	4,0	+-8,4
Свекла столовая (корнеплоды)	0,01	0,01-0,1	81,1	5,1	2,3	+-4,7
Свекла сахарная (корнеплоды)	0,025	0,025-0,25	83,2	5,7	2,5	+-5,7
Свекла сахарная (ботва)	0,025	0,025-0,25	80,1	6,4	2,8	+-6,3
Семена подсолнечника	0,01	0,01-0,1	80,7	4,8	2,1	+-4,5
Масло подсолнечника	0,01	0,01-0,1	79,4	4,6	2,1	+-43
Семена сои	0,05	0,05-0,5	81,2
Масло сои	0,05	0,05-0,5	83,0
Семена рапса	0,10	0,1-1,0	80,7
Масло рапса	0,10	0,1-1,0	85,3
Зеленая масса рапса	0,10	0,1-1,0	83,1
Семена льна	0,10	0,1-1,0	80,7
Масло льна	0,10	0,1-1,0	81,2
Соломка	0,10	0,1-1,0	83,3

2.2. Реактивы, растворы, материалы

Феноксапроп-П-этил с содержанием д.в. 98,9% (АгрЭво, Германия)
Феноксапроп-П с содержанием д.в. 99,1% (АгрЭво, Германия)
Ацетонитрил, ч		ТУ 6-09-3534-82
Вода бидистиллированная		ГОСТ 7602-72
Гексан, ч		ТУ 6-09-3375-78
Железо (II) серно-кислое, хч		ГОСТ 4148-78
Калия перманганат, хч		ГОСТ 20490-75
Калий углекислый, хч		ГОСТ 4221-76
Кальция хлорид, хч		ГОСТ 4161-77
Кислота ортофосфорная, 87%, хч		ГОСТ 6552-80
Кислота серная, хч		ГОСТ 4204-77
Кислота хлористоводородная, хч		ГОСТ 3118-77
Натрия гидроксид, хч		ГОСТ 4328-77
Натрия сульфат безводный, хч		ГОСТ 4166-76
Натрий углекислый, хч		ГОСТ 83-63
Натрия хлорид, хч		ГОСТ 4233-77
Спирт метиловый, хч		ГОСТ 6995-77
Фосфора пентаксид, ч		МРТУ 6-09-5759-69
Этилацетат		ГОСТ 22300-76
Эфир диэтиловый		ГОСТ 6265-74
Элюент N 1 для колоночной хроматографии: смесь этилацетат-метанол (7 : 3, по объему)
Элюент N 2 для колоночной хроматографии: смесь этилацетат-метанол (6 : 4, по объему)
Элюент N 1 для Диапака С16: смесь ацетонитрил - вода (10 : 90, по объему)
Элюент N 2 для Диапака С16: смесь ацетонитрил-вода (20 : 80, по объему)
Подвижная фаза N 1 для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил-вода (68 : 32, по объему)
Подвижная фаза N 2 для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (55 : 44,9 : 0,1, по объему)
Подвижная фаза N 3 для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (54 : 45,9 : 0,1, по объему)
Концентрирующий патрон Диапак С16 (АО БиоХимМак, РФ)
Силикагель для адсорбционной хроматографии (Вельм, Германия) 1 степени активности или силикагель КСК (60-100 меш)
Стекловата
Фильтры бумажные "синяя лента"		ТУ 6-09-1678

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирм Altex (США), Knauer (Германия) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом 130-С8 Т, Диасфером-110-С18 или
Диасорбом 130-С16 Т (АО БиоХимМак, РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)
Шприц для ввода образцов в жидкостный хроматограф
Шприц для ввода образцов в концентрирующий патрон Диапак
Весы аналитические типа ВЛР-200		ГОСТ 19401-74
Водоструйный насос		ГОСТ 10696-75
Встряхиватель механический		ТУ 64-1-1081-73
Иономер ЭВ-74 или аналогичный		ГОСТ 22261-76
Мельница электрическая лабораторная или аналогичная		ТУ 46-22-236-79
Ротационный испаритель тип ИР-1М		ТУ 25-11-917-76
Сито с диаметром отверстий 1 мм
Баня ультразвуковая, модель D-50, Branson Instr. Co., США
Баня водяная		ТУ 46-22-603-75
Воронка Бюхнера		ГОСТ 0147-73
Воронки делительные, вместимостью 100, 250 мл		ГОСТ 25336-82
Воронки для фильтрования, стеклянные		ГОСТ 8613-75
Колба Бунзена		ГОСТ 5614-75
Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 100, 250 и 500 мл		ГОСТ 9737-70

ГАРАНТ:

Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г. взамен ГОСТ 9737-70 с 1 января 1995 г. принят ГОСТ 9737-93

Колбы конические с притертыми пробками, вместимостью 250 мл		ГОСТ 25336-82
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100 и 1 000 мл		ГОСТ 1770-74
Колбы грушевидные, вместимостью 100, 250 и 500 мл		ГОСТ 25336-82
Пипетки мерные, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл		ГОСТ 20292-74Е
Пробирки градуированные с притертыми пробками, вместимостью 5 и 10 мл		ГОСТ 10515-75
Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 250 и 500 мл		ГОСТ 1770-74

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10696-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

По-видимому, в 15 абзаце таблицы допущена опечатка. Имеется в виду ГОСТ 9147-73

Взамен ГОСТ 8613-75 и ГОСТ 10515-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

Отобранные пробы зерна, семян и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4°С не более трех месяцев. Зеленую массу и корнеплоды хранят в стеклянной посуде в холодильнике при температуре не выше 4°С не более двух дней; при длительном хранении (не более трех месяцев) пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18°С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4°С в течение 2 дней, при температуре -18°С в течение месяца.

Пробы почвы высушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света до воздушно-сухого состояния и хранят в темном сосуде не более трех месяцев.

Перед анализом зерно, семена и солому размалывают на мельнице, зеленую массу и корнеплоды измельчают ножом, сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.

Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора углекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 мл свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 55 мл воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.

Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

При подготовке подвижной фазы N 1 для анализа феноксапроп-П-этила отмеряют 680 мл ацетонитрила, переносят в колбу на 1 000 мл, добавляют 320 мл дистиллированной воды, перемешивают, фильтруют, дегазируют.

При подготовке подвижной фазы N 2 и 3 для анализа феноксапроп-П отмеряют соответственно 550 и 540 мл ацетонитрила, переносят в колбу на 1 000 мл, добавляют 449 и 459 мл бидистиллированной воды и 1 мл ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

2.5.3. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ при анализе феноксапроп-П-этила смесью ацетонитрил-вода (68 : 32, по объему; подвижная фаза N 1), а при анализе феноксапроп-П смесью ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (55:44,9:0,1, по объему; подвижная фаза N 2) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5-15 мин).

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор феноксапроп-П-этила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 98,9% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре -12°С не более 15 дней.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,03; 0,06; 0,15 и 0,30 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора феноксапроп-П-этила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой N 1 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) непосредственно в день проведения анализа.

Основной стандартный раствор феноксапроп-П с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,1% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре -12°С не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,01; 0,02; 0,03; 0,10 и 0,30 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метаболита соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой N 2 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) непосредственно в день проведения анализа.

При изучении полноты открывания феноксапроп-П-этила и феноксапроп-П в модельных матрицах используются ацетонитрильные растворы веществ.

2.5.5. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора феноксапроп-П-этила с концентрациями 0,03; 0,06; 0,15 и 0,30 мкг/мл или рабочего стандартного раствора феноксапроп-П с концентрациями 0,01; 0,02; 0,03; 0,10 и 0,30 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации препарата или его метаболита в растворе в мкг/мл.

2.5.6. Подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 0,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл этилацетата. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 30 мл смеси этилацетат-метанол (1 : 1, по объему) со скоростью 1-2 капли в секунду и затем 20 мл этилацетата.

Концентрирующий патрон Диапак С16 промывают последовательно с помощью медицинского шприца 5 мл бидистиллированной воды и 5 мл ацетонитрила со скоростью 5 мл/мин.

2.5.7. Проверка хроматографического поведения феноксапроп-П на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора феноксапроп-П с концентрацией 10 мкг/мл, отдувают растворитель потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2-3 мл этилацетата и наносят на подготовленную колонку. Промывают колонку 40 мл элюента N 1 (смесь этилацетат-метанол, 7 : 3) и затем 60 мл элюента N 2 (смесь этилацетат-метанол, 6 : 4) со скоростью 1-2 капли в секунду. Отбирают фракции по 5 мл каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) и анализируют на содержание феноксапроп-П по п. 2.7.2.

Фракции, содержащие феноксапроп-П, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 10 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ и вновь анализируют по п. 2.7.2. Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Примечание: Профиль вымывания феноксапроп-П может меняться при использовании новых партий сорбента и растворителей.

2.6. Описание определения

2.6.1. Экстракция феноксапроп-П-этила и очистка экстракта

2.6.1.1. Вода. Образец предварительно отфильтрованной воды объемом 100 мл помещают в делительную воронку емкостью 250 мл и обрабатывают 30 мл гексана при встряхивании в течение 1 мин. Отделяют органический слой и водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30°С. Остаток количественно переносят двумя порциями (по 1 мл) смеси ацетонитрил-вода (1:9, по объему) в подготовленный концентрирующий патрон Диапак С16 (п. 2.5.6) и последний промывают 5 мл указанной выше смеси со скоростью 5 мл/мин. Феноксапроп-П-этил элюируют 7 мл смеси ацетонитрил-вода (2:8, по объему). Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 45°С, сухой остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) и анализируют на содержание феноксапроп-П-этила по п. 2.7.1.

2.6.2 Экстракция феноксапроп-П

2.6.2.1. Вода. Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном из п. 2.6.1.1, переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, подкисляют 1 н HCl до рН 2 и трижды экстрагируют диэтиловым эфиром (30 + 20 + 20 мл). Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30°С. Остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) и анализируют на содержание феноксапроп-П по п. 2.7.2.

2.6.2.2. Почва. Навеску (10 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл 80%-ного водного раствора ацетонитрила и помещают в ультразвуковую баню на 7 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Почву еще раз экстрагируют 50 мл 80%-ного ацетонитрила в ультразвуковой бане в течение 5 мин. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту (около 70 мл) раствора, эквивалентную 5 г почвы. Дальнейшую очистку проводят по п.п. 2.6.3 и 2.6.4.

2.6.2.3. Зерно, семена, солома, соломка. Навеску размолотых зерна и семян (10 г) или соломы (5 г) помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл 80%-ного ацетонитрила и помещают в ультразвуковую баню на 7 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Растительный материал повторно экстрагируют 50 мл 80%-ного ацетонитила в ультразвуковой бане в течение 5 мин. Из объединенного экстракта муки или соломы отбирают аликвоту (около 70 мл) раствора, эквивалентную соответственно 5 г зерна и семян или 2,3 г соломы и соломки. Дальнейшую очистку проводят по п.п. 2.6.3 и 2.6.4.

2.6.2.4. Зеленая масса, корнеплоды. К навеске (25 г) измельченного материала добавляют 125 мл 80%-ного ацетонитрила и гомогенизируют 3 мин при 10 000 об./мин, после чего суспензию помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. К суспензии добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл 80%-ного ацетонитрила. Из объединенного экстракта отбирают пятую часть объема (около 35 мл) раствора, эквивалентную 5 г растительной ткани. Дальнейшую очистку проводят по п.п. 2.6.3 и 2.6.4.

2.6.2.5. Масло. Навеску (5 г) масла помещают в коническую колбу емкостью 100 мл, приливают 50 мл 80%-ного ацетонитрила и эмульсию энергично перемешивают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Ацетонитрильную фазу осторожно декантируют в делительную воронку емкостью 200 мл, а к оставшемуся маслу приливают 50 мл 80%-ного ацетонитрила и эмульсию перемешивают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Эмульсию переносят в делительную воронку, которую помещают в холодильник на 30 мин для четкого разделения слоев. Отделяют ацетонитрильную фазу и пропускают ее через хлопковую вату в грушевидную колбу емкостью 200 мл. Дальнейшую очистку проводят по п.п. 2.6.3 и 2.6.4.

2.6.3. Очистка экстрактов

Отобранные аликвоты растительного (из п.п. 2.6.2.3, 2.6.2.4 и 2.6.2.5) и почвенного (из п. 2.6.2.2) экстрактов упаривают до объема 7-10 мл на роторном испарителе при температуре 40°С. Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл, приливают 15 мл бидистиллированной воды, 20 мл гексана и смесь встряхивают в течение 1 мин. Органический слой отбрасывают. Водную фазу подкисляют 1 н HCl до рН 2, переносят в делительную воронку, прибавляют 20 мл диэтилового эфира и смесь встряхивают 1 мин. Собирают органическую фазу и экстракцию водной фракции диэтиловым эфиром повторяют еще два раза (по 10 мл). Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30°С.

2.6.4. Очистка на колонке с силикагелем

Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п. 2.6.3 экстрактов зерна, семян, зеленой массы, корнеплодов, масла и почвы, растворяют в 5 мл этилацетата и 3 мл полученного раствора вносят в подготовленную хроматографическую колонку (п. 2.5.6). Остаток экстрактов соломы и соломки льна растворяют в 3 мл этилацетата и количественно переносят в хроматографическую колонку. Колонку промывают 20 мл смеси этилацетат-метанол (7 : 3, по объему), которые отбрасывают. Метаболит элюируют 40 мл смеси этилацетат-метанол (6:4, по объему) и собирают элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30°С. Сухой остаток экстрактов зерна, почвы, семян и масла подсолнечника и сои растворяют в 3 мл, экстрактов соломы и соломки льна в 5 мл, экстрактов зеленой массы, семян и масла рапса, а также семян и масла льна в 6 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ (п. 2.5.2) и анализируют на содержание метаболита по п. 2.7.2. Сухой остаток экстрактов ботвы и корнеплодов свеклы растворяют в 3 мл подвижной фазы N 3 для ВЭЖХ и анализируют на содержание метаболита по п. 2.7.3.

2.7. Условиях хроматографирования

2.7.1. Феноксапроп-П-этил

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).

Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом 130-С16 Т, зернением 7 мкм.

Температура колонки		комнатная.
Подвижная фаза		ацетонитрил-вода (68 : 32, по объему).
Скорость потока элюента		0,8 мл/мин.
Рабочая длина волны		240 нм.
Чувствительность		0,01 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы		50 мкл.
Время выхода феноксапроп-П-этила		6,8 мин.
Линейный диапазон детектирования		1,5-15,0 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 1 для ВЭЖХ.

2.7.2. Феноксапроп-П

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).

Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом 130-С8 Т, зерненением 7 мкм.

Температура колонки		комнатная.
Подвижная фаза		ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (55:44,9:0,1, по объему).
Скорость потока элюента		0,7 мл/мин.
Рабочая длина волны		240 нм.
Чувствительность		0,01 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы		50 мкл.
Время выхода метаболита		6,8 мин.
Линейный диапазон детектирования		0,5-15,0 нг.
Альтернативная неподвижная фаза:		Диасорб 130-С16 Т.
Подвижная фаза		ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (60:39,9:0,1, по объему).
Время выхода метаболита		5,4 мин.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 2 для ВЭЖХ.

2.7.3. Феноксапроп-П

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Knauer (Германия).

Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасфером 110-С18, зернением 5 мкм.

Температура колонки		комнатная.
Подвижная фаза		ацетонитрил-вода-ортофосфорная кислота (54:45,9:0,1, по объему).
Скорость потока элюента		0,7 мл/мин.
Рабочая длина волны		240 нм.
Чувствительность		0,005 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы		20 мкл.
Время выхода метаболита		9,5 мин.
Линейный диапазон детектирования		0,2-2,5 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 3 для ВЭЖХ.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание феноксапроп-П-этила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                    H  x A x V

                     1

               X = ------------, где

                      H  x m

                       0

     Х  - содержание феноксапроп-П-этила в пробе, мг/дм3;

     Н  - высота пика образца, мм;

      1

     Н  - высота пика стандарта, мм;

      0

     А  - концентрация стандартного раствора феноксапроп-П-этила, мкг/мл;

     V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

     m  - объем анализируемой пробы, мл.

Содержание феноксапроп-П рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                    H  x A x V

                     1

               X = ------------, где

                      H  x m

                       0

     X  - содержание феноксапроп-П в пробе, мг/кг или мг/дм3;

     Н  - высота пика образца, мм;

      1

     Н  - высота пика стандарта, мм;

      0

     A  - концентрация стандартного раствора феноксапроп-П, мкг/мл;

     V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

     m  - масса или объем анализируемой части образца, г или мл (для воды

- 100 мл;   для  зерна,  семян,  зеленой  массы, масла и почвы - 3 г; для

соломы и соломки - 2,5 г).

При расчете содержания феноксапроп-П в эквивалентах феноксапроп-П-этила полученное значение X умножают на 1,08.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

ГАРАНТ:

Взамен МИ 2335-95 Госстандартом России введена в действие с 1 октября 2003 г. рекомендация МИ 2335-2003

5. Разработчики

Талалакина Т.Н.; Дубовая Л.В.; Макеев А.М., к. биол. н.

ВНИИфитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко