Методические указания МУК 4.1.1478-03 "Определение фенола в атмосферном воздухе и воздушной среде жилых и общественных зданий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1478-03
"Определение фенола в атмосферном воздухе и воздушной среде жилых и общественных зданий методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: 30 июня 2003 г.
Введены впервые

1. Область применения

Методика по ВЭЖХ определению концентрации фенола в воздухе разработана с целью обеспечения аналитического контроля фенола в атмосферном воздухе и воздушной среде помещений жилых и общественных зданий и оценки соответствия уровня его содержания гигиеническим нормативам.

Диапазон измеряемых концентраций фенола в воздухе 0,0015 - 0,02 мг/м3.

Нижний предел обнаружения фенола в воздухе - 0,0005 мг/м3.

2. Физико-химические свойства, токсикологическая характеристика и гигиенические нормативы

     С6Н5О                                                   М. м. 94,11

Фенол - бесцветное кристаллическое вещество со специфическим запахом, Т_пл. - 43°С, Т_исп. - 182°С. В 100 г воды при 15°С растворяется 8,2 г фенола. Хорошо растворяется в спирте, хлороформе, диэтиловом эфире, маслах и других органических растворителях.

Фенол является нервным ядом, обладает сильным раздражающим и прижигающим действием. Предельно допустимая максимально разовая концентрация - 0,01 мг/м3, среднесуточная - 0,003 мг/м3. Относится ко 2 классу опасности.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с суммарной относительной погрешностью +-15,2% при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение концентраций фенола в воздухе выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентным детектированием. Выделение и концентрирование фенола из воздуха осуществляют абсорбционным поглощением в щелочной раствор с последующим ВЭЖХ анализом аликвоты подкисленной пробы.

Нижний предел обнаружения фенола в объеме анализируемой пробы 0,00015 мкг.

Определению не мешают другие ароматические и фенолоподобные соединения.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

5.1. Средства измерений

Хроматограф жидкостный НР-1050 с флуориметрическим детектором 1046А или любой другой жидкостный хроматограф с флуориметрическим или иным детектором, обеспечивающим нижний предел обнаружения фенола в объеме вводимой пробы 0,00015 мкг
Автосэмплер или ручной дозатор пробы для жидкостного хроматографа с дозирующей петлей 20 мм3
Автоматический пробоотборник воздуха модель ОП 824 или любой другой с основной приведенной погрешностью задания расхода не более +- 5%	ИРМБ.418311.002 РЭ
Термометр-психрометр электронный цифровой ЭЦТП или любой другой с диапазоном измерения температур 0 - 50°С и абсолютной погрешностью измерения не более 0,2°С
Барометр-анероид М-67, предел допускаемой погрешности +- 0,8 мм рт.ст.	ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104-01
Меры массы	ГОСТ 7328-01
Колбы мерные, вместимостью 25-100-500-1 000 см3	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 0,1; 0,2; 1-2-5-10 см3	ГОСТ 29227-91 ГОСТ 25336-82

5.2. Вспомогательные устройства

Колонка аналитическая - Сферисорб ОДС-2, 250 х 4 мм, зернения 5 мкм или любая другая, заполненная модифицированным С18 силикагелем зернением 5 - 7 мкм
Микрошприц для ввода пробы в жидкостный хроматограф, вместимостью 50 - 100 мм3 типа "Hamilton 80600"
Шприц медицинский, одноразовый любого типа, вместимостью 1 см3 с тонкой иглой
Поглотительный сосуд Рихтера, вместимостью 20 см3	ТУ 25.11.1136-75
Пробирки конические градуированные, вместимостью 10 см3	ГОСТ 1770-74
Стакан химический, вместимостью 100 см3	ГОСТ 1770-74
Воронка химическая	ГОСТ 1770-74

5.3. Реактивы

Вода дистиллированная по	ГОСТ 6709-72
Ацетонитрил для ВЭЖХ UV 210 ОСЧ	ТУ 6-09-14-2167-84
Стандартный образец состава раствора фенола	ГСО 7346-96
Кислота уксусная ледяная, х. ч.	ГОСТ 61-75
Натрий углекислый, х. ч.	ГОСТ 83-79
Универсальная индикаторная бумага рН 0-12 Лахема, Брно

6. Требования безопасности

- При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

- При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и электроаспиратора соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица с квалификацией не ниже инженера-химика или врача-лаборанта, имеющего химическое образование и опыт работы на жидкостном хроматографе.

8. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления и подготовки проб к анализу проводят при нормальных условиях согласно ГОСТ 15150-69 при температуре воздуха 20 +- 5°С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт.ст. и влажности воздуха не более 80%;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору и настоящей методикой.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие подготовительные работы:

приготовление поглотительного раствора, заполнение поглотительного сосуда, приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление поглотительного раствора

8,0 г углекислого натрия растворяют в 1 000 см3 дистиллированной воды. При необходимости раствор фильтруют через фильтр с синей лентой.

Срок хранения раствора 6 месяцев.

9.2. Заполнение поглотителей

Пипеткой вместимостью 10 см3 вводят в сосуд Рихтера 6 см3 поглотительного раствора и делают фломастером отметку уровня раствора на стекле. Сосуд закрывают заглушками. Срок хранения подготовленного поглотителя 3 дня.

9.3. Приготовление градуировочных растворов и установление градуировочной характеристики

Исходный раствор для градуировки готовят из ГСО фенола в этаноле с концентрацией 1 мг/см3. В мерную колбу вместимостью 1 000 см3 вводят 400 - 500 см3 поглотительного раствора. Вскрывают ампулу с ГСО. Пипеткой вместимостью 5 см3 отбирают 3 см3 раствора стандарта и вводят в колбу. Тщательно перемешивают и доводят объем раствора в колбе до метки. Концентрация фенола в исходном растворе 0,003 мг/см3. Срок хранения раствора в холодильнике 30 дней.

Градуировочную характеристику устанавливают на 5 сериях градуировочных растворов фенола в поглотительном растворе. Каждую серию готовят из 5 - 7 градуировочных растворов в мерных колбах вместимостью 100 см3. Для этого в каждую колбу вносят по 40 - 50 см3 поглотительного раствора и соответствующей пипеткой вносят исходный раствор фенола в соответствии с табл. 1. Раствор тщательно перемешивают и доводят уровень поглотительным раствором до метки. Срок хранения растворов в холодильнике 30 дней.

Для построения градуировочной характеристики из подготовленного градуировочного раствора отбирают 1 см3 раствора и переносят в коническую градуированную пробирку вместимостью 10 см3. В пробирку с помощью одноразового медицинского шприца с тонкой иглой вводят две капли ледяной уксусной кислоты. Раствор перемешивают в течение 1 - 2 минут до прекращения выделения газовых пузырьков. рН подкисленного раствора должен быть в интервале 4 - 6. Универсальной индикаторной бумажкой проверяют рН. 20 мм3 подготовленного раствора анализируют на жидкостном хроматографе с флуориметрическим или иным детектором в следующих условиях:

Аналитическая колонка	Сферисорб ODS-2 250 х 4 mm, 5 мкм
Элюент	Ацетонитрил:вода = 25:75
Скорость подачи элюента	0,9 мл/мин
Детектор флуориметр	HP 1046A
Длина волны возбуждения	215 нм
Длина волны флуоресценции	300 нм
Время удерживания пика фенола	7,4 мин

На полученной хроматограмме измеряют площадь пика фенола. За результат измерения принимают среднее арифметическое значение трех параллельных определений, относительная разница между которыми не превышает 10% среднего арифметического значения. По полученным средним значениям строят градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от количества фенола (мкг) в объеме введенной пробы.

Таблица 1

Градуировочные растворы для установления градуировочной характеристики при определении концентрации фенола в воздухе

Номера раствора	1	2	3	4	5	6	7
Объем исходного раствора (С = 3 мкг/см3), см3	0,75	1,5	2,2	3,0	4,5	5,0	10,0
Концентрация фенола в градуировочном растворе, мкг/см3	0,0225	0,045	0,066	0,900	0,135	0,150	0,300
Масса фенола в 20 мм3 раствора, мкг	0,00045	0,00090	0,00132	0,0018	0,0027	0,0030	0,0060
Доля ПДК фенола в атмосфере, соответствующая раствору	0,5	1,0	1,5	2,0	3,0	3,3	6,6

9.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят согласно ГОСТ 17.2.3.01-86.

Воздух со скоростью 3 дм3/мин аспирируется через поглотительный сосуд в течение 30 мин. Для каждой точки отбирают две параллельные пробы. Поглотительный сосуд с отобранной пробой закрывают заглушками. При отборе пробы фиксируют температуру и давление окружающей среды. Срок хранения пробы 3 суток в холодильнике.

10. Выполнение измерений

Поглотительным раствором доводят уровень жидкости в поглотительном сосуде до первоначального уровня и перемешивают.

Выливают содержимое сосуда в градуированную коническую пробирку вместимостью 10 см3. Пипеткой переносят 1 см3 поглотительного раствора с отобранной пробой воздуха в другую пробирку. Добавляют 2 капли ледяной уксусной кислоты и перемешивают 1 - 2 мин. Проверяют рН раствора с помощью универсальной индикаторной бумажки и проводят измерение содержания фенола в отобранной аликвоте, как указано в п. 9.3. За результат измерения принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений.

11. Вычисление результатов измерений

Концентрацию фенола в воздухе С (мг/м3) вычисляют по формуле:

                                  AV

                                    1

                             C = -----, где

                                 V  V

                                  пр в

А  - содержание фенола, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

V  - исходный объем раствора в поглотительном сосуде, см3 (6 см3);

 1

V  - объем анализируемой пробы поглотительного раствора, см3 (0,02 см3);

 пр

V  - объем отобранной пробы воздуха, приведенный к нормальным условиям,

 в   дм3.

12. Контроль погрешности измерений

Контроль погрешности измерений проводят на градуировочных растворах.

Рассчитывают среднее значение результатов измерений концентрации фенола в градуировочных растворах:

                         ___   1

                         C   = - Сумма С  , где

                          ni   n        ni

n  - число измерений в i-пробе градуировочного раствора;

С  - результат измерения  концентрации  фенола в i-пробе градуировочного

 ni  раствора, мкг/см3.

Рассчитывают среднее квадратичное отклонение результатов измерения концентрации фенола в градуировочном растворе.

                                         _        2

                                  Сумма (С  - С  )

                                          ni   ni

                   S = кв. корень(-----------------)

                                        n-1

Рассчитывают доверительный интервал

                                    S

                    Дельта C = ----------- x t, где

                            i  кв.корень n

t - коэффициент   нормированных   отклонений,  определяемых  по  таблице

    Стьюдента, при доверительной вероятности 0,95.

Рассчитывают погрешность определения концентраций фенола

                                ________

                                Дельта С

                       дельта = -------- х 100,%

                                  С

                                   ni

Если дельта <= 15,2%, то погрешность измерения удовлетворительная.

Если данное условие не выполняется, то выясняют причину и повторяют измерения.

Список литературы

1. ГОСТ Р 8.563-96 ГСИ "Методики выполнения измерений".

2. ГОСТ 17.2.4.02-81 "Охрана природы. Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ".

3. ГОСТ 8.589-01 "Охрана природы. Метрологическое обеспечение контроля загрязненности атмосферы, поверхностных вод и почвы. Основные положения".

4. РД 52.04.186-89 "Фенол. Отбор проб в барботеры". С. 265

5. ГОСТ 12.1.016-76 "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам выполнения измерений".

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Имеется в виду ГОСТ 12.1.016-79*

6. ГОСТ 8.207-76 "Прямые измерения с многократными наблюдениями".

7. ГОСТ 1770-74 "Посуда мерная лабораторная стеклянная, цилиндры, мензурки, колбы. Общие технические условия".

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко