Методические указания МУК 4.1.2111-06 Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (утв. руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ Г.Г. Онищенко от 9 августа 2006 г.)

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Методические указания МУК 4.1.2111-06
Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
(утв. руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Г.Г. Онищенко РФ от 9 августа 2006 г.)

Дата введения 1 сентября 2006 г.

1. Область применения

Методические указания по определению концентрации алифатических альдегидов и ацетона в крови предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием альдегидов и ацетона в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 "ГСОЕИ. Методики выполнения измерений", ГОСТ Р 1.5-92 "ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов".

Методика выполнения измерений обеспечивает определение альдегидов в крови в диапазоне концентраций 0,001-0,100 , ацетона - 0,01-2,00 мкг/ с погрешностью, не превышающей 26,5% - для формальдегида, 14,2% - для ацетальдегида, 21,7% - для ацетона, 24,3% - для пропионового альдегида, 23,8% - для масляного альдегида, при доверительной вероятности Р = 0,95.

Формальдегид (НСНО)

Молекулярная масса 30,03

Формальдегид (муравьиный альдегид, метаналь) - бесцветный газ с резким раздражающим запахом. Температура кипения: -19,2°С, плотность: 0,8153 г/. Хорошо растворим в воде, спиртах и других полярных растворителях. При низких температурах смешивается с неполярными растворителями (толуолом, диэтиловым эфиром, этилацетатом) [5]. Обладает раздражающим, сенсибилизирующим и кожно-резорбтивным действием, оказывает гепатотропный эффект, относится к веществам, обусловливающим канцерогенную опасность [3].

Ацетальдегид (CH3CHO)

Молекулярная масса 44,05

Ацетальдегид (уксусный альдегид) - бесцветная жидкость с удушающим запахом. Температура кипения: 20,16°С, плотность: 0,778 г/. Смешивается во всех соотношениях с водой и большинством органических растворителей [1]. Оказывает наркотическое, раздражающее, мутагенное и канцерогенное действие [3].

Пропионовый альдегид (CH3CH2CHO)

Молекулярная масса 58,08

Пропионовый альдегид (пропаналь) - бесцветная жидкость с характерным запахом. Температура кипения: 48,8°С, плотность: 0,8058 г/. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями [4]. Оказывает наркотическое действие, вызывает изменения со стороны дыхательной системы, паренхиматозных органов, угнетает гемопоэз [3].

Масляный альдегид (CH3(CH2)2CHO)

Молекулярная масса 72,11

Масляный альдегид (бутаналь) - бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом. Температура кипения: 75,7°С, плотность: 0,817 [2]. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями. Оказывает наркотическое, раздражающее и кожно-резорбтивное действие [3].

Ацетон (CH3COCH3)

Молекулярная масса 58,08

Ацетон (диметилкетон) - летучая бесцветная жидкость с характерным запахом. Температура кипения: 56,1°С, плотность: 0,792 г/[1]. Смешивается с водой и органическими растворителями (эфиром, хлороформом, бензолом, четыреххлористым углеродом). Обладает наркотическим и кожно-резорбтивным действием, угнетает репродуктивную функцию. Преимущественно действует на центральную нервную систему [3].

2. Сущность метода

Методика основана на предварительном переводе альдегидов и ацетона в производные 2,4-динитрофенилгидразина, концентрировании продуктов дериватизации из биологического материала экстракцией гексаном, высушивании гексанового экстракта, растворении высушенного остатка в ацетонитриле и анализе на жидкостном хроматографе.

Измерение концентрации альдегидов и ацетона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.

Измерению не мешают спирты, органические кислоты, кетоны и другие альдегиды.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, растворы и реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы:

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф "Милихром-4" с ультрафиолетовым детектором
Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические	ГОСТ 24104-01
Гири Г2-210	ГОСТ 7328-01
Термометр стеклянный	ГОСТ 28498-90
Микрошприцы МШ-10	ТУ 2.833.106-00
Цилиндр мерный, вместимостью 50 см3	ГОСТ 1770-74
Пипетки градуированные, вместимостью 1,2,5 см3	ГОСТ 29227-91
Колбы мерные, вместимостью 5, 100, 200, 500 и 1000 см3	ГОСТ 1770-74
Редуктор кислородный	ТУ 26-05-236-73
Стандартные образцы:
Формальдегид в воде с концентрацией 1,0 мг/см3	ГСО 7347-96

3.2. Вспомогательные устройства

Колонка металлическая длиной 8 см и внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом Диасорб С16 зернением 5-6-7 мкм
Центрифуга ЦЛМН-Р10-01-"Элекон"	ТУ 9443-001-245.23530-97
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79
Сушильный шкаф ШСС-80 П УХЛ 4.2	ТУ 16.531.743-83
Дефлегматор длиной 300 мм	ГОСТ 25336-82
Холодильник шариковый ХШ-300 (6 шар.)	ГОСТ 1770-74
Холодильник прямой ХПТ-3-300	ГОСТ 1770-74
Воронка Шотта (пор 16)	ГОСТ 25336-82
Воронки делительные, вместимостью 250 см3	ГОСТ 23932-90
Бюксы СВ 19/9	ТУ 92-891.029-91
Пробирки центрифужные пропиленовые с завинчивающейся крышкой, вместимостью 15 см3, пр-во "Sarstedt" (Германия) Колбы для перегонки круглодонные, вместимостью 1,0; 2,0 дм3	ГОСТ 8682-93
Стакан термостойкий, вместимостью 2 дм3	ГОСТ 23932-90

3.3. Реактивы

Гексан для хроматографии, осч	ТУ 6-09-4521-77
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, осч	ТУ 6-09-14-2167-84
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Ацетальдегид, чда	ТУ 6-09-3844-74
Пропионовый альдегид, чда	ТУ 6-09-08-1637-83
Масляный альдегид, чда	ТУ 6-09-08-1885-86
Ацетон, осч (чистота не менее 99,75)	ТУ 2633-039-44493179-00
2,4-Динитрофенилгидразин (2,4-ДНФГ), ч	ТУ 6-09-2394-77
2,4-Динитрофенилгидразон формальдегида, перекристаллизованный из очищенного этанола, чистота не менее 99,0 %
2,4-Динитрофенилгидразон ацетальдегида, перекристаллизованный из очищенного этанола, чистота не менее 99,0 %
2,4-Динитрофенилгидразон пропионового альдегида, перекристаллизованный из очищенного этанола, чистота не менее 99,0 %
2,4-Динитрофенилгидразон масляного альдегида перекристаллизованный из очищенного этанола, чистота не менее 99,0 %
2,4-Динитрофенилгидразон ацетона, перекристаллизованный из очищенного этанола, чистота не менее 99,0%
Кислота хлористоводородная (плотность 1,19), хч	ГОСТ 3118-77
Перманганат калия, ч	ГОСТ 20490-75
Спирт этиловый, очищенный от альдегидов и кетонов кипячением с 2,4-динитрофенилгидразином, перегнанный	ГОСТ Р 51652-00
Калий двухромовокислый, чда	ГОСТ 4220-75
Серная кислота	ГОСТ 4204-77
Кислота уксусная, хч	ГОСТ 61-75
Диэтиламин, ч, перегнанный для хроматографии	ТУ 6-09-68-89
Раствор гепарина в ампулах (5 000 ед. в 1 см3)

3.4. Материалы

Гелий газообразный

ТУ 51-940-80

3.5. Растворы

Хромовая смесь

Элюент для хроматографии

2 М водный раствор хлористоводородной кислоты

0,2 %-й раствор 2,4-динитрофенилгидразина в

2М хлористоводородной кислоте

Исходный раствор альдегидов для калибровки

Исходный раствор ацетона для калибровки

Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования, химреактивов и материалов по метрологическим и техническим характеристикам не уступающих перечисленным.

4. Требования к безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности по ГОСТ 12.1.007-88 и 12.1.005-88.

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Вместо "ГОСТ 12.1.007-88" имеется в виду "ГОСТ 12.1.007-76"

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79, противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и меры безопасности, указанные в "Руководстве по правилам эксплуатации прибора".

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

6.1. При подготовке проб к анализу и приготовлении растворов соблюдают следующие условия:

- температура воздуха 15-25°С;

- атмосферное давление 630-800 мм рт. ст.;

- влажность воздуха не более 80% при температуре 25°С.

6.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией по прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды и растворителей, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка посуды

Используемую посуду замочить на 1 ч в хромовой смеси, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и просушить при температуре 120°С.

7.2. Подготовка растворителей

7.2.1. Очистка ацетонитрила от примесей. В колбу вместимостью 2 помещают 1 ацетонитрила и 20 г , кипятят с шариковым холодильником в течение 1 ч, затем перегоняют с дефлегматором при температуре 81,6°С, отбирая фракции по 200 . Когда в колбе останется около 200 продукта, перегонку прекращают. Остаток можно смешивать с новой порцией растворителя. Первую фракцию (200 ) отбрасывают, а остальные проверяют на поглощение в УФ-области (оптическая плотность при 200 нм не должна превышать 0,05 о.е./см).

7.2.2. Очистка диэтиламина от примесей. В колбу вместимостью 1,0 помещают 0,5 диэтиламина и перегоняют с прямым холодильником. Первые и последние порции (50 ) отбрасывают, оставляют среднюю порцию. Перегнанный раствор должен быть бесцветным.

7.2.3. Очистка этилового спирта от альдегидов и кетонов. К 1 96%-го спирта добавляют 2 г 2,4-динитрофенилгидразина, 0,5 концентрированной хлористоводородной кислоты и кипятят с шариковым холодильником 1 ч. Перегоняют с дефлегматором в приборе со стеклянными шлифами, отбрасывая первые и последние 100 , после этого отгоняют вторично.

7.3. Приготовление растворов

7.3.1. Хромовая смесь. В термостойкий стакан вместимостью 2  насыпают 50 г хромовокислого калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1  концентрированной серной кислоты.

7.3.2. Элюент для хроматографии. 60 ацетонитрила смешивают с 40 дистиллированной воды. Подвижную фазу фильтруют через воронку Шотта (пор 16) и дегазируют барботированием гелия в течение 5 мин со скоростью 50-60 /мин. Затем добавляют 2,5 % уксусной кислоты и 1 % диэтиламина (объемных %).

7.3.3. Хлористоводородная кислота, 2 . В мерную колбу вместимостью 1 дм3, наполненную до половины объема дистиллированной водой, прибавляют 61,0 концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19 г/), доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.4. 2,4-Динитрофенилгидразин, 0,2%-й раствор в 2М хлористоводородной кислоте. В мерную колбу на 100 вносят 0,2 г 2,4-динитрофенилгидразина и доводят до метки 2М раствором хлористоводородной кислоты.

7.3.5. Исходный раствор альдегидов для калибровки (раствор А). В мерную колбу объемом 500 , содержащую дистиллированную воду, в которую предварительно добавляют 5 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина, переносят 4 ГСО формальдегида с концентрацией 1,0 мг/ (4,0 мг), 5,0 (3,9 мг) ацетальдегида, 5,0 (4,03 мг) пропионового альдегида, 5,0 (4,08 мг) масляного альдегида и доводят водой до метки. Стандартные растворы готовят с предварительным охлаждением альдегидов и дистиллированной воды. Срок хранения - 8 ч. Содержание альдегидов в растворе А составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества): формальдегида - 8,0 мкг/; ацетальдегида - 7,8 мкг/; пропионового альдегида - 8,1 мкг/; масляного альдегида - 8,2 мкг/.

Исходный раствор ацетона для калибровки (раствор В). В мерную колбу объемом 200 , содержащую дистиллированную воду, в которую предварительно добавляют 5 0,2 %-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина, переносят 5,0 (3,96 мг) ацетона и доводят водой до метки. Срок хранения раствора - 8 ч. Содержание ацетона в растворе В составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества) 19,8 мкг/.

7.3.6. Получение 2,4-динитрофенилгидразонов формальдегида, ацетальдегида, пропионового и масляного альдегидов и ацетона (используются для идентификации гидразонов альдегидов и ацетона в анализируемых пробах). Эквимолярные количества 2,4-ДНФГ и анализируемого вещества кипятят в очищенном от альдегидов и кетонов этаноле в течение 1 ч в присутствии каталитических количеств хлористоводородной кислоты. Выпавший в осадок 2,4-динитрофенилгидразон соответствующего альдегида (ацетона) отфильтровывают и gерекристаллизовывают из этанола до постоянной температуры плавления.

7.4. Подготовка хроматографической колонки

Колонку устанавливают на хроматограф и подают элюирующую жидкость, подготовленную в соответствии с п. 7.3.2, со скоростью 100 /мин до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора.

7.5. Установление градуированной характеристики

7.5.1. Строят две зависимости площади хроматографического пика от концентрации альдегидов и ацетона в крови в диапазонах 0,001-0,010 мкг/ и 0,01-0,10 мкг/ - для альдегидов, 0,01-0,10 мкг/ и 0,1-2,0 мкг/ - для ацетона. Градуировочные характеристики устанавливают по пяти сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из пяти растворов, готовят из растворов А и В.

7.5.2. Для приготовления градуировочных смесей отбирается проба крови объемом не менее 60 . В соответствии с п. 8 проводят анализ пробы крови на содержание альдегидов и ацетона. При наличии анализируемых веществ в холостой пробе вычитают их фоновое содержание при построении калибровки.

7.5.3. Градуировочные растворы готовят в мерных колбах объемом 5 . Для этого в каждую колбу вносят растворы А и В в соответствии с табл. 1 и 2, прибавляют 0,05 раствора гепарина, доводят объем до метки цельной кровью и перемешивают. Анализируют свежеприготовленные растворы.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении в крови альдегидов в диапазоне концентраций 0,001-0,010 мкг/ и ацетона в диапазоне концентраций 0,01-0,10 мкг/

Номер раствора	1	2	3	4	5
Объем раствора А, мм3	0,6	1,2	2,5	4,5	6,5
Массовая концентрация формальдегида, мкг/см3	0,001	0,002	0,004	0,007	0,010
Массовая концентрация ацетальдегида, мкг/см3	0,001	0,002	0,004	0,007	0,010
Массовая концентрация пропионового альдегида, мкг/см3	0,001	0,002	0,004	0,007	0,010
Массовая концентрация масляного альдегида, мкг/см3	0,001	0,002	0,004	0,007	0,010
Объем раствора В, мм3	2,5	5,0	10,0	17,5	25,0
Массовая концентрация ацетона, мкг/см3	0,01	0,02	0,04	0,07	0,10

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении в крови альдегидов в диапазоне концентраций 0,01-0,10 мкг/ и ацетона в диапазоне концентраций 0,1-2,0 мкг/

Номер раствора	1	2	3	4	5
Объем раствора А, мм3	6,0	12,5	25,0	44,0	63,0
Массовая концентрация формальдегида, мкг/см3	0,01	0,02	0,04	0,07	0,10
Массовая концентрация ацетальдегида, мкг/см3	0,01	0,02	0,04	0,07	0,10
Массовая концентрация пропионового альдегида, кг/см3	0,01	0,02	0,04	0,07	0,10
Массовая концентрация масляного альдегида, мкг/см3	0,01	0,02	0,04	0,07	0,10
Объем раствора В, мм3	25,0	125,0	250,0	375	500
Массовая концентрация ацетона, мкг/см3	0,10	0,5	1,0	1,48	1,98

В делительную воронку помещают 2,0 градуировочного раствора, разводят дистиллированной водой до объема 40 , добавляют 2,0 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2М хлористоводородной кислоте, 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты, 5 гексана и экстрагируют 15 мин. После расслоения жидкостей верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин со скоростью 1500 об./мин, затем 2 гексана переносят в бюксу и высушивают в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0,4 элюента и анализируют аликвотную часть (10 ) в условиях:

элюент - (ацетонитрил : вода = 60 : 40) + 2,5% уксусной кислоты + 1% диэтиламина;

колонка 80 х 2 мм, заполнена Диасорбом С_16 скорость движения элюента	100 мм3/мин;
длина волны УФ-детектора	358 нм;
время удерживания:
2,4-динитрофенилгидразона формальдегида	3,10 мин;
2,4-динитрофенилгидразона ацетальдегида	3,95 мин;
2,4-динитрофенилгидразона ацетона	4,70 мин;
2,4-динитрофенилгидразона пропионового альдегида	5,04 мин;
2,4-динитрофенилгидразона масляного альдегида	7,95 мин.

Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:

, где

- концентрация вещества в градуировочной смеси, мкг/;

- среднее значение пяти измерений площади пика i-й концентрации, единицы оптической плотности (е.о.п.);

n - количество градуировочных смесей (n = 5).

7.6. Отбор проб

Отбор проб венозной крови в объеме не менее 4 проводят в чистую пробирку с притертой пробкой, в которую предварительно добавлено 0,1 раствора гепарина. Срок хранения пробы в холодильнике - 2 дня.

8. Выполнение измерений

Выполняют два параллельных измерения образца крови. В делительную воронку помещают 2,0 крови, разбавляют дистиллированной водой до объема 40 , добавляют по 2,0 0,2%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2М хлористоводородной кислоте, 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты, 5 гексана и экстрагируют 15 мин. После отстаивания верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин со скоростью 1500 об./мин. После расслоения жидкостей 2 гексанового экстракта переносят в бюксу и высушивают в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0,4 элюента, вводят в хроматограф аликвотную часть (10 ) и анализируют в условиях, указанных в п. 7.5.

Идентификацию хроматографических пиков 2,4-динитрофенилгидразонов формальдегида, ацетальдегида, пропионового и масляного альдегидов и ацетона проводят путем сравнения времен удерживания хроматографических пиков в анализируемой пробе и в растворах 2,4-динитрофенилгидразонов альдегидов и ацетона, полученных согласно п. 7.3.6.

9. Вычисление результатов измерения

Концентрацию альдегидов и ацетона в крови (мкг/) вычисляют по формуле:

, где

X - концентрация вещества в анализируемой пробе, мкг/;

- площадь пика соответствующего 2,4-динитрофенилгидразона альдегида (или ацетона) на хроматограмме, е.о.п.;

К - градуировочный коэффициент.

За результат измерения принимают среднее арифметическое значение двух параллельных измерений , расхождение между которыми не должно превышать значения предела повторяемости (табл. 3).

Результат измерения представляют в виде мкг/, где

- характеристика погрешности, мкг/, при Р = 0,95 равная:

, где

- относительное значение характеристики погрешности, %.

10. Внутренний контроль качества результатов измерений

Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость, внутрилабораторная прецизионность (воспроизводимость), точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве результатов измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом МИ 2335-2003 "ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с нормативами, не превышающими значений, приведенных в табл. 3 и 4.

Таблица 3

Значения пределов повторяемости и воспроизводимости при доверительной вероятности Р = 0,95

Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/см3	Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), r , % n	Предел внутрилабораторной воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории, но в разных условиях), R , % - X i
Формальдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	26,9	28,1
Ацетальдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	21,2	24,8
Пропионовый альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	25,5	27,4
Масляный альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	25,1	26,2
Ацетон, от 0,01 до 2,000 вкл.	25,6	28,3

Таблица 4

Диапазон измерений, значения показателей точности, повторяемости, воспроизводимости

Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мг/дм3 (мкг/см3)	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сигма_r, %	Показатель воспроизводимости (относительное средне-квадратическое отклонение воспроизводимости), сигма_R, %	Показатель точности (границы относительной погрешности при вероятности Р = 0,95), +-дельта, %
Формальдегид, от 0,001 до 2,000 вкл.	11,9	12,7	26,5
Ацетальдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	7,7	10,2	14,2
Пропионовый альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	11,3	13,5	24,3
Масляный альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл.	10,8	12,7	23,8
Ацетон, от 0,01 до 2,00 вкл.	8,1	10,4	21,7

10.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал в анализируемой серии измерений. Определяют содержание исследуемых соединений в градуировочных растворах, которые соответствуют началу, середине и концу диапазона измерений. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданными и измеренными значениями концентраций не превышает 5%.

10.2. Контроль повторяемости

Относительное расхождение между результатами двух измерений, выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении образцов одной и той же рабочей пробы, с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов в течение возможно минимального интервала времени, не должно превышать значения предела повторяемости (табл. 3).

Повторяемость результатов параллельных определений признают удовлетворительной, если выполняется условие:

, где

- значение предела повторяемости, %;

, - максимальный и минимальный результаты двух параллельных измерений содержания i-го вещества, мкг/.

Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.3. Контроль воспроизводимости

Внутренний контроль качества воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы. Пробу делят на две равные части и анализируют в соответствии с методикой, максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разное время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и т. д.). Воспроизводимость результатов контрольных измерений признают удовлетворительной, если выполняется условие:

, где

- средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, мкг/;

- средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, полученный в других условиях, мкг/.

- значение предела внутрилабораторной воспроизводимости, % (табл. 3).

Расхождение между результатами измерений и , полученных в разных условиях, не должно превышать значений показателя воспроизводимости при доверительной вероятности Р = 0,95, указанных в табл. 3.

Если условие не выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.4. Контроль точности

Контроль точности с использованием метода добавок состоит в сравнении результата контрольной процедуры, равного разности между результатом контрольного измерения содержания определяемого компонента в пробе с известной добавкой () в рабочей пробе без добавки () и величиной добавки (добавка должна составлять не менее 40% от содержания анализируемого компонента в рабочей пробе) с нормативом точности К. Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

, где

- средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе с известной добавкой из 2-х параллельных измерений, мкг/;

- средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений, мкг/;

- величина добавки к пробе, мкг/.

Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия: .

При превышении норматива контроля точности эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, устраняют их.

Периодичность контроля воспроизводимости и точности регламентируется в руководстве по качеству лаборатории.

Литература:

1. Химическая энциклопедия /Под ред. И.Л. Кнунянц. М.: "Советская энциклопедия", 1988. Т. 1.

2. Химическая энциклопедия /Под ред. И.Л. Кнунянц. М.: "Советская энциклопедия", 1990. Т. 2.

3. Филов В.А., Тиунов Л.А. Вредные химические вещества. Галоген- и кислородсодержащие органические соединения: Справочник. С.-Пб.: "Химия", 1994.

4. Химическая энциклопедия /Под ред. Н.С. Зефирова. М.: "Большая российская энциклопедия", 1995. Т. 4.

5. Химическая энциклопедия /Под ред. Н.С. Зефирова. М.: "Большая российская энциклопедия", 1999. Т. 5.