Приложение В. Специальные требования к контрольным материалам (сывороткам)

Приложение В
(справочное)

Специальные требования
к контрольным материалам (сывороткам)

В.1 Требования к сведениям о приготовлении сыворотки

При проведении как внутрилабораторного контроля качества, так и внешней оценки качества клинических лабораторных исследований различного вида, применяют контрольные сыворотки. Их свойства в значительной мере зависят от условий изготовления.

а) Процедуры образования пула сыворотки (характеристика контингента доноров сыворотки: пол, возраст; концентрации аналитов, метод).

б) Добавки (консерванты, стабилизаторы, ионы).

Полная открытость в отношении всех буферных растворов и добавок обязательна.

в) Добавление ферментов, гормонов, лекарств, липопротеинов человеческого, животного или синтетического происхождения (метод, использованные материалы, сольвенты, концентрации аналитов). Важно, чтобы концентрации аналитов были клинически значимыми, и если приводятся целевые значения, должна быть дана полная информация о методе определения и статистической обработке данных.

г) Фильтрация (процедура, использованные материалы, влияния на концентрации аналитов).

д) Замораживание (скорость и окончательная температура).

е) Аликвотирование или распределение по флаконам (метод, объем, процедуры, запечатывание).

ж) Лиофилизация (метод, объем).

з) Хранение и транспорт.

В.2 Спецификации по физическим характеристикам

а) рН.

б) Стабильность.

в) Мутность/абсорбция на определенной длине волны.

г) Осмолярность/вязкость/плотность.

д) Стабильность, оцененная по ускоренной деградации.

е) Минимальное микробное загрязнение.

ж) Отсутствие денатурации ферментов или белков.

з) Допустимая межфлаконная вариация для каждого аналита.

и) Оптимальная остаточная вода.

к) Приемлемые характеристики восстановления (отсутствие хлопьев) и стабильность после восстановления.

В.3 Требования к материалам для контроля воспроизводимости

Рекомендуются мультикомпонентные материалы с концентрациями, близкими к порогам решений, где коэффициенты вариации сравнимы с наблюдаемыми при исследованиях проб пациентов.

а) Состав

Спектр величин в сыворотке

Матрица (человеческая или животная)

Для некоторых аналитов (иммуноглобулины, липопротеины, липопротеины высокой плотности) необходима только человеческая матрица

Отсутствие интерферентов по отношению к используемым методам

Приемлемая мутность (референтные величины: NIST SRM 909)

рН 7,0-8,0

Короткий период восстановления (< 30 мин)

Отсутствие инфекционного загрязнения (человеческий материал должен быть протестирован на вирусы гепатитов А, В, С и ВИЧ I/II)

Свободный глицерин < 0,5 ммоль/л (материал для клинической химии)

Никель < 600 нмоль/л (материал для клинической химии)

Цитрат < 0,1 ммоль/л

Отсутствие добавленного метиолата (для контроля иммуноисследований)

Осмоляльность 270-300 ммоль/кг; интервал осмоляльности < 30 ммоль/кг

б) Гомогенность

Низкая межфлаконная вариация (CV < 0,5%) (для некоторых аналитов требования могут быть более жесткими, например, для натрия < 0,2%)

Низкое содержание воды (остаточная влажность = 1%)

в) Стабильность

Длительная стабильность при 2-8°С: > 2 лет

Приемлемая стабильность после восстановления (= 8 ч)

Низкая бактериальная загрязненность (< 10000 кое*/л)

Добавки должны быть указаны изготовителем или конфиденциально сообщены им организатору контроля качества

г) Точная инструкция по восстановлению, использованию и хранению материалов, разработанная изготовителем.

В.4 Требования к материалам для контроля правильности

Свойства должны быть по возможности ближе к свежей человеческой сыворотке с концентрациями аналитов в нормальной и патологической области. Отношение результатов при исследовании контрольного материала рутинным методом/ референтным методом должно быть сравнимо с отношением результатов при исследовании этими методами проб пациентов

Свежая или замороженная, прозрачная, негемолизированная, натуральная человеческая сыворотка с добавлением аналитов, идентичных с натуральными аналитами. Целевые значения по возможности должны быть определены абсолютными методами.

Лиофилизированные пробы

а) Состав

Охватывает указанную группу аналитов

Человеческая матрица

Отсутствие хромогенных веществ, интерферирующих с используемыми методами

Отсутствие хромогенных интерферентов для колориметрических методов

Глицерин < 0,5 ммоль/л (материалы для клинической химии)

Никель < 600 нмоль/л (материалы для клинической химии)

Азот аммиака < 120 ммоль/л (немедленно после восстановления)

Пиридоксаль фосфат < 100 ммоль/л

Цитрат < 0,1 ммоль/л

Приемлемая мутность (референтная величина: NIST SRM 909)

Осмоляльность 270 - 300 мОсмоль/кг; интервал осмоляльности < 30 мОсмоль/кг

рН 7,2-7,8 (немедленно после восстановления)

Короткое время восстановления (< 30 мин)

Отсутствие инфицированности (человеческие материалы должны быть тестированы на HAV, HBV, HCV, HIV I/II)

Вязкость близка к свойствам свежей человеческой сыворотки (1,70-1,92 мПа при 20°С)

Отсутствие добавленного мертиолята (материалы для иммуноанализа)

б) Гомогенность

Минимальная межфлаконная вариация (CV < 0,5%). (Для некоторых аналитов требования могут быть жестче, например, для натрия < 0,2%)

Минимальное содержание воды (остаточная влажность = 1%)

в) Стабильность

Приемлемая долговременная стабильность > 12 мес

Приемлемая стабильность после восстановления (= 4 ч)

Нет реактивации ферментов

Отсутствие интерферирующих протеаз

Низкая бактериальная обсемененность (< 10000 кое/л)

Добавки должны быть указаны изготовителем (или сообщены им потребителю)

Точные инструкции по восстановлению, использованию и хранению материалов должны быть разработаны изготовителем

г) Целевые значения

Значения, полученные референтным методом или избранным методом после определения коммутабельности контрольного материала

Коммутабельный контрольный материал ведет себя во всех видах исследований, в том числе и в исследованиях референтными методами, подобно нативной человеческой сыворотке. Вариация результатов, полученных при исследовании контрольного материала различными методами, подобна или находится в точно определенном взаимоотношении с результатами, получаемыми при исследованиях этими методами человеческой сыворотки.

______________________________

* кое - колониеобразующие единицы.