ВГС-Экспресс (Диагностикум гепатита C)

Торговое название: ВГС-Экспресс (VHC-Express)

Международное название: Диагностикум гепатита C&

Фармакологическая группа: МИБП-диагностикум

Фармакологическая группа по АТХ: V04CX. Другие диагностические средства

Состав:

Тест-система "ВГС-Экспресс" представляет собой набор реагентов для качественного экспресс-выявления антител к вирусу гепатита С (ВГС) в крови, сыворотке и плазме человека методом дот-анализа.

Основным компонентом тест-системы является иммуносорбент - рекомбинантные антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3, NS4, NS5) областями генома ВГС, иммобилизированные в виде пятна (дота) на нитроцеллюлозной мембране.

Состав набора:

- иммуносорбент - рекомбинантные антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной и неструктурной областью генома ВГС, иммобилизованные на полоске нитроцеллюлозной мембраны (15х15 мм), упакованной вместе с пористой подложкой в пластмассовую кассету диаметром 45 мм; в центре круглого отверстия кассеты видна зона сорбции антигенов в виде пятна (дота) диаметром 3 мм;

- положительный контрольный образец (К+), лиофилизированный - сыворотка крови человека, содержащая антитела к ВГС, инактивированная прогреванием - аморфный гигроскопичный порошок белого или желтоватого цвета, используется для приготовления растворов положительных контрольных образцов К+ и К+слаб.;

- отрицательный контрольный образец (К-), лиофилизированный - сыворотка здоровых доноров, не содержащая антитела к ВГС, инактивированная прогреванием - аморфный гигроскопичный порошок белого или желтоватого цвета;

- конъюгат - белок А золотистого стафилококка, иммобилизованный на частицах коллоидного золота (иммунозолотой конъюгат) - вязкая жидкость темно-красного цвета;

- отмывающий раствор (ОР) - прозрачная бесцветная жидкость;

- раствор для разведения сывороток (РРС) - бесцветная или желтоватая опалесцирующая жидкость.

Один набор рассчитан на проведение 22 анализов, включая контрольные.

Показания к применению:

Тест-система "ВГС-Экспресс" предназначена для экспресс-выявления антител к вирусу гепатита С в крови, сыворотке и плазме человека

Методы применения и принцип действия:

Исследуемый образец наносят на поверхность иммуносорбента. При протекании сыворотки (плазмы) сквозь мембрану происходит взаимодействие содержащихся в ней антител с иммобилизированными антигенами. В зоне иммобилизации антигенов образуются иммунные комплексы, которые затем выявляют с помощью реакции связывания антител с иммунозолотым конъюгатом. Последний представляет собой частицы коллоидного золота, на поверхности которых сорбирован белок A Staphylococcus aureus.

В результате образцы, содержащие антитела, специфические к ВГС, дают на мембране окрашенное в красный цвет пятно (дот) диаметром от 3 до 4 мм. Образцы, не содержащие специфических реагирующих антител, не дают такого окрашивания.

Набор полностью биологически безопасен, однако следует соблюдать меры предосторожности, принятые при работе с потенциально инфекционным материалом. Все использованные материалы необходимо подвергать обработке дезинфицирующим раствором (например, 6% раствором перикиси водорода или 3% раствором хлорамина не менее 18 ч.) Работы выполнять в резиновых перчатках.

Для анализа необходимо использовать свежеприготовленные образцы крови, сыворотки или плазмы человека. Допускается хранение образцов сыворотки или плазмы при температуре 2-8 град. С не более суток или при температуре минус 20 град. С не более 1 месяца. Не допускается повторное замораживание образцов. Не рекомендуется использовать образцы с повышенным содержанием липидов или гемолизированные так как они могут давать ложнопозитивные результаты или высокий фон окрашивания.

При проведении анализа необходимо соблюдать следующие правила:

1. Перед использованием все компоненты тест-системы выдержать при комнатной температуре 30 минут.

2. Не смешивать реактивы из разных серий наборов.

3. Для отбора исследуемых проб и компонентов тест-системы использовать автоматические пипетки со сменными наконечниками с погрешностью измерения объемов не более 5%.

1.Приготовление растворов и реагентов для анализа

1.1.Контрольные образцы

1.1.1. Для подготовки отрицательного контрольного образца (К-) во флакон "К-" добавляют 0,1 мл ОР и растворяют лиофилизат путем встряхивания.

Хранение: Раствор К- хранят до 2 часов при температуре от 18 до 25 град. С.

1.1.2. Для подготовки положитьельного контрольного образца (К+) во флакон "К+" добавляют 0,1 мл ОР и растворяют лиофилизат путем встряхивания.

Хранение: Раствор К+ хранят до 2 часов при температуре от 18 до 25 град. С.

1.1.3. Для приготовления слабоположительного контрольного образца (К+слаб.) в один флакон "К+" добавляют подобранное производителем для каждой серии наборов и указанное в инструкции количество ОР и растворяют лиофилизат путем встряхивания.

Хранение: Раствор К+слаб. хранят до 2 часов при температуре от 18 до 25 град. С.

1.2. Исследуемые сыворотки

Раствор для разведения сывороток (во флаконе "РРС") предварительно перемешивают. Затем к 20 мкл каждой исследуемой сыворотки добавляют по 10 мкл РРС, полученные смеси также перемешивают и выдерживают 5 минут при температуре от 18 до 25 град. С.

Хранение разведенных сывороток - до 2 часов при температуре от 18 до 25 град. С.

1.3. Рабочий раствор конъюгата

Внимание! При разведении конъюгата использовать только новые пластиковые пробирки и наконечники для автоматических пипеток, так как рабочий раствор конъюгата теряет активность при попадании в него следов детергента или сыворотки. Из-за повышенной вязкости исходного раствора во флаконе "Конъюгат", его следует набирать в пипетку медленно и затем удалить избыток раствора с внешней поверхности наконечника, касаясь стенки флакона изнутри.

Рабочий раствор конъюгата готовят следующим образом:

- при использовании набора целиком: во флакон "Конъюгат" добавляют 240 мкл ОР и перемешивают;

- при дробном использовании набора необходимое количество рабочего раствора конъюгата готовят в соответствии с таблицей 1.

Таблица 1. Приготовление рабочего раствора конъюгата в зависимости от количества анализов.

2 кассеты: 10 мкл конъюгата и 20 мкл ОР

3 кассеты: 15 мкл конъюгата и 30 мкл ОР

4 кассеты: 20 мкл конъюгата и 40 мкл ОР

5 кассет: 25 мкл конъюгата и 50 мкл ОР

6 кассет: 30 мкл конъюгата и 60 мкл ОР

7 кассет: 35 мкл конъюгата и 70 мкл ОР

8 кассет: 40 мкл конъюгата и 80 мкл ОР

9 кассет: 45 мкл конъюгата и 90 мкл ОР

10 кассет: 50 мкл конъюгата и 100 мкл ОР

11 кассет: 55 мкл конъюгата и 110 мкл ОР

Хранение рабочего раствора конъюгата - до 1 часа при температуре от 18 до 25 град. С.

2.Проведение дот-анализа

Внимание: В случае дробного использования набора положительный и отрицательный контроли тестируют только при первичном применении данного набора, а слабоположительный тестируют каждый раз при проведении анализов на данном наборе.

Подготовленные растворы контрольных и исследуемых образцов и рабочий раствор конъюгата наносят каждый раз на соответствующим образом промаркированную отдельную пластиковую кассету, в точку на иммуносорбенте, которая видна в центре около окна кассеты, причем каждое следующее нанесение проводят только после того, как прежде нанесенная жидкость полностью впиталась. Перерыв между отдельными операциями не должен превышать 2 минуты.

2.1.Из пакета извлекают необходимое для анализа число кассет.

2.2. Все кассеты маркируют, отмечая контроли.

2.3. Внесение отмывающего раствора

В окно каждой кассеты вносят из флакона-капельницы по 2 капли (100 мкл) ОР. Дают раствору полностью впитаться в иммуносорбент.

2.4. Внесение контрольных образцов и сывороток

В помеченное точкой место в центре пятна с помощью пипетки наносят 3 раза по 5 мкл контрольного образца (см. п. 1.1.) или исследуемой сыворотки (см. п. 1.2.). Каждое следующее нанесение производят только после полного впитывания прежде нанесенной жидкости.

2.5. Промывание

Промывают иммуносорбент, добавляя в отверстие каждой кассеты по 4 капли (200 мкл) ОР. Дают раствору полностью впитаться в иммуносорбент.

2.6. Внесение рабочего раствора конъюгата

Пипеткой наносят 3 раза по 5 мкл рабочего раствора конъюгата. Каждое следующее нанесение производят только после полного впитывания прежде нанесенной жидкости.

2.7. Промывание

Промывают иммуносорбент, добавляя в отверстие каждой кассеты по 4 капли (200 мкл) ОР. Дают раствору полностью впитаться в иммуносорбент.

3.Учет результатов.

Учет проводят визуально в течение 10 минут после окончания анализа.

Результаты исследования учитывают, если К+ проявляет на поверхности иммуносорбента четкое красное пятно диаметром до 5 мм, К+слаб. - четкое розовое пятно такого же размера, а К- не дает такого пятна. В области контакта сыворотки (плазмы) с иммуносорбентом допускается фоновое окрашивание в виде размытого бледно-розового пятна диаметром более 6 мм.

Положительной, то есть, содержащей антитела к ВГС, следует считать сыворотку, дающую четкое пятно диаметром до 5 мм, окрашенное не менее интенсивно, чем слабоположительный контрольный образец.

При получении положительного результата анализа этой же сыворотки (плазмы) следует повторить. Если и в этом случае будет получен положительный результат, сыворотка должна исследоваться другими методами.

Срок годности:

Срок годности тест-системы - 4 месяца.

Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит.

Условия хранения:

Набор хранят в соответствии с СП 3.3.3.1248-03 в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 град. С. Замораживание не допускается.

Набор транспортируют в соответствии с СП 3.3.3.1248-03. Транспортирование осуществляют всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 8 град. С; допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 град. С не более 3 суток. Замораживание не допускается.

Дата актуализации инструкции 11.10.2005

Производитель: Вектор-Бест ЗАО, Россия

Владелец регистрационного удостоверения: Вектор-Бест ЗАО, Россия

Формы выпуска: набор диагностический многокомпонентный, упаковки комбинированные

Условия отпуска: для лечебно-профилактических учреждений

Данные гос. регистрации: Р N003469/01 от 31.05.2004

Состояние регистрационного удостоверения: дата аннулирования 28.08.2009

Номер фармстатьи: ФСП 42-0117-4888-03