Кандида-IgG-стрип

Торговое название: Кандида-IgG-стрип (Candid-IgG-strip)

Фармакологическая группа: МИБП-диагностикум

Фармакологическая группа по АТХ: V04CX. Другие диагностические средства

Состав:

СОСТАВ НАБОРА

планшет разборный с иммобилизоанными антигенами Candida albicans - 1 шт.; конъюгат (белок А, меченный пероксидазой хрена) - 1 фл., 1,3 мл; положительный контрольный образец, инактивированный (К+) - 1 фл., 1,3 мл; отрицательный контрольный образец, инактивированный (К-) - 1 фл., 1,3 мл; концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (25xФСБ-Т) - 1 фл., 28 мл; субстратный буферный раствор для ТМБ - 1 фл., 13,0 мл; тетраметилбензидин (ТМБ), концентрат - 1 фл., 1 мл; стоп-реагент - 1 фл., 12,0 мл; липкая плёнка - 2 шт.

Описание:

Тест-система УКандида-IgG-стрипФ представляет собой набор реагентов для выявления антител класса IgG к грибам рода Candida. Активными компонентами тест-системы являются антигены Candida albicans, конъюгат - белок А, меченный пероксидазой хрена, положительный и отрицательный контрольные образцы. Cпособ определения антител к антигенам Candida представляет собой твердофазный иммуноферментный анализ, в ходе которого при взаимодействии исследуемых сывороток крови в лунках стрипов с иммобилизованными антигенами гриба рода Candida происходит связывание специфических антител и образование комплекса Уантиген-антителоФ на поверхности лунок. После удаления несвязавшихся компонентов и добавления в лунки планшета конъюгата с пероксидазой хрена происходит включение ферментной метки в иммунный комплекс. В результате ферментативной реакции, проведенной в лунках, отмытых от избытка конъюгата, с субстратным раствором для пероксидазы, содержащим перекись водорода и тетраметилбензидин, образуется окрашенный продукт, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации антител к антигенам Candida в анализируемом образце сыворотки. Набор расcчитан на проведение 48 определений в разведении 1:200 и нанесении образцов в дубликатах, включая контроли. При определении титра антител рекомендуется использовать двукратные разведения исследуемых сывороток от 1:200 до 1:25600. Тест-система УКандида-IgG-стрипФ укомплектована таким образом, что позволяет использовать по отдельности от 1 до 12 стрипов, что важно при небольшом количестве исследуемых сывороток.

Показания к применению:

Тест-система предназначена для выявления антител класса IgG к грибам рода Candida в сыворотке крови больных различными формами кандидоза. Тест-система может быть использована для проведения лабораторной диагностики кандидоза различной этиологии в совокупности с результатами культуральной диагностики и клиникой заболевания, а также дифференциальной диагностики смешанных инфекций, вызванных грибами Candida и бактериями.

Методы применения и принцип действия:

3. СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ Образцы крови у обследуемых лиц в количестве не менее 0,5 мл отбирают из вены или из пальца натощак. Сыворотку крови тщательно отделяют от сгустка и примеси эритроцитов. Сыворотки хранят при температуре 2-10‡С до 48 ч или замораживают при температуре минус 20‡С до 3 месяцев. Не рекомендуется оттаивание и замораживание образцов более одного раза. Следует обратить внимание на точное дозирование и тщательное перемешивание сывороток с раствором, используемым для их разведения. От соблюдения этих требований зависит точность и воспроизводимость результатов анализа. Для внесения реагентов в лунки стрипов используют пипеточные дозаторы с погрешностью измерения объёмов не более 5%, для промывания лунок планшета можно использовать ручные, автоматические промыватели, а также восьми- или двенадцатиканальные пипеточные дозаторы. Все растворы используют подогретыми до температуры (20І2)‡С. Внимание! В комплект набора входит липкая плёнка для планшета при инкубации в термостате растворов сывороток и конъюгата. При использовании одного или нескольких стрипов следует отрезать полоску плёнки нужного размера и клейкой стороной закрыть все лунки. При извлечении стрипов из термостата плёнку удалить и поместить в дезинфицирующий раствор. Липкая плёнка предназначена для одноразового использования.

3.1. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ (для проведения анализа на 1 стрипе)

3.1.1. Приготовление раствора 1 Раствор 1 используют для разведения сывороток и конъюгата, а также для промывания стрипов. Для приготовления раствора 1 необходимо 2 мл концентрата из флакона с надписью У25хФСБ-ТФ развести до 50 мл дистиллированной водой. При наличии в исходном концентрате осадка солей его необходимо подогреть при температуре (37І1)‡C до полного растворения осадка. Хранение: не более 48 часов при 2-10‡С.

3.1.2. Приготовление рабочего раствора конъюгата Для приготовления рабочего раствора конъюгата необходимо отобрать из флакона с надписью УконъюгатФ 100 мкл концентрата, добавить его к 1 мл раствора 1 и тщательно перемешать (см. таблицу). Для проведения анализа на 1 планшете готовить 10 мл рабочего раствора конъюгата. Хранение: рабочий раствор конъюгата хранению не подлежит.

3.1.3. Приготовление раствора ТМБ Готовят непосредственно перед использованием. Для этого из флакона с ТМБ отобрать аликвоту 70 мкл и добавить к 1 мл субстратного буферного раствора для ТМБ, прогретого до температуры 20-25 ‡С, тщательно перемешать. При приготовлении раствора ТМБ следует исключить воздействие света (например, обернуть флакон фольгой). Хранение: до 20 мин при температуре 18-25 ‡С в темноте. Внимание! В состав набора входят кювета и наконечники для пипетки, которые следует использовать только для работы с раствором ТМБ. Посуду и пипетки (наконечники), контактирующие с раствором ТМБ, нельзя отмывать с применением синтетических моющих средств, поскольку даже их следы ведут к неконтролируемому разложению ТМБ в ходе реакции.

3.1.4. Подготовка контрольных образцов Контрольный положительный образец (К+) используют без разведения. Для приготовления рабочего раствора контрольного отрицательного образца в отдельный чистый флакон внести 1 мл раствора 1 и добавить в него указанный на этикетке объём раствора из флакона с надписью Уотрицательный контрольный образецФ, тщательно перемешать. Хранение: разведённые контрольные образцы хранению не подлежат.

3.1.5. Подготовка исследуемых сывороток Исследуемые сыворотки разводят раствором 1 в соотношении 1:200. Для этого используют вспомогательные пробирки или лунки планшета для микротитрования (в комплект тест-системы не входит). При этом к 190 мкл раствора 1 добавить 10 мкл исходной исследуемой сыворотки (разведение 1:20 в лунках вспомогательного планшета), затем после перемешивания к 90 мкл раствора 1 добавить 10 мкл этого разведения (рабочий планшет). В результате получается разведение 1:200. Хранение: разведённые образцы сывороток хранению не подлежат.

3.2. ПРОВЕДЕНИЕ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА

3.2.1. Подготовка стрипов Стрипы закрепить в рамке. В лунки стрипов, заполняя их до краев, внести раствор 1. Стрипы выдержать 1-2 мин при температуре 18-25‡С, затем содержимое лунок слить, остатки влаги удалить, постукивая перевернутыми стрипами по фильтровальной бумаге.

3.2.2. Внесение контрольных и исследуемых образцов В лунки стрипов внести по 0,1 мл рабочих разведений контрольных образцов по следующей схеме: при использовании 1 стрипа - 1 лунка К+ и 2 лунки К- 2 стрипа и более - 2 лунки К+ и 2 лунки К- Согласно схеме в лунки стрипа, например, В-1 и С-1 внести по 100 мкл К-. В лунку А-1 - 100 мкл К+. В остальные лунки внести по 100 мкл исследуемых образцов. Н-1 использовать для контроля конъюгата (0,1 мл раствора 1). Стрипы закрыть липкой плёнкой и выдержать в течение 30 мин при температуре (37І1)‡С. Содержимое лунок удалить, лунки промыть 3 раза раствором 1 и 2 раза дистиллированной водой, добавляя в каждую лунку не менее чем 0,2 мл, остатки влаги удалить, постукивая по фильтровальной бумаге.

3.2.3. Внесение конъюгата Рабочий раствор конъюгата внести по 0,1 мл во все лунки стрипов. Стрипы закрыть липкой плёнкой и выдержать в течение 30 мин при температуре (37І1) ‡С. Содержимое лунок удалить, лунки промыть 3 раза раствором 1 и два раза дистиллированной водой, как описано в п. 3.2.2.

3.2.4. Внесение раствора ТМБ Во все лунки добавить по 100 мкл раствора ТМБ, приготовленного непосредственно перед использованием. Стрипы закрыть крышкой или фольгой и выдержать в защищённом от света месте при температуре 20-25‡С 15 мин до развития синего окрашивания субстратной смеси в лунках с К+. Ферментативную реакцию остановить, добавляя во все лунки по 100 мкл раствора стоп-реагента (при этом цвет в лунках меняется на желтый). В случае попадания на кожу раствора ТМБ или стоп-реагента необходимо немедленно смыть их водой с мылом.

4. РЕГИСТРАЦИЯ И ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ Учёт результатов проводят с помощью анализатора колориметрического иммуноферментного, регистрируя оптическую плотность (ОП) в лунках планшета при длине волны 450 нм. Оценку результатов проводят только в том случае, если средний показатель ОП контроля конъюгата не превышает значения 0,2 о.е.; ОП в лунках с контрольным отрицательным образцом (ОП К-) не превышает значения 0,3 о.е.; а ОП в лунках с контрольным положительным образцом (ОП К+) имеет значение не ниже 0,8 о.е. При скрининг-варианте исследуемую сыворотку расценивают как положительно реагирующую, если соответствующее ее разведению 1:200 значение ОП больше или равно значению ОПД, определяемому формулой: ОПД = 2,5 х ОП К-

Титром следует считать то наибольшее разведение, для которого среднее значение ОП больше ОПД. Так как ошибка метода ИФА составляет 10-15%, то если ОП исследуемой сыворотки меньше ОПД на 15%, результат следует считать сомнительным, и необходим повторный анализ вновь взятого образца сыворотки крови данного человека.

Срок годности:

6 месяцев.

Условия хранения:

Набор реагентов хранят при температуре 2-10‡С в сухом месте. Замораживание не допускается. Транспортирование осуществляется всеми видами крытого транспорта при температуре 2-10‡С. Допускается транспортирование при температуре до 25‡C не более 72 часов.

Дата актуализации инструкции 11.10.2005

Данные гос. регистрации: ЛС-000275 от 29.04.2005

Состояние регистрационного удостоверения: дата исключения 01.05.2010

Владелец регистрационного удостоверения: Вектор-Бест ЗАО, Россия

Лекарственные формы: набор диагностический многокомпонентный

Формы выпуска:

упаковки комбинированные (1) /~/ - пачки картонные

Срок годности: 6 мес

Условия хранения:

Стадии производства:

Производитель (Все стадии производства): Вектор-Бест ЗАО, Россия

Номер НД: ФСП 42-0117-4189-03, ФСП 42-0117-4189-04