Государственный стандарт Союза ССР ГОСТ 29300-92 (ИСО 3091-75) "Мясо и мясные продукты. Метод определения нитрата" (утв. постановлением Комитета стандартизации и метрологии СССР от 10 февраля 1992 г. N 128)

Meat and meat products. Determination of nitrate content

Дата введения - 1 января 1994 г.

Введен впервые

1. Назначение и область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения массовой доли нитрата в мясе и мясных продуктах.

2. Ссылки

ГОСТ 9792, ГОСТ 29299 (ИСО 2918).

3. Определение

Массовая доля нитрата в мясе и мясных продуктах - массовая доля нитрата, определенная в соответствии с методикой, установленной в данном стандарте, и выраженная в миллиграммах нитрата калия на килограмм (в частях на миллион).

4. Сущность метода

Экстрагирование пробы горячей водой, осаждение белков и фильтрование. Расщепление экстрагированного нитрата до нитрита с помощью металлического кадмия. Получение красной окраски путем добавления к фильтрату аминобензола сульфамида и N-1-на-фтилэтилендиамина дигидрохлорида и фотометрическое измерение при длине волны 538 нм.

5. Реактивы

Все реактивы должны быть аналитическими. Вода должна быть дистиллированной или иметь эквивалентную чистоту.

5.1. Цинковые стержни длиной около 15 см и диаметром 5 - 7 мм.

5.2. Растворы для осаждения белков

5.2.1. Реактив I

Растворяют в воде 106 г железосинеродистого калия и разбавляют до 1000 .

5.2.2. Реактив II

Растворяют в воде 220 г уксуснокислого цинка и 30  ледяной уксусной кислоты и разбавляют до 1000 .

5.2.3. Бура, насыщенный раствор

Растворяют 50 г тетраборнокислого натрия в теплой воде, разбавляют до 1000  и охлаждают до комнатной температуры.

5.3. Сульфат кадмия, раствор 30 .

Растворяют 37 г сульфата кадмия в воде и разбавляют до 1000 .

5.4. Соляная кислота, 0,1 раствор.

Разбавляют водой 8  концентрированной соляной кислоты ( 1,19 ) до 1000 .

5.5. Буферный аммиачный раствор, рН 9,6 - 9,7.

Разбавляют 20  концентрированной соляной кислоты ( 1,19 ) в 500  воды. Перемешивают и добавляют 10 г этилендиаминтетраацетата натрия и 55  концентрированного аммиака ( 0,88 ). Доливают водой до 1000 , перемешивают и проверяют рН.

5.6. Нитрит натрия, эталонные растворы.

Растворяют в воде 1,000 г нитрита натрия и разбавляют до 100  в мерной колбе с одной меткой. С помощью пипетки приливают 5  раствора в мерную колбу вместимостью 1000  и разбавляют до метки.

Готовят серию эталонных растворов, вливая с помощью пипетки 5, 10 и 20  полученного раствора в мерные колбы вместимостью 100  и доливая водой до метки. Полученные эталонные растворы содержат соответственно 2,5; 5,0 и 10,0 мкг нитрита натрия на 1 .

Эталонные растворы и разбавленный (0,05 ) раствор нитрита натрия, из которого их получают, следует готовить в день проведения анализа.

5.7. Растворы для получения окраски

5.7.1. Раствор I

Растворяют, подогревая на водяной бане, 2 г аминобензола сульфамида в 800  воды. Охлаждают, при необходимости фильтруют и добавляют, помешивая, 100  концентрированной соляной кислоты ( 1,19 ), затем доливают водой до 1000 .

5.7.2. Раствор II

Растворяют в воде 0,25 г N-1-нафтилэтилендиамина дигидрохлорида . Доливают водой до 250 . Полученный раствор хранят в холодильнике в хорошо укупоренной бутыли из коричневого стекла не более недели.

5.7.3. Раствор III

Растворяют 445  концентрированной соляной кислоты ( 1;19 ) водой до 1000 .

5.8. Нитрат калия, эталонный раствор.

Растворяют в воде 1,465 г нитрата калия и разбавляют до 100 в мерной колбе. С помощью пипетки приливают 5  полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000  и разбавляют до метки.

Полученный раствор содержит 73,25 мг нитрата калия на 1 .

Эталонный раствор готовят в день проведения анализа.

6. Оборудование

Обычное лабораторное оборудование, а также:

6.1. Механическая мясорубка лабораторного типа с перфорированной пластиной, диаметр отверстий которой не превышает 4 мм.

6.2. Аналитические весы.

6.3. Мерные колбы с одной меткой вместимостью 100, 200 и 1000  в соответствии с ГОСТ 1770*.

6.4. Пипетки с одной меткой вместимостью 10 и 20 , при необходимости с другой емкостью в зависимости от аликвоты фильтрата (п. 8.8.1), соответствующие требованиям НТД.

6.5. Кипящая водяная баня.

Прибор для расщепления нитрата

Примечание. Чтобы изменять высоту капиллярной трубки и таким образом регулировать скорость потока жидкости, можно использовать гибкое соединение между дном колонны и капиллярной трубкой, по которой стекает жидкость.

6.6. Гофрированная фильтровальная бумага диаметром около 15 см, не содержащая нитрита и нитрата.

6.7. Стеклянное оборудование для расщепления нитрата (см. чертеж).

6.8. Фотоэлектрический колориметр или спектрофотометр с камерами, имеющими оптическую длину 1 см.

6.9. Коническая колба вместимостью 300 .

7. Проба

7.1. Используют показательную пробу массой не менее 200 г (см. ГОСТ 9792*).

7.2. Пробу для анализа готовят сразу (п. 8.1) или, если это невозможно, хранят показательную пробу при температуре от 0 до 5 °С в течение не более 4 сут.

8. Проведение анализа

8.1. Приготовление пробы для анализа

Пробу пропускают через мясорубку (п. 6.1) не менее двух раз и перемешивают. Хранят в герметичном, целиком заполненном сосуде в охлажденном состоянии. Анализ проводят не позднее чем через 24 ч после приготовления пробы.

Примечание. Продукты, не подвергавшиеся кулинарной обработке, испытывают сразу же после измельчения.

8.2. Подготовка кадмиевой колонны

8.2.1. Помещают 3 - 5 цинковых стержней (п. 5.1) в раствор сульфата кадмия (п. 5.3), налитого в химический стакан (для одной кадмиевой колонны достаточно 1  раствора сульфата кадмия).

8.2.2. Удаляют губчатый металлический осадок кадмия с цинковых стержней каждые 1 - 2 ч, помешивая ими в растворе или потирая их друг о друга.

8.2.3. Через 6 - 8 ч сливают раствор и дважды промывают осадок 1  воды, чтобы кадмий был постоянно покрыт слоем жидкости.

8.2.4. Помещают осадок кадмия с 400  раствора соляной кислоты (п. 5.4) в лабораторную мешалку и перемешивают 10 с. Затем возвращают содержимое мешалки в химический стакан.

8.2.5. Несколько раз перемешивают осадок кадмия стеклянной палочкой и оставляют его на ночь под слоем раствора соляной кислоты, после чего перемешивают еще раз, чтобы удалить все пузырьки газа из кадмия.

8.2.6. Сливают раствор и промывают кадмий два раза, используя каждый раз по 1 воды.

8.2.7. На дно стеклянной колонны для кадмия помещают стекло волокно (см. чертеж).

8.2.8. Смывают кадмий в стеклянную колонну водой до тех пор, пока слой кадмия не достигнет высоты 17 см. При заполнении колонны дают воде стекать время от времени, следя, чтобы уровень воды не опускался ниже поверхности слоя кадмия. Удаляют пузырьки газа (например, с помощью швейной иглы). Вода должна вытекать со скоростью не более 3 .

8.3. Образец для анализа.

Взвешивают 10 г пробы с точностью до 0,001 г.

8.4. Освобождение от белков.

8.4.1. Помещают образец для анализа в коническую колбу (п. 6.9) и добавляют последовательно 5  насыщенного раствора буры (п. 5.2.3) и 100  воды температурой не ниже 70°С.

8.4.2. Нагревают колбу на кипящей водяной бане (п. 6.5) в течение 15 мин, периодически встряхивая.

8.4.3. Дают колбе с содержимым остыть до комнатной температуры и добавляют последовательно 2  реактива I (п. 5.2.1) и 2 мл реактива II (п. 5.2.2), тщательно перемешивая после каждого добавления.

8.4.4. Переливают содержимое в мерную колбу вместимостью 200  (п. 6.3), доливают водой до метки и перемешивают. Содержимое колбы выдерживают в течение 30 мин при комнатной температуре.

8.4.5. Осторожно сливают верхний слой жидкости и фильтруют его через гофрированную фильтровальную бумагу (п. 6.6), получая прозрачный раствор.

Примечание. Если необходимо определить содержание нитрата и нитрита на одной пробе, для обоих определений можно использовать один и тот же фильтрат, освобожденный от белков.

8.5. Предварительная обработка кадмиевой колонны

Промывают кадмиевую колонну последовательно 25  раствора соляной кислоты (п. 5.4), 50  воды и 25  аммиачного буферного раствора (п. 5.5), разбавленного 1:9. Не следует давать жидкости в воронке опускаться ниже верхней части капиллярной вводной трубки кадмиевой колонны.

8.6. Проверка восстановительной способности кадмиевой колонны

8.6.1. С помощью пипетки приливают 20  эталонного раствора нитрата калия (п. 5.8) и одновременно 5  аммиачного буферного раствора (п. 5.5) в резервуар на верху кадмиевой колонны. Собирают вытекающую жидкость в мерной колбе вместимостью 100 .

8.6.2. Когда резервуар почти полностью опустеет, обмывают его стенки два раза, используя каждый раз по 15  воды.

После того как последняя порция воды стечет в колонну, полностью заполняют резервуар водой.

8.6.3. После того как наберется около 100  стекшей жидкости, удаляют колбу из-под колонны и доливают водой до метки.

8.6.4. С помощью пипетки приливают 10  элюата в мерную колбу вместимостью 100  (п. 6.3) и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2 - 8.8.4.

8.6.5. Если концентрация нитрита в элюате по калибровочному графику (см. п. 8.10) составляет менее 0,9 мкг нитрита натрия на 1  (т. е. 90% от теоретической величины), кадмиевую колонну выбраковывают.

8.7. Перевод нитрата в нитрит

8.7.1. С помощью пипетки приливают в резервуар на верху колонны 20  фильтрата (п. 8.4.5) и одновременно 5  аммиачного буферного раствора (п. 5.5).

Собирают жидкость, стекающую из колонны, в мерную колбу вместимостью 100  (п. 6.3).

8.7.2. Проводят анализ, как указано в пп. 8.6.2 и 8.6.3.

8.8. Колориметрическое измерение

8.8.1. С помощью пипетки переносят аликвотную часть элюата (V ), но не более 25 , в мерную колбу вместимостью 100  (п. 6.3) и доливают водой до 60 .

8.8.2. Добавляют 10  раствора I (п. 5.7.1), затем 6  раствора III (п. 5.7.3), перемешивают и оставляют на 5 мин в темноте при комнатной температуре.

8.8.3. Добавляют 2  раствора II (п. 5.7.2), перемешивают и оставляют на 3 - 10 мин в темноте при комнатной температуре. Затем разбавляют водой до метки.

8.8.4. Измеряют показатель спектрального поглощения раствора на фотоэлектрическом колориметре или спектрофотометре (п. 6.8) с оптической длиной камеры 1 см и при длине волны около 538 нм.

Примечание. Если показатель спектрального поглощения окрашенного раствора, полученного из образца для анализа, превышает соответствующий показатель для эталонного раствора с максимальной концентрацией, повторяют все действия, указанные в п. 8.8, уменьшив количество элюата, взятого в п. 8.8.1.

8.9. Количество определений

Проводят два независимых определения на двух отдельных образцах, взятых из одной пробы для анализа.

8.10. Калибровочная кривая

8.10.1 С помощью пипетки приливают в четыре мерные колбы вместимостью 100  10  воды и 10  каждого из трех эталонных растворов нитрита натрия (п. 5.6), содержащих 2,5; 5,0 и 10,0 мкг нитрита на 1 кг.

8.10.2. В каждую колбу доливают воду до 60  и далее проводят анализ, как указано в пп. 8.8.2 - 8.8.4.

8.10.3. Вычерчивают калибровочную кривую, наносят на график полученные показатели спектрального поглощения против показателей концентрации эталонных растворов в микрограммах на 1 .

9. Обработка результатов

9.1. Подсчет результатов

Содержание нитрата в пробе, выраженное в миллиграммах нитрата калия на килограмм, вычисляют по формуле

,

где m - масса образца, г;

V - объем части элюата (см. п. 8.8.1), ;

С - концентрация нитрита натрия в , определенная по калибровочной кривой и соответствующая показателю спектрального поглощения раствора, полученного из образца (см. п. 8.8.4);

- массовая доля нитрита, выраженная в миллиграммах нитрита натрия на килограмм и определенная согласно ГОСТ 29299 (ИСО 2918).

За результат принимают среднее арифметическое результатов двух определений при условии соблюдения требований к воспроизводимости (см. п. 9.2). Результат выражают с точностью до 1 мг на 1 кг продукта.

9.2. Воспроизводимость результатов

Разница между результатами двух определений, проведенных одновременно или в близкой последовательности одним и тем же лицом, может составлять не более 10% от среднего результата.

10. Протокол анализа

В протоколе анализа указывают использованный метод и полученные результаты, все действия, не предусмотренные данным стандартом или рассматриваемые как дополнительные, а также любые обстоятельства, которые могли бы повлиять на результат.

В протокол должны быть также включены все сведения, необходимые для полной идентификации пробы.

______________

* Допускается применение ГОСТ 1770 до введения ИСО 1042, ГОСТ 9792 до введения ИСО 3100 в качестве государственных стандартов.