Методические указания МУК 4.1.1703-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций N-метил-N-нитрозомочевины (нитрозометилмочевина) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1703-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций N-метил-N-нитрозомочевины (нитрозометилмочевина) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ, Министерством здравоохранения РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание нитрозометилмочевины в диапазоне массовых концентраций 0,001-0,03 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 103,08.

2.4. Регистрационный номер CAS 684-93-5.

2.5. Физико-химические свойства.

Нитрозометилмочевина - кристаллический порошок кремовато-белого цвета или пористая масса, легко распадающаяся в порошок, с температурой плавления 121-124°С (с разложением). Срок годности 2 года при хранении в защищенном от света месте при температуре не выше 5°С. В твердой фазе при хранении при температуре 30°С и выше наблюдаются случаи бурного самопроизвольного разложения. Растворим в 0,01 н водном растворе соляной кислоты, умеренно растворим в воде, очень мало растворим в 95%-ом этиловом спирте, не растворим в эфире и хлороформе.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Нитрозометилмочевина - цитостатическое алкилирующее вещество, обладает противоопухолевой и выраженной кумулятивной активностью. Оказывает чрезвычайно выраженное повреждающее действие на слизистые оболочки глаз, кожу, угнетает кроветворение, обладает общетоксическим действием, иммунотропной, сенсибилизирующей, мутагенной активностью.

Контроль нитрозометилмочевины на уровне чувствительности не менее 0,001 в воздухе рабочей зоны; 1 класс опасности.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций нитрозометилмочевины с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовой концентрации нитрозометилмочевины выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов нитрозометилмочевины в 0,01 н водном растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение.

Измерение проводят при длине волны 235 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания нитрозометилмочевины в анализируемом объеме пробы - 5,0 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации нитрозометилмочевины в воздухе - 0,001 (при отборе 5 000 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства лекарственной формы нитрозометилмочевины для инъекций (порошок лиофилизированный во флаконах).

Определению не мешают хлориды металлов (натрий, калий), применяющиеся для приготовления изотонического водного раствора для инъекций.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е
Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 с диапазоном расхода воздуха 80-400 ЗАО "Химко" "НОРД-ЭКОЛОГИЯ ХИМАВТОМАТИКА"	ТУ ЕВКН 4.471.000
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ХП-20	ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100, 1 000	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными
пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Воронки химические, диаметр 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Баня водяная	ТУ 64-1-425-72
Кюветы с толщиной оптического слоя 20 мм
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 500, 1 000	ГОСТ 25336-82Е
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы, растворы

Нитрозометилмочевина, с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	ВФС 42-2014-90
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Кислота соляная, хч, плотность 1,19 , 0,1 н раствор, 0,01 н раствор	ГОСТ 3118-77

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным образованием, прошедших обучение и имеющих навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор нитрозометилмочевины с концентрацией 500 готовят растворением 0,0500 г вещества в 0,01 н водном растворе соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 100 , при охлаждении водой с кусочками льда при температуре охлаждающей жидкости от +2 до +5°С. Раствор устойчив в течение 3 часов при хранении в холодильнике при температуре +5°С. Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.2. Стандартный раствор нитрозометилмочевины N 1 с концентрацией 50 готовят разбавлением 5 основного стандартного раствора 0,01 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 50 , при охлаждении. Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор нитрозометилмочевины N 2 с концентрацией 10 готовят разбавлением 5 стандартного раствора N 1 0,01 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 25 при охлаждении. Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.4. 0,1 н водный раствор соляной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1 000 , приливают 800 дистиллированной воды, добавляют 8,22 концентрированной соляной кислоты (плотность 1,19 ), доводят объем раствора дистиллированной водой до метки и перемешивают. Раствор устойчив в течение 30 суток.

9.1.5. 0,01 н водный раствор соляной кислоты. В мерную колбу, вместимостью 1 000 , помещают 100 0,1 н водного раствора соляной кислоты и разбавляют дистиллированной водой до 1 000 . Раствор устойчив в течение 30 суток.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы нитрозометилмочевины, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении нитрозометилмочевины

Номер стандарта	Стандартный раствор нитрозометилмочевины N 1,	Стандартный раствор нитрозометилмочевины N 2,	Соляной кислоты 0,01 н водный раствор,	Массовая концентрация нитрозометилмочевины в градуировочном растворе,	Содержание нитрозометилмочевины в градуировочном растворе, мкг
1	0,00	0,0	10,00	0,0	0,0
2	0,00	0,5	9,50	0,5	5,0
3	0,00	1,0	9,00	1,0	10,0
4	0,40	0,0	9,60	2,0	20,0
5	0,80	0,0	9,20	4,0	40,0
6	1,60	0,0	8,40	8,0	80,0
7	3,00	0,0	7,00	15,0	150,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение 30 мин при охлаждении.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 10 минут измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 235 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества. Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания нитрозометилмочевины в мкг.

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования и после ремонта прибора.

9.4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 400 аспирируют через фильтр АФА-ХП-20, помещенный в фильтродержатель. Для определения 0,001 необходимо отобрать 5 000 воздуха. Анализ проб следует проводить в день отбора. Пробы хранят в химических бюксах в холодильнике при температуре 5°С не более трех часов.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс с пришлифованной крышкой вместимостью 25 , приливают 10 0,01 н водного раствора соляной кислоты. Бюксы ставят на металлическую решетку (охлажденную мелко раздробленным льдом с солью), расположенную в водяной бане и оставляют на 10 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения веществ. Затем фильтр отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра 98%.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 235 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания нитрозометилмочевины проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию нитрозометилмочевины (С, ) в воздухе рабочей зоны вычисляют по формуле:

, где

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме раствора по градуировочному графику, мкг;

V - объем воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде:

, , Р = 0,95

Значение = 0,000037 + 0,18С, (), где

- характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Таблица 2

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости

Диапазон определяемых массовых концентраций нитрозометилмочевины,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,001-0,03	0,000037 + 0,18С	0,000052 + 0,21С	0,00015 + 0,28С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы () (общая концентрация не должна превышать верхней границы диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза - , и рабочей пробы, разбавленной в два раза с добавкой - , получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

X - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности.

К = 0,000052 + 0,21С ()

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,00015 + 0,28 С ()

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 2 ч 10 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко