Методические указания МУК 4.1.1678-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 3'-азидо-3'-дезокситимидина (азидотимидин) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)
Дата введения: с момента утверждения
1. Область применения
Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание азидотимидина в диапазоне массовых концентраций 0,005-0,08 .
2. Характеристика вещества
2.1. Структурная формула
2.2. Эмпирическая формула .
2.3. Молекулярная масса 267,25.
2.4. Регистрационный номер CAS 30516-87-1.
2.5. Физико-химические свойства.
Азидотимидин - белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок, без запаха с температурой плавления 120-123°С, растворим в воде, 0,01 н водном растворе соляной кислоты, этиловом и метиловом спиртах, мало растворим в хлороформе, очень мало растворим в эфире.
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
2.6. Токсикологическая характеристика.
Азидотимидин - структурный аналог тимидина, противовирусный препарат, ингибирующий репликацию ретровирусов, включая вирус иммунодефицита человека (ВИЧ). Азидотимидин умеренно опасен при попадании в желудок, обладает слабым местно-раздражающим действием, способен к кожной резорбции, вызывая при этом системные токсические эффекты, оказывает выраженное влияние на иммунную систему, гемопоэз и костный мозг, способен вызывать отдаленные эффекты: мутагенный, канцерогенный (включая трансплацентарный бластомогенез), эмбриотоксический, тератогенный, обладает общетоксическим действием.
Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) азидотимидина в воздухе рабочей зоны 0,01 .
3. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций азидотимидина с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.
4. Метод измерений
Измерения массовых концентраций азидотимидина выполняют методом спектрофотометрии.
Метод определения основан на способности растворов азидотимидина в 0,01 н водном растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение.
Измерение производят при длине волны 267 нм.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания азидотимидина в анализируемом объеме пробы - 10 мкг.
Нижний предел измерения массовой концентрации азидотимидина в воздухе - 0,005 (при отборе 2 000
воздуха).
Метод специфичен в условиях производства таблеток азидотимидина.
Определению не мешают целлюлоза микрокристаллическая, крахмал, лактоза моногидрат, магний стеариново-кислый.
5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы
При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы.
5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы
Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss |
|
Весы лабораторные ВЛА-200 |
ГОСТ 24104-88Е |
См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст
Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 с диапазоном расхода воздуха 80-400 |
ТУ ЕВКН 4.471.000 |
Фильтродержатели |
ТУ 95.72.05-77 |
Фильтры АФА-ХП-20 |
ТУ 95-743-80 |
Колбы мерные, вместимостью 100, 1 000 |
|
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10 |
ГОСТ 29227-91 |
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10 |
|
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25 |
|
Палочки стеклянные |
|
Воронки химические, диаметр 30 мм |
|
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см |
ТУ 6-09-1678-77 |
Кюветы с толщиной оптического слоя 20 мм |
|
Дистиллятор |
ТУ 61-1-721-79 |
5.2. Реактивы, растворы
Азидотимидин, с содержанием основного вещества не менее 99,0%, в пересчете на сухое вещество, ВФС 42-2250-93 |
|
Вода дистиллированная |
|
Кислота соляная, хч, плотность 1,19 |
Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.
6. Требования безопасности
6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.
6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
7. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным образованием, прошедших обучение и имеющих навыки работы на спектрофотометре.
8. Условия измерений
8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.
8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
9. Подготовка к выполнению измерений
Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
9.1. Приготовление растворов
9.1.1. Основной стандартный раствор азидотимидина с концентрацией 500 готовят растворением 0,0500 г вещества в 0,01н водном растворе соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 100
. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
9.1.2. Стандартный раствор азидотимидина N 1 с концентрацией 100 готовят разбавлением 5
основного стандартного раствора 0,01н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 25
. Раствор используют свежеприготовленным.
9.1.3. Стандартный раствор азидотимидина N 2 с концентрацией 20 готовят разбавлением 5
стандартного раствора N 1 0,01 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 25
. Раствор используют свежеприготовленным.
9.1.4. Приготовление 0,1 н водного раствора соляной кислоты. 8,22 концентрированной соляной кислоты (плотность 1,19
) помещают в мерную колбу, вместимостью 1 000
, и разбавляют дистиллированной водой до 1 000
. Раствор устойчив в течение 30 дней.
9.1.5. Приготовление 0,01 н водного раствора соляной кислоты. 100 0,1 н соляной кислоты помещают в мерную колбу, вместимостью 1 000
, и разбавляют дистиллированной водой до 1 000
. Раствор устойчив в течение 30 дней.
9.2. Подготовка прибора
Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.
9.3. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы азидотимидина, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно, табл. 1.
Таблица 1
Растворы для установления градуировочной характеристики при определении азидотимидина
Номер стандарта |
Стандартный раствор азидотимидина N 1, |
Стандартный раствор азидотимидина N 2, |
Соляной кислоты 0,01 н водный раствор, |
Концентрация азидотимидина в градуировочном растворе, |
Содержание азидотимидина в градуировочном растворе, мкг |
1 |
0,00 |
0,00 |
10,00 |
0,0 |
0,0 |
2 |
0,00 |
0,50 |
9,50 |
1,0 |
10,0 |
3 |
0,00 |
1,00 |
9,00 |
2,0 |
20,0 |
4 |
0,00 |
2,00 |
8,00 |
4,0 |
40,0 |
5 |
1,00 |
0,00 |
9,00 |
10,0 |
100,0 |
6 |
1,20 |
0,00 |
8,80 |
12,0 |
120,0 |
7 |
1,60 |
0,00 |
8,40 |
16,0 |
160,0 |
Градуировочные растворы используют свежеприготовленными.
Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 10 мин измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 267 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.
Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания азидотимидина в мкг.
Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования и после ремонта прибора.
9.4. Отбор проб воздуха
Воздух с объемным расходом 200 аспирируют через фильтр АФА-ХП-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 2 000
воздуха. Пробы хранят в химических бюксах с пришлифованными крышками не более трех суток.
10. Выполнение измерения
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс с пришлифованной крышкой, вместимостью 25 , приливают 5
0,01 н водного раствора соляной кислоты и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения азидотимидина. Затем фильтр отжимают и повторно обрабатывают 5
того же раствора. Фильтр снова тщательно отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку, вместимостью 10
, и доводят 0,01 н водным раствором соляной кислоты до 10
. Степень десорбции азидотимидина с фильтра 98%.
Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 267 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.
Количественное определение содержания азидотимидина проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
Примечание: фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в 0,01 н водном растворе соляной кислоты вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток азидотимидина.
11. Вычисление результатов измерений
Массовую концентрацию азидотимидина (С, ) в воздухе рабочей з
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Методические указания МУК 4.1.1678-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 3'-азидо-3'-дезокситимидина (азидотимидин) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)
Текст методических указаний официально опубликован не был
Дата введения: с момента утверждения
Методические указания разработаны Государственным унитарным предприятием "Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ" (ГУП "ВНЦ БАВ"): В.П. Жестков, А.П. Крымов, В.Ф. Алещенко, Л.И. Крымова.