Методические указания МУК 4.1.1678-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 3'-азидо-3'-дезокситимидина (азидотимидин) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1678-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 3'-азидо-3'-дезокситимидина (азидотимидин) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание азидотимидина в диапазоне массовых концентраций 0,005-0,08 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 267,25.

2.4. Регистрационный номер CAS 30516-87-1.

2.5. Физико-химические свойства.

Азидотимидин - белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок, без запаха с температурой плавления 120-123°С, растворим в воде, 0,01 н водном растворе соляной кислоты, этиловом и метиловом спиртах, мало растворим в хлороформе, очень мало растворим в эфире.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Азидотимидин - структурный аналог тимидина, противовирусный препарат, ингибирующий репликацию ретровирусов, включая вирус иммунодефицита человека (ВИЧ). Азидотимидин умеренно опасен при попадании в желудок, обладает слабым местно-раздражающим действием, способен к кожной резорбции, вызывая при этом системные токсические эффекты, оказывает выраженное влияние на иммунную систему, гемопоэз и костный мозг, способен вызывать отдаленные эффекты: мутагенный, канцерогенный (включая трансплацентарный бластомогенез), эмбриотоксический, тератогенный, обладает общетоксическим действием.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) азидотимидина в воздухе рабочей зоны 0,01 .

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций азидотимидина с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций азидотимидина выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов азидотимидина в 0,01 н водном растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение.

Измерение производят при длине волны 267 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания азидотимидина в анализируемом объеме пробы - 10 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации азидотимидина в воздухе - 0,005 (при отборе 2 000 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток азидотимидина.

Определению не мешают целлюлоза микрокристаллическая, крахмал, лактоза моногидрат, магний стеариново-кислый.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 с диапазоном расхода воздуха 80-400 ЗАО "Химко" "НОРД-ЭКОЛОГИЯ ХИМАВТОМАТИКА"	ТУ ЕВКН 4.471.000
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ХП-20	ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 100, 1 000	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Воронки химические, диаметр 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Кюветы с толщиной оптического слоя 20 мм
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы, растворы

Азидотимидин, с содержанием основного вещества не менее 99,0%, в пересчете на сухое вещество, ВФС 42-2250-93
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Кислота соляная, хч, плотность 1,19 0,1 н и 0,01 н водные растворы	ГОСТ 3118-77

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц с высшим или средним специальным образованием, прошедших обучение и имеющих навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор азидотимидина с концентрацией 500 готовят растворением 0,0500 г вещества в 0,01н водном растворе соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор азидотимидина N 1 с концентрацией 100 готовят разбавлением 5 основного стандартного раствора 0,01н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 25 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор азидотимидина N 2 с концентрацией 20 готовят разбавлением 5 стандартного раствора N 1 0,01 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе, вместимостью 25 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.4. Приготовление 0,1 н водного раствора соляной кислоты. 8,22 концентрированной соляной кислоты (плотность 1,19 ) помещают в мерную колбу, вместимостью 1 000 , и разбавляют дистиллированной водой до 1 000 . Раствор устойчив в течение 30 дней.

9.1.5. Приготовление 0,01 н водного раствора соляной кислоты. 100 0,1 н соляной кислоты помещают в мерную колбу, вместимостью 1 000 , и разбавляют дистиллированной водой до 1 000 . Раствор устойчив в течение 30 дней.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы азидотимидина, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно, табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении азидотимидина

Номер стандарта	Стандартный раствор азидотимидина N 1,	Стандартный раствор азидотимидина N 2,	Соляной кислоты 0,01 н водный раствор,	Концентрация азидотимидина в градуировочном растворе,	Содержание азидотимидина в градуировочном растворе, мкг
1	0,00	0,00	10,00	0,0	0,0
2	0,00	0,50	9,50	1,0	10,0
3	0,00	1,00	9,00	2,0	20,0
4	0,00	2,00	8,00	4,0	40,0
5	1,00	0,00	9,00	10,0	100,0
6	1,20	0,00	8,80	12,0	120,0
7	1,60	0,00	8,40	16,0	160,0

Градуировочные растворы используют свежеприготовленными.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 10 мин измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 267 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания азидотимидина в мкг.

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования и после ремонта прибора.

9.4. Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 200 аспирируют через фильтр АФА-ХП-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 2 000 воздуха. Пробы хранят в химических бюксах с пришлифованными крышками не более трех суток.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс с пришлифованной крышкой, вместимостью 25 , приливают 5 0,01 н водного раствора соляной кислоты и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения азидотимидина. Затем фильтр отжимают и повторно обрабатывают 5 того же раствора. Фильтр снова тщательно отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку, вместимостью 10 , и доводят 0,01 н водным раствором соляной кислоты до 10 . Степень десорбции азидотимидина с фильтра 98%.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 267 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания азидотимидина проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание: фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в 0,01 н водном растворе соляной кислоты вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток азидотимидина.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию азидотимидина (С, ) в воздухе рабочей з