Методические указания МУК 4.1.2449-09 "Измерение массовых концентраций 5-нитро-8-хинолинол (нитроксолин) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ 27 января 2009 г.)

Методические указания МУК 4.1.2449-09
"Измерение массовых концентраций 5-нитро-8-хинолинол (нитроксолин) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ 27 января 2009 г.)

Дата введения: с 19 апреля 2009 г.

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают метод количественного химического анализа воздуха рабочей зоны для определения в нем нитроксолина в диапазоне массовых концентрации от 0,25-1,25 методом спектрофотометрии.

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула

2.3. Молекулярная масса 190,16

2.4. Регистрационный номер CAS 4008-48-4

2.5. Физико-химические свойства

Нитроксолин - мелкокристаллический порошок желто-зеленого цвета горького вкуса, с температурой плавления 177- 181°С с разложением. Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 95% (1 г в 1 л) и эфире, умеренно растворим в хлороформе.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика

Нитроксолин - антибактериальный (уроантисептический), противогрибковый препарат широкого спектра действия, обладает раздражающим действием на слизистые оболочки и кожные покровы, умеренно выраженной кумулятивной активностью, способность к кожной резорбции и метгемоглобинобразованию не выявлена.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) нитроксолина в воздухе рабочей зоны 0,5 с пометкой "+", класс опасности 2.

3. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентных условий и проведении анализа в точном соответствии с прописью методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций нитроксолина с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности Р = 0,95).

Таблица 1

Метрологические характеристики методики выполнения измерений

Диапазон измерений,	Границы расширенной неопределенности, ,	Повторяемость, ,	Воспроизводимость, ,	Границы систематической погрешности ,	Суммарная стандартная неопределенность пробоотбора, , %
0,25-1,25	0,15С	0,038С	0,12С	0,13С	5,5

С - результат измерения массовой концентрации нитроксолина, .

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций нитроксолина выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов нитроксолина в спирте этиловом 96% поглощать УФ-излучение.

Измерение производят при длине волны 240 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр АФА-ВП-10.

Нижний предел измерения содержания нитроксолина в анализируемом объеме пробы - 20 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации нитроксолина в воздухе - 0,25 (при отборе 80 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток нитроксолина. Определению не мешают аэросил, крахмал картофельный, лактоза, поливинилпирролидон низкомолекулярный, тальк, кальция стеарат, магния карбонат основной, сахароза, титана диоксид.

ГАРАНТ:

Здесь и далее по тексту нумерация разделов приводится в соответствии с источником

6. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

5.1.1. Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss N 9457-84 в Государственном реестре средств измерений
5.1.2. Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-2001
5.1.3. Аспирационное устройство, ПУ-4Э ЗАО "ХИМКО", N 14531-97 в Государственном реестре средств измерений
5.1.4. Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
5.1.5. Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80
5.1.6. Колбы мерные 2-100-2	ГОСТ 1770-74
5.1.7. Пипетки вместимостью 1-1-2-1, 1-1-2-2, 1-1-2-5, 1-1-2-10,	ГОСТ 29227-91
5.1.8. Пробирки мерные с пришлифованными пробками, П-2-10-0ДХС	ГОСТ 1770-74
5.1.9. Бюксы стеклянные СВ 19/19с СВ 24/10		ГОСТ 25336-82.
5.1.10. Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметр 5,5 см		ТУ 6-09-1678-77
5.1.11. Палочки стеклянные		ГОСТ 25336-82
5.1.12. Воронки химические, В-30-50 ХС		ГОСТ 25336-82
5.1.13. Кюветы кварцевые с толщиной оптического слоя 10 мм.
5.1.14. Секундомер		ГОСТ 5072-79
5.1.15. Дистиллятор		ТУ 61-1-721-79

5.4. Реактивы

5.4.1. Нитроксолин с содержанием основного вещества не менее 98,5% в пересчете на сухое вещество	НД 42-11900-01
5.4.2.Спирт этиловый 96%	ГОСТ 5963-67

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с вредными веществами по ГОСТ 12.1.007-76 и ГОСТ 12.1.005-88,

требования электробезопасности по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на приборы.

6.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой спектрофотометрического анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовку проб к анализу проводят в стандартных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор нитроксолина с массовой концентрацией 500 мкг/см готовят растворением 0,0500 г нитроксолина в спирте этиловом 96% в мерной колбе, вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике

9.1.2. Рабочий стандартный раствор нитроксолина N 1 с концентрацией 100 готовят разбавлением 20 основного стандартного раствора спиртом этиловым 96% в мерной колбе, вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

9.1.3. Рабочий стандартный раствор нитроксолина N 2 с концентрацией 20 готовят разбавлением 20 рабочего стандартного раствора N 1 спиртом этиловым 96% в мерной колбе, вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы нитроксолина, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений в каждой серии согласно табл. 2

Градуировочные растворы устойчивы в течение суток.

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении нитроксолина

Номер градуировочного раствора	Объем стандартного раствора нитроксолина N 1 с массовой концентрацией 100 ,	Объем стандартного раствора нитроксолина N 2 с массовой концентрацией 20 ,	Объем спирта этилового,	Содержание нитроксолина в градуировочном растворе, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0
2	0,0	1,0	9,0	20,0
3	0,0	1,5	8,5	30,0
4	0,0	2,0	8,0	40,0
5	0,5	0,0	9,5	50,0
6	0,7	0,0	9,3	70,0
7	1,0	0,0	9,0	100,0

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 20 минут измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 240 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор N 1). Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания нитроксолина в мкг.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора).

Для контроля стабильности готовят три градуировочных раствора по п. 9.3 (в начале, в середине и в конце диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с прописью методики.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

, где

- значение оптической плотности образца для контроля измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

- норматив контроля,

, где

- границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировка не стабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

9.4. Отбор проб воздуха

Отбор проб следует проводить с учётом требований ГОСТ 12.1.005-88 и Руководства Р 2.2.2006-05 (прилож. 9, обязательное).

Воздух с объёмным расходом 10,0 аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 80 дм воздуха. Пробы можно хранить в бюксах с пришлифованными крышками в течение трех суток в холодильнике.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс, вместимостью 25 см, приливают 5 спирта этилового 96% и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно обрабатывают 5 см того же растворителя, затем тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 , доводят объем фильтрата до метки и далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.

Степень десорбций вещества с фильтра 97%.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 240 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр АФА-ВП-10. Раствор сравнения необходимо предварительно профильтровать через фильтр "белая лента".

Количественное определение содержания нитроксолина проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в спирте этиловом 96% вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток нитроксолина.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию нитроксолина - С, в воздухе рабочей зоны вычисляют по формуле:

, где

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме раствора по градуировочной характеристике, мкг;

- объём воздуха, отобранный для анализа () и приведенный к стандартным условиям (прилож. 1).

К - степень десорбции вещества с фильтра, К = 0,97.

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного химического анализа представляют в виде:

, , (Р = 0,95), где:

С - значение результатов измерения массовой концентрации нитроксолина, ;

- границы расширенной неопределённости результата измерения по таблице N 1, .

13. Контроль качества результатов измерений

13.1. Контроль правильности

При проведении контроля правильности следует использовать концентрации стандартных растворов, которые входят в серию растворов, используемых при построении градуировочной характеристики.

Образцом для контроля правильности является масса нитроксолина, помещенная на фильтр АФА-ВП-10. Для приготовления образца в бюкс помещают фильтр АФА-ВП-10, на него наносят 0,5-1,0 см стандартного раствора N 1 или 1,0 стандартного раствора N 2 нитроксолина. Принятое опорное значение содержания нитроксолина в образце для контроля, аттестованное по процедуре приготовления (а км, мкг), составляет 20-100 мкг.

Проводят анализ образца в соответствии с разделом 10 данной методики. Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:

, где

- значение результата контрольного измерения, мкг;

LCL (UCL) - нижний (верхний) предел контроля правильности по табл. 3.

При отрицательном результате контроля правильности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

13.2. Контроль повторяемости

Контроль повторяемости проводят при каждом измерении.

Образцом для контроля повторяемости служит экстракт реальной пробы воздуха рабочей зоны, полученный при обработке фильтра.

Выполняют два единичных измерения в условиях повторяемости (измерение идентичных образцов выполняет один и тот же оператор на одном экземпляре прибора практически в одно и то же время и т.д.).

Результат контроля повторяемости признают удовлетворительным при выполнении условия:

, где

| - значения результатов измерений массы нитроксолина, полученных в условиях повторяемости, мкг;

r - предел повторяемости, приведенный в табл. 3 в виде зависимости от среднего арифметического результатов двух измерений, полученных в условиях повторяемости, мкг.

При положительном заключении о контроле повторяемости результаты измерений, выполненные в условиях повторяемости, признают приемлемыми.

За результат измерения (, мг) принимают значение среднего арифметического результатов двух измерений, полученных в условиях повторяемости.

При отрицательном заключении о контроле повторяемости дополнительно получают еще один результат измерений.

Если при этом расхождение из результатов трех измерений равно или меньше предела повторяемости для трех измерений ( (3) мкг), рассчитанного по формуле:

, где

- значение характеристики повторяемости, приведенное в табл. 1, выраженное в абсолютных единицах, то в качестве результата КХА фиксируется среднее арифметическое значение результатов трех измерений.

При превышении предела повторяемости для трех измерений в качестве результата измерения фиксируется медиана трех измерений, т.е. выбирается второе по значению измерение в ряду расположенных по возрастанию значений.

13.3. Контроль промежуточной прецизионности

Образцом для контроля промежуточной прецизионности служит экстракт реальной пробы воздуха рабочей зоны, полученный при обработке фильтра.

Выполняют два измерения в условиях промежуточной прецизионности с участием одной лаборатории. Пробы анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа (время между измерениями, оборудование и его калибровка, партии реактивов, оператор и др.) при соблюдении вышеуказанных условий.

Результат контроля промежуточной прецизионности признают удовлетворительным при выполнении условия:

, где

- значения результатов параллельных определений содержания нитроксолина в пробе, полученное в условиях внутрилабораторной (промежуточной) прецизионности, мкг;

- предел контроля промежуточной прецизионности, приведенный в табл. 3, мкг.

При отрицательном результате контроля промежуточной прецизионности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Таблица 3

Значения нормативов внутрилабораторного контроля результатов измерений

Диапазон измерений массы нитроксолина в образце для контроля, мкг	Предел повторяемости, r, мкг Р = 0,95 n = 2	Предел контроля промежуточной прецизионности, , мкг (n = 2, Р = 0,95)	Пределы контроля правильности для диапазона 30-100 мкг в контрольном образце (Р = 0,90)
			нижний LCL, мкг	верхний UCL, мкг
20-100	0,11	0,35

- значение среднего арифметического результатов двух единичных измерений, выполненных в условиях повторяемости, мкг;

- значение среднего арифметического результатов двух из-мерений, выполненных в условиях промежуточной прецизионности с участием одной лаборатории, мкг;

- принятое опорное значение содержания нитроксолина в образце для контроля, мкг.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 2 ч 30 мин.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко