Методические указания МУК 4.1.1668-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций эндо-альфа-фенилбензолуксусной кислоты 8-метил-8-азабицикло[3.2.1]окт-3-илового эфира гидрохлорида (глипина гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Методические указания МУК 4.1.1668-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций эндо--фенилбензолуксусной кислоты 8-метил-8-азабицикло[3.2.1]окт-3-илового эфира гидрохлорида (глипина гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание глипина гидрохлорида в диапазоне массовых концентраций 0,001-0,030 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула.

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 387,91.

2.4. Регистрационный номер CAS 1674-94-8.

2.5. Физико-химические свойства.

Глипина гидрохлорид - белый кристаллический порошок с температурой плавления 220-244°С (с разложением), растворим в воде, 0,1 н водном растворе соляной кислоты и хлороформе, умеренно растворим в 95%-м этиловом спирте.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Глипина гидрохлорид - М-холиноблокатор с центральным периферическим действием, сложный эфир аминоспирта тропина и бензиловой кислоты, применяется при лечении отравлений ФОС, эффективен в низких дозах (от 0,25 мг). Глипин при поступлении внутрь в эксперименте умеренно опасен, для человека - чрезвычайно опасен, умеренно токсичен при парентеральном поступлении, обладает выраженным раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки глаз, может оказывать сенсибилизирующее действие и вызывать аллергические реакции немедленного и замедленного типа, обладает способностью к функциональной кумуляции, кожно-резорбтивным и общетоксическим действием.

Контроль глипина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны на уровне чувствительности не менее 0,001 ; класс опасности - первый, с пометкой "++".

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций глипина гидрохлорида с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций глипина гидрохлорида выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов глипина гидрохлорида в 0,1 н водном растворе соляной кислоты поглощать УФ-излучение.

Измерение проводят при длине волны 210 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания глипина гидрохлорида в анализируемом объеме пробы - 6,0 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации глипина гидрохлорида в воздухе - 0,001 (при отборе 6 000 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства комбинированной инъекционной лекарственной формы глипина и карбоксима.

Определению не мешают изотонические растворы, содержащие хлориды металлов (натрия, калия).

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 НПФ "НОРД-ЭКОЛОГИЯ ХИМАВТОМАТИКА"	ТУ ЕВКН 4.471.000
Фильтры АФА-ХА-10	ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 25, 100, 1 000	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметром 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Воронки химические, диаметром 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 500, 1 000	ГОСТ 25336-82Е
Кюветы с толщиной оптического слоя 20 мм
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы, растворы

Глипин гидрохлорид с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	ЛР 05768527-04-02
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Кислота соляная, хч, плотностью 1,19 , 0,1 н водный раствор	ГОСТ 3118-77

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией, не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение и имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор глипина гидрохлорида с концентрацией 500 готовят растворением 0,0500 г вещества в 0,1н водном растворе соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.2. Стандартный раствор глипина гидрохлорида N 1 с концентрацией 60 готовят разбавлением 3 основного стандартного раствора 0,1 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 25 . Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор глипина гидрохлорида N 2 с концентрацией 12 готовят разбавлением 5,0 стандартного раствора N 1 0,1 н водным раствором соляной кислоты в мерной колбе вместимостью 25 . Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.4. Раствор соляной кислоты 0,1 н водный. В мерную колбу вместимостью 1 000 помещают 8,22 концентрированной соляной кислоты (плотность 1,19) и разбавляют дистиллированной водой до метки. Раствор устойчив в течение 30 суток.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы глипина гидрохлорида, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении глипина гидрохлорида

Номер стандарта	Стандартный раствор глипина гидрохлорида N 1,	Стандартный раствор глипина гидрохлорида N 2,	0,1 н водный раствор соляной кислоты,	Содержание глипина гидрохлорида в градуировочном растворе,	Содержание глипина гидрохлорида в градуировочном растворе, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0	0,0
2	0,0	0,5	9,5	0,6	6,0
3	0,0	1,0	9,0	1,2	12,0
4	0,5	0,0	9,5	3,0	30,0
5	1,0	0,0	9,0	6,0	60,0
6	1,5	0,0	8,5	9,0	90,0
7	2,0	0,0	8,0	12,0	120,0

Градуировочные растворы применяют свежеприготовленными.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 10 мин измеряют оптические плотности растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 210 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания глипина гидрохлорида (мкг).

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования и после ремонта прибора.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 400 аспирируют через фильтр АФА-ХА-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения 0,001 глипина гидрохлорида следует отобрать 6 000 воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение трех дней в бюксах с пришлифованными крышками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс, вместимостью 25 , приливают 5 0,1 н водного раствора соляной кислоты и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и повторно обрабатывают 5 0,1 н водного раствора соляной кислоты. Фильтр снова тщательно отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку с пришлифованной пробкой вместимостью 10 и доводят до 10 0,1 н водным раствором соляной кислоты. Степень десорбции вещества с фильтра 98%.

Оптическую плотность анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 20 мм при длине волны 210 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания глипина гидрохлорида (мкг) в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в 0,1 н водном растворе соляной кислоты вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственной формы глипина.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию глипина гидрохлорида (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание глипина гидрохлорида в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

V - объём воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (см. прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде: , , Р = 0,95. Значение = 0,000043 + 0,20С, , где - характеристика погрешности.

13. Конроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых массовых концентраций глипина гидрохлорида,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,001-0,030	0,000043 + 0,20С	0,000060 + 0,21С	0,00017 + 0,32С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до концентрации исходной рабочей пробы () - общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения - и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза, - и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

Х - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности

К = 0,000060 + 0,21С ().

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. Отобранный объем делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы

D = 0,00017 + 0,32С ().

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко