Методические указания МУК 4.1.3050-13 "Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека июля 2013 г.)

Методические указания МУК 4.1.3050-13
"Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека июля 2013 г.)

Свидетельство о метрологической аттестации N 01.5.04.125/01.00043/2013

Введены впервые

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои в диапазоне концентраций 0.005-0.05 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Абамектин

Смесь 5-О-деметилавермектина (авермектин и 5-О-деметил-25-де(1-метилпропил)-25-(1-метилэтил)авермектина (авермектин ) в соотношении 4:1 (С.А.)

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 161.2-169.4°С (с разложением).

Давление пара при 25°С: <  мПа.

Коэффициент распределения н-октанол-вода: logP = 4.4 (рН 7.2, комнатная t°C).

Растворимость (в при 20°С): вода - 0.00121, гексан 0.11, метанол - 13, толуол - 23, октанол - 83, ацетон - 72, этилацетат - 160, дихлорметан - 470.

Вещество стабильно при нормальных условиях, не гидролизуется в водных растворах при рН 5-9.

В биологически активных почвах абамектин прочно связывается и затем быстро разлагается почвенными микроорганизмами.

Краткая токсикологическая характеристика: Острая пероральная токсичность для крыс и мышей 10.0 и 13.6 мг/кг, острая дермальная токсичность для кроликов > 2000 мг/кг. Абамектин слабо раздражает слизистую оболочку глаз и не оказывает раздражающего действия на кожу кролика. для рыб 3-10 мкг/л (96 ч). Инсектицид нетоксичен для диких животных, земляных червей и водорослей, токсичен для пчел при прямом контакте ( 0.017-0.54 мкг/особь), но становится практически не опасным для них через несколько часов после применения.

Область применения препарата: Абамектин - инсекто-акарицид широкого спектра действия, эффективно уничтожает членистоногих, включая клещей и насекомых, на хлопчатнике, сое, овощных и декоративных культурах, семечковых плодовых, картофеле и табаке в течение вегетационного периода.

Гигиенические нормативы для абамектина в России: ОДУ в воде водоемов
0.001  , ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0.05 , ОДК в почве 0.01 мг/кг, МДУ в огурцах - 0,01 мг/кг; плодовых (семечковых), томатах, перцах, баклажанах, винограде - 0,003 мг/кг.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р=0.95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Объект анализа	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости) , %	Показатель внутрилабораторной прецизионности, , %	Показатель воспроизводимости, , %	Показатель точности* (границы относительной погрешности), , %
Зеленая масса	0.005 - 0.05	8	9	13	25
Семена	0.005 - 0.05	8	9	13	25
Масло	0.005 - 0.05	8	9	13	25

______________________________

* соответствует расширенной неопределенности при коэффициенте охвата k=2

Таблица 2

Полнота извлечения абамектина/стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для n=20, Р=0.95

Анализируемый объект, мг/кг	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Среднее значение полноты извлечения, %	Стандартное отклонение, S, %	Доверительный интервал среднего результата, %
Зеленая масса	0.005	0.005 - 0.05	84.4	4.66	2.33
Семена	0.005	0.005 - 0.05	87.5	3.85	1.93
Масло	0.005	0.005 - 0.05	86.1	7.76	3.88

2. Метод измерений

Методика основана на определении абамектина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его извлечения из образцов ацетонитрилом, очистке экстракта промывкой гексаном и последовательной очистке твердофазной экстракцией.

Идентификация абамектина проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с быстросканирующим ультрафиолетовым детектором, снабженным дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0.2 мг, ГОСТ 24104-2001.

Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0.1 г, ГОСТ 24104-2001.

Колбы мерные на 10, 100 и 1000 , ГОСТ 23932-90.

Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1000  и от 1 до
5 .

Цилиндры мерные на 50 и 100 , ГОСТ 23932-90.

Примечание: Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Абамектин, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 95.0%.

Ацетонитрил, химически чистый, ТУ 6-09-3534-87.

Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная), ГОСТ Р 52501-2005.

н-Гексан, химически чистый, ТУ 6-09-3375-78.

Кислота ортофосфорная, химически чистая, ГОСТ 6552-80.

Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-69.

Магний сернокислый безводный, химически чистый, ГОСТ 4523-67.

Метанол, химически чистый, ГОСТ 6995-77.

Натрий уксуснокислый, чистый, ГОСТ 199-68.

Натрий сернокислый безводный, химически чистый, ГОСТ 4166-76.

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0.005 М в соотношении 58:42.

Смесь N 1: ацетонитрил - вода в соотношении 1:1 по объему.

Смесь N 2: метанол - ацетонитрил в соотношении 1:4 по объему.

Смесь N 3: гексан - этилацетат в соотношении 4:1 по объему.

Смесь N 4: этилацетат - метанол в соотношении 9:1 по объему.

Этилацетат, химически чистый, ГОСТ 1138-84.

Примечание: Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, (100x2.1) мм, 1.7 мкм.

Аппарат для встряхивания проб, ТУ 64-1-1081-73

Воронки делительные, вместимостью 250 , ГОСТ 25336-82.

Воронки химические конусные, ГОСТ 25336-82.

Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 , ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10 и 100 , ГОСТ 9737-93.

Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 0.4 г гидрофобного сорбента с привитыми гексадецильными группами (патрон N 1), ТУ 4215-002-05451931-94.

Патроны концнтрирующие для твердофазной экстракции, 0.4 г слабоосновного анионообменника с привитыми аминогруппами (патрон N 2), ТУ 4215-002-05451931-94.

Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 .

Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающем вакуум до 10 мбар.

Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц.

Фильтры бумажные средней плотности, ТУ 6.091678-86.

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4000 об/мин.

Примечание: Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха °С и относительной влажности не более 80%;

выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0.1-0.2 ) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Приготовление растворов

7.2.1. 0.005 М раствор ортофосфорной кислоты:  г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 , растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.2.2. Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0.005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42 по объёму, используя мерные цилиндры.

7.3. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.3.1. Основной раствор с концентрацией 0.5 : точную навеску абамектина (50+-0.5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 , растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

Градуировочные растворы с концентрациями абамектина 0.04, 0.08, 0.2, 0.5, 1.0  готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0.005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42).

7.3.2. Раствор N 1 с концентрацией 1.0 : в мерную колбу вместимостью 100 вносят 0.2  основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.3.3. Раствор N 2 с концентрацией 0.5 : в мерную колбу вместимостью 10  помещают 5.0  раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.4. Раствор N 3 с концентрацией 0.2 : в мерную колбу вместимостью 10  помещают 2  раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.5. Раствор N 4 с концентрацией 0.08 : в мерную колбу вместимостью 10  помещают 0.8  раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.6. Раствор N 5 с концентрацией 0.04 : в мерную колбу вместимостью 10  помещают 0.4  раствора N 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 - 4°С в течение 3 месяцев, градуировочные растворы - в течение недели.

При изучении полноты извлечения абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

7.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация абамектина в растворе) в хроматограф вводят по 10  градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации абамектина в градуировочном растворе. Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (К) в уравнении линейной регрессии:

С=KS, где

S - площадь пика градуировочного раствора.

Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0.99.

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

, где

С - аттестованное значение массовой концентрации абамектина в градуировочном растворе,

- результат контрольного измерения массовой концентрации абамектина в градуировочном растворе,

- норматив контроля градуировочного коэффициента, %. ( при Р = 0.95).

7.5. Подготовка патронов N 1 и N 2 для очистки экстрактов

7.5.1. Подготовка патрона для твердофазной экстракции N 1

Патрон N 1 с привитыми гексадецильными группами промывают последовательно 2  смеси N 2 и 3  смеси N 1, после чего патрон готов к работе.

7.5.2. Подготовка патрона для твердофазной экстракции N 2

Патрон N 2 с привитыми аминогруппами промывают последовательно 2  смеси N 4 и 3  смеси N 3, после чего патрон готов к работе.

7.6. Проверка хроматографического поведения абамектина на патронах N 1 и N 2

7.6.1. Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне N 1

В кругло донную колбу емкостью 10  отбирают 1  стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 . Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 2  смеси N 1 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 2  смеси N 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5  смеси N 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью N 2 со скоростью 1-2 капли в сек. Отбирают фракции по 2 , упаривают досуха, растворяют в 1  подвижной фазы (ацетонитрил - 0.005М , 58:42) и анализируют по п. 9.4.

Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.

7.6.2. Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне N 2

В круглодонную колбу емкостью 10  отбирают 1  стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 . Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1  смеси N 3 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 1  смеси N 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8  смеси N 3, элюат отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью N 4 со скоростью 1-2 капли в сек. Отбирают фракции по 2 , упаривают досуха, растворяют в 1 подвижной фазы (ацетонитрил - 0.005М , 58:42) и анализируют по п. 9.4.

Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.

ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения абамектина следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ 10852-86. "Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб".

Для длительного хранения зерно сои подсушивают при комнатной температуре в отсутствие света. Сухие образцы могут храниться в течение года. Перед анализом пробы зерна доводят до стандартной влажности и измельчают. Пробы масла хранят в холодильнике при 0 - 4°С в закрытой стеклянной таре не более 2-х месяцев.

9. Проведение определения

9.1. Экстракция абамектина

9.1.1. Экстракция абамектина из семян сои

Навеску измельченных семян (20 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50  и последовательно добавляют 20  ацетонитрила, 4 г магния сернокислого, 1 г натрия уксуснокислого и 0.1  ледяной уксусной кислоты. Пробирку плотно закрывают, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 10 мин и центрифугируют при скорости 4000 об/мин в течение 10 мин. Верхний ацетонитрильный слой декантируют, фильтруют через бумажный фильтр. К остатку в пробирке добавляют 15  ацетонитрила и проводят повторную экстракцию. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.

9.1.2. Экстракция абамектина из масла сои

Навеску масла (20 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 , добавляют 20  ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, к остатку добавляют 15  ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.

9.1.3. Экстракция абамектина из зеленой массы сои

Навеску измельченной зеленой массы (10 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 , добавляют 50  ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, пропускают через слой сернокислого натрия, к остатку в колбе добавляют 30  ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты и очищают по п. 9.2.

9.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

К ацетонитрильному экстракту, полученному по п. 9.1 и помещенному в делительную воронку на 250 , добавляют 15  гексана и интенсивно встряхивают в течение 2-3 мин. После полного разделения слоев, верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и повторяют операцию очистки с новой порцией гексана объемом 15 .

Затем ацетонитрильный экстракт переносят в колбу для упаривания на 100 , упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С. Дальнейшую очистку сухого остатка проводят последовательно на патронах N 1 и N 2 по п. 9.3.1 и п. 9.3.2, соответственно.

9.3. Очистка экстракта на концентрирующих патронах для твердофазной экстракции

9.3.1. Очистка на патроне N 1

Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов п. 9.2, растворяют в 2  смеси N 1 (ацетонитрил : вода = 1:1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 2  смеси N 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон
5  той же смеси N 1, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 5  смеси N 2 (метанол: ацетонитрил = 1:4). Элюат количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 10  и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С. Дальнейшую очистку сухого остатка проводят на патроне N 2 по п. 9.3.2.

9.3.2. Очистка на патроне N 2

Остаток в колбе, полученный по п. 9.3.1 растворяют в 1  смеси N 3 (гексан : этилацетат= 4:1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 1  смеси N 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8  той же смеси N 3, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 3  смеси N 4 (этилацетат : метанол = 9:1). Элюат количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 10  и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 1  подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0.005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42) и анализируют на содержание абамектина по п. 9.4.

9.4. Условия хроматографирования

Ультраэффективный жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, (100x2.1) мм, 1.7 мкм. Температура колонки °С. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0.005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58:42. Скорость потока элюента 0.2 . Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 245 нм. Объем дозируемой в хроматограф пробы 10 .

10. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание абамектина в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

,

- - площадь пика абамектина на хроматограмме испытуемого образца,  (AU);

K - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;

- V - объём пробы, подготовленной для хроматографического анализа, ;

- Р - навеска анализируемого образца, г;

- f - полнота извлечения абамектина, приведенная в табл. 2, (%).

Содержание остаточных количеств абамектина в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор абамектина с концентрацией 1.0 , разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

(1)

где - результаты параллельных определений, мг/кг;

r - значение предела повторяемости .

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

 мг/кг при вероятности Р=0.95,

где - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

,

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0.005 мг/кг*, где * - 0.005 мг/кг - предел обнаружения абамектина в сое).

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутри-лабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки должна удовлетворять условию:

где - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

где - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

,

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Результат контроля процедуры рассчитывают по формуле:

,

где - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

(1)

Проводят сопоставление результата контроля процедуры с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

, (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

, (3)

где - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека - Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко