Приложение II. Исследования воспроизводства

Приложение II

Исследования воспроизводства

Руководящие указания по применению главы I (C) и (D) части 2 Приложения к Директиве 75/318/ЕЭС в целях выдачи разрешения на маркетинг нового лекарственного средства

Общие положения

Исследование действия препарата на воспроизводство должно быть проведено на всех новых препаратах таким образом, чтобы было выявлено наличие любого воздействия на брачное поведение и любого воздействия, которое может привести к эмбриональной потере, эмбриональному расстройству и повреждению потомства в будущем, например:

(i) изменение рождаемости или производство патологического потомства, которое может навредить мужским и/или женским гаметам;

(ii) вмешательство в предимплантационной стадии и в имплантационной стадии развития оплодотворенного яйца;

(iii) ядовитые последствия для эмбриона;

(iv) ядовитые последствия для плода;

(v) изменения в материнской физиологии, приводящие к побочным последствиям для эмбриона или плода;

(vi) последствия для утробного или плацентарного роста или развития;

(vii) вмешательство в роды;

(viii) последствия для послеродового развития, вскармливания потомства молоком и лактации матери;

(ix) последствия на потомстве, проявляющиеся в дальнейшем.

Специфические руководящие указания

В интерпретации следующих руководящих указаний необходимо учитывать, что они не являются императивными, и, возможно, не универсально применимы, поэтому интерпретация должна быть гибкой и должна приспосабливаться к предложенному использованию лекарственного средства; выбору вида исследований должно быть дано объяснение.

1. Выбор видов

Исследования эмбриотоксичности должны обычно проводиться на двух видах млекопитающих, один из которых не должен быть грызуном. Исследования плодовитости и перинатальные исследования должны быть проведены по крайней мере на одном виде животных. Если метаболизм лекарственного средства особой разновидности подобен человеческому, желательно включить в исследования этот вид. Желательно, чтобы один из видов был тем же, что и в долгосрочной перспективе исследования токсичности. Исследования третьего вида могут быть полезными, если результаты двух иных видов получились противоречивыми. Должны быть определены виды и штаммы, используемые в исследованиях.

2. Дозировка

Дозирование обычно осуществляется на трех уровнях. Большая доза должна обычно быть такова, что выявить признаки материнской токсичности, например уменьшение прибавки в весе. Малая доза должна быть достаточной для того, чтобы оказать фармакодинамическое влияние, подобное желаемому терапевтическому воздействию, или поднять уровень в крови до требуемого воздействия (это правило не применяется, если фармакодинамический эффект самостоятельно вызывает токсичность). Промежуточная доза должна быть средним геометрическим большой и малой доз.

Дозировка проводится предложенным путем или с помощью клинического назначения.

Графики дозировки для исследования действия препарата на воспроизводство должны обычно включать:

(a) исследования эмбриотоксичности; дозирование в течение периода эмбриогенеза (органогенез) на двух видах, один из которых не должен быть грызуном;

(b) исследование плодовитости, которое должно быть проведено по крайней мере на одном виде; дозирование должно начаться у самцов и самок за достаточный до спаривания период времени таким образом, чтобы могло быть выявлено любое воздействие лекарственного средства на гаметогенез. Дозируемые животные могут спариваться с дозируемыми партнерами, но в случае положительных результатов исследования репродуктивного дефекта исследование должно быть повторено с использованием дозируемых животных, спариваемых с недозируемыми партнерами. После спаривания дозируемые самки должны продолжать дозироваться на всем протяжении вынашивания плода.

Половина самок должна быть умерщвлена во время вынашивания плода, предпочтительно за несколько дней до ожидаемой даты родов, и плоды должны быть извлечены при помощи кесарева сечением и исследованы. Оставшимся самкам нужно позволить обычно родить и вырастить их потомство;

(c) перинатальные исследования должны быть проведены по крайней мере на одном виде; дозирование должно охватить период роста животного с окончания процесса органогенеза, а также период вскармливания молоком до момента прекращения вскармливания молоком.

3. Количество животных

На каждом уровне дозирования должно использоваться надлежащее для проведения исследований количество животных. За исключением приматов, предлагаются следующие минимальные количества на уровень дозы:

(а) исследования эмбриотоксичности: 20 беременных самок у грызунов, 12 беременных самок у животных, не являющихся грызунами;

(b) исследования плодовитости: 24 самки и 24 самца;

(c) перинатальные исследования: 12 беременных самок.

Если используется третья разновидность, для получения четкого заключения по результатам исследования предлагается, чтобы использовалось надлежащее число дозируемых животных вместе с животными из контрольных групп.

4. Место обитания и диета

Должно быть дано полное описание условий обитания и содержания животных. Должна быть обеспечена полная спецификация диеты (включая добавки).

5. Фармакокинетики

При проведении исследований воспроизводства должно быть уделено внимание фармакокинетикам лекарственного средства у вынашивающего плод животного. Насколько представляется технически возможным, должен быть определен уровень влияния плода на лекарственное средство.

6. Оценки

(a) Должны быть проведены исследования плодов от животных, дозируемых во время периода эмбриогенеза. Животные должны быть умерщвлены, и плоды удалены при помощи кесарева сечения. У этих животных должны быть зарегистрированы: число желтых тел, мест имплантации (видимых и определяемых специальными методами, например, методом Салевски), органы резорбции, вес и пол отдельных плодов. Отдельные плоды должны быть исследованы на внешние расстройства, а также должны быть проведены соответствующие исследования скелета или внутренних органов, или и того, и другого на всех плодах. Если выявлены очевидные расстройства, должны быть проведены соответствующие исследования. Особое внимание должно быть уделено неоправданно высокому числу поглощений лекарственного средства, поскольку это может свидетельствовать о необходимости дальнейших исследований тератогенных эффектов на ранних стадиях вынашивания плода.

(b) При исследовании плодовитости самок, умерщвленных во время вынашивания плода, необходимо извлечь их плоды путем кесарева сечения и зарегистрировать следующую информацию: число желтых тел, места имплантации, органы резорбции, вес и пол отдельных плодов. Каждый плод должны быть исследован на предмет любого скелетного и/или висцерального расстройства.

Достаточно большому числу потомства, произведенному от животных, дозируемых во время изучения рождаемости и оставленных развиваться и вскармливать их потомство до стадии прекращения вскармливания молоком, необходимо позволить жить и достигнуть зрелости. Должны быть оценены отдаленные последствия лекарственного средства на потомстве с точки зрения слухового, визуального и поведенческого ухудшения. Должна быть определена репродуктивная функция у потомства путем дозволения по крайней мере одному самцу и одной самке от каждого помета дозируемых животных размножаться и произвести один помет (спаривание разнополых особей одного помета не рассматривается).

(c) Самкам, дозируемым в дородовый и послеродовые периоды, необходимо позволить спариваться случайным образом и исследовать потомство при прекращении вскармливания молоком. Все животные, умерщвленные при прекращении вскармливания молоком, должны быть подвергнуты тщательному исследованию путем аутопсии. При определенных обстоятельствах часть потомства может быть оставлена до достижения зрелости с целью оценки их репродуктивных способностей, а также оценки других отдаленных последствий лекарственного средства на потомстве с точки зрения поведенческих, визуальных и слуховых ухудшений.

7. Выводы

Исследователь должен сделать выводы по результатам таких исследований, определяющих либо:

(a) отсутствие признаков отрицательного воздействия лекарственного средства на репродуктивную функцию; или

(b) наличие признаков отрицательного воздействия лекарственного средства на репродуктивную функцию (и), которая будет определена; или

(с) что данные недостаточны для выводов.

Если часть исследований была пропущена, исследователь должен обосновать такие пропуски.

Дополнение
Продолжительность гаметогенеза

При изучении грызунов дозирование самцов должно быть произведено как минимум за 60 дней и для самок как минимум за 14 дней до спаривания. Животные должны иметь возраст приблизительно 40 дней к началу дозирования. На данной стадии знания указанные сроки расцениваются как приемлемые.