Методические указания МУК 4.1.2856-11 "Определение остаточных количеств Просульфокарба в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ 31 марта 2011 г.)

Методические указания МУК 4.1.2856-11
"Определение остаточных количеств Просульфокарба в воде, почве и клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ 31 марта 2011 г.)

Дата введения: с момента утверждения

Общие положения и область применения

Свидетельство об аттестации методики от 01.12.2010 N 005829.11.10.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации Просульфокарба в воде в диапазоне 0,005 - 0,05 и в почве в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг, а также уровня остаточных количеств в клубнях картофеля в диапазоне 0,01 - 0,1 мг/кг.

Название действующего вещества по ИЮПАК: S-бензил дипропил-тиокарбамат.

Структурная формула:

"Структурная формула просульфокарба"

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 251,4.

Агрегатное состояние: жидкость.

Цвет, запах: от бесцветного до соломенно-желтого цвета со сладковатым запахом.

Давление паров: 6,9 мПа (при 25°С).

Коэффициент распределения октанол-вода: (при 25°С).

Температура плавления: 20°С.

Температура кипения: 341°С.

Растворимость в воде (20°С): 13,2.

Растворимость в органических растворителях (, 20°С): ацетон - 250; н-гептан - 250; ксилол - 250; этилацетат - 250.

Гидролизуется в водных растворах - более 159 дней при рН 7.

В почве в аэробных условиях подвергается микробиологическому разложению с периодом полуразложения () от 12 до 49 дней (21,5°С).

Краткая токсикологическая характеристика: Просульфокарб относится к веществам малоопасным по острой пероральной ( для крыс от 1 820 до 1 958 мг/кг) и дермальной токсичности ( для крыс более 2 000 мг/кг), но умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности ( для крыс (4 ч) более 4 700 ). Не обладает терратогенным и мутагенным эффектом для крыс и кроликов.

Область применения: Просульфокарб - селективный гербицид из группы производных тиокарбаминовой кислоты, ингибирует синтез липидов в растениях. Проникает в растения через корни и листья и подавляет рост меристематических тканей. Используется для борьбы с рядом злаковых и двудольных сорных растений (включая лисохвост, метлицу, подмаренник цепкий и др.).

В России проходят регистрационные испытания в качестве гербицида для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорными растениями путем направленного опрыскивания поверхности почвы до всходов культуры в посадках картофеля с рекомендуемой нормой расхода по препарату 5,0 , однократно.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ПДК в воде водоема - 0,005 ; ПДК в почве - 0,2 мг/кг; МДУ в продукции (мг/кг): в клубнях картофеля - 0,1.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 1

Метрологические параметры для Просульфокарба

Анализируемый объект	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешности), , %, Р = 0,95	Стандартное отклонение повторяемости, , %	Предел повторяемости, r, %	Предел воспроизводимости, R, %
Вода	0,005-0,01 вкл.	100	2,4	6,7	8,0
	0,01-0,05 вкл.	50	3,5	9,7	11,6
Почва	0,01-0,1 вкл.	50	2,6	7,2	8,6
Клубни картофеля	0,01-0,1 вкл.	50	3,8	10,6	12,6

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для Просульфокарба

Анализируемый объект	Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20
	Предел обнаружения, мг/кг	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Полнота извлечения вещества, %	Стандартное отклонение, S, %	Доверительный интервал среднего результата, , %
Вода	0,005	0,005-0,05	84,2	3,92	4,33
Почва	0,01	0,01-0,1	75,6	2,1	3,26
Клубни картофеля	0,01	0,01-0,1	82,4	2,4	4,71

2. Метод измерений

Метод основан на определении Просульфокарба с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта на колонках с окисью алюминия и концентрирующих патронах Диапак Амин.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Весы аналитические "OHAUS", ЕР 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс точности по ГОСТ 24104-2001 - специальный (I) Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности г "ACCULAB" V600, соответствуют классу точности по ГОСТ 24104-2001 - средний (III)
Колбы мерные на 10, 25, 50,100, 500 и 1 000 Микрошприц для жидкостной хроматографии "Hamilton, 1700", объем 100 , фирма "SUPELCO", кат. N 26281	ГОСТ 1770-74
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 рН-метр/милливольтметр рН-150 0...14 рН; мВ, номер госрегистрации 10663 Хроматограф жидкостной Waters 515с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации 15311-02	ГОСТ 29227-91
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50	ГОСТ 1770-74

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Просульфокарб, CAS 52888-80-9, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не, менее 95,0%, фирма "Dr. Ehreustor-fer GmbH", аккредитованная по ИСО-9001-2000
Алюминий окись для хроматографии, ч	ТУ 6-09-3916--75
Ацетон, осч	ТУ 6-09-3513-86
Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм	ТУ 6-09-2167-84
Вода бидистиллированная (бидистиллят), деионизированная или перегнанная над	ГОСТ 6709-72
Гелий очищенный, марки "А"	ТУ 51-940-80
n-Гексан, хч	ТУ 6-09-3818-89
Калий марганцово-кислый, ч.д.а.	ГОСТ 20490-75
Кальций хлористый, ч	ТУ 6-09-4711-81
Концентрирующие патроны Диапак Амин (0,6 г), фирма "БиоХимМак СТ"	ТУ 4215-002-05451931-94
Метилен хлористый, хч	ТУ 6-09-2662-77
Натрий серно-кислый, безводный, хч	ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, хч	ГОСТ 4233-77

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами Диапак Амин	ГОСТ 25336-82
Аппарат для встряхивания проб "SKLO UNION TYP LT1" Банки с крышками для экстракции на 250 , полипропилен, кат. N 3120-0250, фирма "NALGENE" Ванна ультразвуковая "UNITRA" UNIMA OLSZTYN UM-4 Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная	ГОСТ 5556-81
Воронки делительные на 250	ГОСТ 25336-82
Воронки лабораторные, стеклянные,	ГОСТ 25336-82
Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней В-480, фирма "Buchi" Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 000 ,	ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4 000 ТС Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диаметром 3,9 мм, ХТеrrа MS С 18, зернение 5 мкм, фирма "Waters"	ТУ 92-891.029-91
Насос диафрагменный FT. 19 фирмы KNF Neu Laboport Предколонка хроматографическая стальная, Symmetry С 8, длиной 20,0 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters"
Сито лабораторное с полотном из латуни или нержавеющей стали с размером ячеек 1 мм	ГОСТ 3826-82 и ГОСТ 6613-86
Стаканы стеклянные термостойкие объемом 50-500	ГОСТ 25336-82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 и приемной конической колбой объемом 1 000
Фильтры бумажные, "красная лента"	ТУ 6-09-1678-86
Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма "Waters" Центрифуга MPW-350e с числом оборотов 4 000 об./мин и с набором полипропиленовых банок емкостью 200
Шприц инъекционный однократного применения объемом 10	ГОСТ 24861-91 (ИСО 7886-84)

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха °С, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;

- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с окисью алюминия, концентрирующих патронов Диапак Амин для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонке с окисью алюминия и на концентрирующих патронах Диапак Амин, построение калибровочной кривой.

7.1. Подготовка органических растворителей

Для проведения анализа следует использовать растворители "прозрачные" при длине волны 220 нм. Для проверки 100 растворителя выпаривают досуха на роторном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С, сухой остаток растворяют в 2 ацетонитрила и хроматографируют. При недостаточной чистоте растворитель подвергают дополнительной очистке.

7.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 . Выдерживают его над осушителем в течение 5-6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5°С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5°С отбрасывают.

7.1.2. Очистка ацетона

Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 .

Ацетон перегоняют при температуре 56,2°С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2°С, отбрасывают.

7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды

Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 и кипятят в течение 6 ч.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0°С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0°С отбрасывают.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и очищенную воду.

В плоскодонную колбу объемом 1 000 помещают 500 ацетонитрила и 400 очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 в течение 5 мин, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

7.2.2. Приготовление градуировочных растворов

7.2.2.1. Стандартный раствор N 1 с концентрацией Просульфокарба 1,0 .

Взвешивают 50 мг Просульфокарба в мерной колбе объемом 50 . Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом. Полученный стандартный раствор N 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и построения калибровочной кривой.

7.2.2.2. Стандартный раствор N 2 с концентрацией Просульфокарба 10,0 .

Из стандартного раствора N 1 отбирают пипеткой 1 , помещают в мерную колбу объемом 100 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 2 используется для приготовления стандартных растворов для построения калибровочной кривой.

7.2.2.3. Стандартный раствор N 3 с концентрацией Просульфокарба 1,0 .

Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 , помещают в мерную колбу объемом 10 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 3 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.4. Стандартный раствор N 4 с концентрацией Просульфокарба 0,5 .

Из стандартного раствора N 3 отбирают пипеткой 5 , помещают в мерную колбу объемом 10 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 4 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.5. Стандартный раствор N 5 с концентрацией Просульфокарба 0,2 .

Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 , помещают в мерную колбу объемом 50 и доводят объем до метки ацетонитрилом. Стандартный раствор N 5 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.6. Стандартный раствор N 6 с концентрацией Просульфокарба 0,1 .

Из стандартного раствора N 2 отбирают пипеткой 1 , помещают в мерную колбу объемом 100 и доводят объем до метки ацетонигрилом. Стандартный раствор N 6 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.7. Стандартные растворы Просульфокарба с концентрацией 5,0, 2,0, 1,0, 0,5, 0,2 и 0,1 для изучения хроматографического поведения и внесения в контрольные образцы.

Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5,0, 2,0, 1,0, 0,5, 0,2 и 0,1 , и используют эти растворы для изучения хроматографического поведения на патронах Диапак Амин и на колонках с окисью алюминия, а также для внесения в контрольные образцы воды, почвы и клубней картофеля.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Просульфокарба в растворе (), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0, 0,5, 0,2 и 0,1 .

В инжектор хроматографа вводят по 20 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.

7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта

7.4.1. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 3 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 ацетонитрила.

7.4.2. Проверка хроматографического поведения Просульфокарба на колонке с окисью алюминия

В концентратор объемом 100 вносят 1 стандартного раствора Просульфокарба в ацетонитриле с концентрацией 1,0 и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С. Сухой остаток растворяют в 5 гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор объемом 100 и упаривают досуха при температуре не выше 30°С, растворяют в 2 ацетонитрила и хроматографируют. Исходную колбу обмывают двумя порциями гексана объемом по 5 и 10 , затем двумя порциями смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1 объемом по 10 каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом 100 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 ацетонитрила и 20 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие Просульфокарб, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюента.

Изучение поведения Просульфокарба на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.

7.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак Амин для очистки экстрактов

7.5.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак Амин для очистки экстракта

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 .

Патрон Диапак Амин устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 гексана. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.5.2. Проверка хроматографического поведения Просульфокарба на концентрирующем патроне Диапак Амин

Из стандартного раствора Просульфокарба в ацетонитрияе, содержащего 1 , отбирают 1 , помещают в концентратор объемом 100 и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30°С. Сухой остаток растворяют в 5 гексана, тщательно обмывая стенки концентратора, и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30°С, сухой остаток растворяют в 2 ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают тремя порциями гексана объемом по 10, 5 и 5 и последовательно вносят их на патрон. Элюат после прохождения каждой порции собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 , упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С, сухой остаток растворяют в 2 ацетонитрила и хроматографируют.

Определяют фракции, содержащие Просульфокарб, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюента.

7.6. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

Хроматографическую колонку XTerra MS C18 с предколонкой Symmetry C8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30°С и скорости потока подвижной фазы 1 3 - 4 ч.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.1979 N 2051-79, а также ГОСТ Р 51592-2000 "Вода. Общие требования к отбору проб", ГОСТ 17.4.3.01-83 "Почвы. Общие требования к отбору проб", ГОСТ 28168-89 "Почвы. Отбор проб", ГОСТ 27853-88, ГОСТ 13341-77 "Свежие и свежемороженые овощи, картофель, бахчевые, фрукты, ягоды, грибы. Правила приемки и методы отбора проб".

Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4°С.

Пробы клубней картофеля - в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре -18°С.

Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

9. Подготовка проб и выполнение измерений

9.1. Вода

9.1.1. Экстракция

Пробу воды объемом 100 помещают в делительную воронку объемом 250 . Просулъфокарб экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом по 30 , встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 , собирая его через слой безводного сульфата натрия. Экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С.

Сухой остаток растворяют в 5 ацетонитрила и хроматографируют.

9.2. Почва и клубни картофеля

9.2.1. Экстракция

Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 , прибавляют 10 дистиллированной воды и выдерживают 5 мин при комнатной температуре (клубни картофеля не смачивают). Просулъфокарб экстрагируют 50 ацетонитрила в течение 5 мин в ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на аппарат для встряхивания проб. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин при скорости 4 000 об./мин. Супернатант фильтруют через фильтр "красная лента" в коническую колбу объемом 250 с 5 г сухого хлористого натрия. Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 ацетонитрила, в тех же условиях. Супернатанты объединяют в конической колбе с хлористым натрием, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 мин. Затем содержимое колбы (без нерастворившейся соли) переносят в делительную воронку объемом 250 и выдерживают 5 мин. Выделившийся нижний водный слой отбрасывают, а верхний ацетонитрильный собирают в концентратор объемом 250 через слой безводного сульфата натрия, осушитель обмывают дополнительно 10 ацетонитрила, смыв объединяют с основным экстрактом и выпаривают досуха при температуре не выше 30°С.

Далее экстракт подвергают очистке на колонках с окисью алюминия.

9.2.2. Очистка экстракта на колонках с окисью алюминия

Сухой остаток, полученный по п. 9.2.1, растворяют в 5 гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат отбрасывают. Исходную колбу обмывают 15 гексана и вносят на колонку, элюат также отбрасывают. Просульфокарб элюируют с колонки 10 смеси гексана с ацетоном в соотношении 10 : 1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С.

Далее экстракт подвергают очистке на концентрирующих патронах Диапак Амин.

9.2.3. Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Амин

Сухой остаток, полученный по п. 9.2.2, растворяют в 5 гексана, тщательно обмывая стенки концентратора, и вносят на заранее кондиционированный патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 . Исходный концентратор обмывают 15 гексана, вносят на патрон, объединяют элюат с предыдущим в концентраторе объемом 100 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С.

Сухой остаток растворяют в 2 ацетонитрила, и 20 пробы вводят в хроматограф.

9.3. Условия хроматографирования

Хроматограф жидкостной Waters 515 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу, номер госрегистрации 15311-02 или другой с аналогичными характеристиками.

Колонка стальная XTerra MS С18, 150 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".

Предколонка стальная Symmetry C8, 20 мм х 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма "Waters".

Температура колонки: 30°С.

Скорость потока подвижной фазы: 1 .

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода в соотношении 500 : 400.

Длина волны: 220 нм.

Время удерживания Просульфокарба 12,535 мин .

Чувствительность не менее 0,005 AUFS (единиц абсорбции на шкалу).

Объем вводимой пробы: 20 .

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2 - 20 нг.

10. Обработка результатов

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Millenium 3.05.01. Альтернативная обработка результатов.

Содержание Просульфокарба рассчитывают по формуле:

, где

Х- содержание Просульфокарба в пробе, мг/кг или ;

- высота (площадь) пика стандарта, мм;

- высота (площадь) пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, ;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, ;

m - масса анализируемого образца, г ();

Р - содержание Просульфокарба в аналитическом стандарте, %.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

, где

(1)

, - результаты параллельных определений, мг/кг;

r - значение предела повторяемости (табл. 1), при этом .

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

,

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг"*.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки должна удовлетворять условию:

, где

- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

, где

- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

, где

- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры рассчитывают по формуле:

, где

, , - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

,

(2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

, где

(3)

, - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

14. Разработчики

Калинин В.А., профессор, канд. с-х. наук, Довгилевич Е.В., ст. н. сотр., канд. биол. наук, Довгилевич А.В., ст. н. сотр., канд. хим. наук, Устименко Н.В., ст. н. сотр., канд. биол. наук, Щербинкина Е.Н., инженер.

Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (495) 976-37-68, факс: (495) 976-43-26.

Методика прошла метрологическую экспертизу (Свидетельство об аттестации N 0058.29.11.10 от 01.12.2010 и внесена в Федеральный реестр (ФР.1.31.2011.09734).

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

_____________________________

* - 0,01 мг/кг - предел обнаружения.