Временное наставление по применению эритроцитарного антигена для диагностики пуллороза - тифа птиц по кровекапельной реакции непрямой гемагглютинации (ККРНГА) (утв. Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 8 апреля 1976 г.)

1. Пуллорный эритроцитарный антиген для кровекапельной реакции непрямой гемагглютинации (ККРНГА) представляет собой коричневого цвета жидкость, состоящую из 10%-ной взвеси формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных полисахаридно-полипептидной фракцией возбудителя пуллороза-тифа, на фосфатно-буферном растворе. В процессе хранения эритроциты выпадают в осадок, легко разбивающийся при встряхивании в гомогенную взвесь.

2. Эритроцитарпый антиген расфасован во флаконы. На каждом флаконе должна быть этикетка с указанием биопредприятия, изготовившего препарат, наименования биопрепарата и количества его во флаконе, даты изготовления, номера серии, контроля, срока годности и условий хранения.

3. Срок годности антигена - 9 месяцев со дня изготовления при условии хранения его в темном, сухом помещении при температуре 4-8°С. Антиген, подвергшийся замораживанию или содержащий хлопья, комочки, а также при нарушении целостности флакона, к применению непригоден.

4. Исследования птицы на пуллороз-тиф по ККРНГА проводят в возрасте 50-55 дней и повторно в возрасте 7 месяцев. При неблагополучии хозяйства по пуллорозу-тифу последующие исследования проводят в сроки, предусмотренные инструкцией о мероприятиях по борьбе с пуллорозом-тифом птиц.

5. Кровь для ККРНГА берут у птицы из гребня или подкрыльцевой вены. Каплю крови наносят на сухое, обезжиренное предметное стекло и добавляют к ней каплю антигена. Соотношение антигена и крови должно быть 1:1. Можно вначале на стекло нанести антиген и к нему добавить каплю крови. Последовательность нанесения компонентов реакции на предметное стекло не отражается на результатах исследования. Кровь смешивают с антигеном покачиванием предметного стекла на грелке-качалке при температуре 37-40°С. Температура в помещении, где ставят реакцию, должна быть не ниже 18°С. На одном предметном стекле ставят одновременно не более 3 реакций.

6. Реакцию на эритроцитарный антиген считают положительной, если в течение 2 минут в смеси крови с антигеном выпали хорошо заметные хлопья коричневого цвета.

Реакцию считают сомнительной, если в течение 2 минут в смеси крови с антигеном появились слабовыраженные мелкозернистые хлопья коричневого цвета.

Отрицательная реакция характеризуется образованием в капле крови с антигеном равномерной стабильной гомогенной взвеси эритроцитов барана.

7. Положительно и сомнительно реагирующую птицу изолируют и отправляют на убой.

8. Во избежание неспецифических реакций за 5-7 дней до исследования из рациона птицы исключают избыточное количество рыбьего жира, белка, антибиотики и другие лекарственные препараты.