Наставление по применению цветного антигена для диагностики пуллороза - тифа птиц реакцией агглютинации с каплей крови на стекле (ККРА) (утв. Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 13 декабря 1974 г. с изменениями от 15 июня 1976 г. взамен наставления от 26 августа 1964 г.)

1. Цветной антиген для ККРА представляет собой жидкость фиолетового цвета, состоящую из взвеси Sal. pullorum gallinarum с концентрацией 12-13 миллиардов микробных тел в 1 мл. Микробы в процессе хранения выпадают в осадок, легко разбивающийся при встряхивании в гомогенную взвесь.

2. Антиген хранят в темном и сухом помещении при температуре 2-15°С. При этих условиях хранения препарат пригоден для применения в течение восьми месяцев. Антиген, подвергавшийся замораживанию или содержащий хлопья и комочки, к применению непригоден.

3. Кровь для реакции берут у птицы из гребня или подкрыльцезой вены, делая укол скарификатором или инъекционной иглой, простерилизованными кипячением (отдельно для каждой птицы). Каплю крови наносят на обезжиренное, сухое и чистое предметное стекло и сразу же добавляют к ней пипеткой две капли антигена (соотношение крови и антигена 1:2); можно в начале на стекло наносить антиген и к нему добавлять каплю крови. Кровь с антигеном смешивают покачиванием предметного стекла на грелке-качалке при температуре 35-37°С. На одном предметном стекле ставят одновременно не более трех реакций.

Последовательность нанесения компонентов реакции на предметное стекло не отражается на результатах исследования.

Температура в помещении, где ставят реакцию, должна быть не ниже 18°С.

4. Реакцию агглютинации считают положительной при просветлении смеси антигена с кровью и появлении ясно выраженных фиолетовых хлопьев в срок от нескольких секунд до двух минут. При температуре в помещении ниже 18°С реакция может наступать в срок до трех минут.

Реакцию считают сомнительной при отсутствии или слабовыраженном просветлении и появлении зернистости или небольшого количества мелких хлопьев.

Отрицательная реакция характеризуется отсутствием хлопьев и просветлением в смеси антигена с кровью.

5. Положительно или сомнительно реагирующую птицу изолируют и направляют на убой.

6. За 7 дней до исследования из рациона птицы исключают избыточное количество белка, рыбий жир, антибиотики и другие лечебные препараты в целях избежания неспецифических реакций.

7. Исследования крови птиц по ККРА проводят в сроки, предусмотренные инструкцией о мероприятиях по борьбе с пуллорозом - тифом птиц.