Приложение 1. Методические указания по количественному определению ртути, кадмия, свинца, мышьяка, меди, цинка, олова и железа в пищевых продуктах

Приложение 1

Методические указания
по количественному определению ртути, кадмия, свинца, мышьяка, меди, цинка, олова и железа в пищевых продуктах

Методы определения ртути

Настоящие методические указания распространяются на пищевые продукты и пищевое сырье для их производства и устанавливают методы определения в них общей ртути.

1. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с действующими ГОСТами или Техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на деструкции анализируемой пробы, осаждении ртути йодидом меди и последующем визуальном колориметрическом определении в виде тетрайодомеркуроата меди путем сравнения со стандартной шкалой.

2.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Аппарат для минерализации из стекла "Пирекс" (см. рис.) или колба Кьельдаля вместимостью 200 мл с обратным холодильником длиной 35-50 см, соединенным с колбой на шлифе.

Баня водяная лабораторная ТУ 64-12850-76.

Бюретка на 50 мл.

Весы аналитические.

Весы лабораторные рычажные ГОСТ 19491-74.

Воронки стеклянные химические диаметром 30, 50, 70, 300 мм, ГОСТ 86-13-64.

Колбы конические плоскодонные термостойкие, емк. 500, 750 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы мерные на 500 и 1000 мл., ГОСТ

Пипетки емк. 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки стеклянные градуированные на 10, 15, 20, 25 мл, ГОСТ 10515-75.

Рис. Аппарат для определения ртути

1. Модифицированный экстрактор Сокслета диаметром 50 мм.

2. Капельная воронка.

3. Обратный холодильник, длиной 350 мм.

4. Реакционная колба для нагревания.

Градуированные пробирки для колориметрирования подбирают одинаковой формы и размера, они должны быть из бесцветного отекла.

Стаканы химические емк. 100 мл.

Цилиндры мерные емк. 25, 50, 100, 250 мл, ГОСТ 202292-74.

Посуда для приготовления взвеси йодида меди (стеклянная банка объёмом не менее 5 л).

Азотная кислота, конц., х.ч., ГОСТ 4461-67; плотн. 1520 .

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

Барий хлористый, х.ч., ГОСТ 4108-72; 20%-ный раствор.

Бумага индикаторная, универсальная pH 1-10, ТУ 6-09-1181-76.

Бумага фильтровальная лабораторная ГОСТ 12026-76.

Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72.

Йод кристаллический, ч.д.а., ГОСТ 4158-79; 0,35% и 0,25% растворы в 3% р-ре калия йодистого.

Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74; 3%-ный раствор.

Медь сернокислая, 5-водная, х.ч., ГОСТ 4165-78, 20% и 10% растворы.

Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76; 1% и насыщенный растворы.

Натрий сернистокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 195-66, 2,5 н раствор (свежеприготовленный, хранить не более 1 суток).

Ртуть двухлористая (сулема) по ГФХ СССР.

Ртуть азотнокислая ( по ГОСТ 4520-68.

Ртуть двуйодистая.

Серная кислота, конц., х.ч., ГОСТ 4204-77, плотн. 1840 .

Этиловый спирт ректификат, по ГОСТ 5962-67.

Фильтры обеззоленные (синяя лента) ТУ 6-09-1678-77.

Составной раствор. Раствор готовят только перед употреблением (за несколько минут), путем добавления к 1 объему 10% раствора сернокислой меди 5 объемов 2,5 н раствора сернокислого натрия. Смесь перемешивают до образования прозрачного, почти бесцветного раствора.

Взвесь йодида меди. Для получения 1 литра взвеси 212 г йодистого калия растворяют в 1-2 литрах дистиллированной воды, смешивают с 800 мл 20%-ного раствора сернокислой меди и оставляют до полного осаждения осадка (30-50 минут). С образовавшегося осадка декантируют жидкость. Осадок многократно промывают по 2-3 литра дистиллированной водой до светложелтого цвета надосадочной жидкости. Для удаления нежелательного розового оттенка осадка его отбеливают. Для этого в посуду со взвесью добавляют сначала 10-20 мл 2,5 н раствора сернокислого натрия, а затем 10-20 мл насыщенного раствора сернокиcлого натрия. Если взвесь отбелена недостаточно и плохо осаждается, добавление растворов следует повторить. Надосадочную жидкость сливают декантацией, а осадок переносят на двойной фильтр, сделанный из фильтровальной бумаги и плотно уложенный в большую стеклянную воронку (диаметр воронки 25-30 см). Промывают осадок на фильтре дистиллированной водой до отрицательной реакции фильтрата на сульфат-йон (проба фильтрата с 20% раствором хлористого бария не должна давать осадка). Затем фильтр прокалывают иглой, осадок смывают дистиллированной водой в мерную посуду и доводят объем до 1 л. Взвесь считается правильно приготовленной, если она имеет чистый белый цвет и оседает после взбалтывания в течение 15-20 минут. Хранят взвесь в темной склянке не более 1 месяца.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

2.2.1. Подготовка пробы

Подготовку пробы проводят "закрытым" или "открытым" способом.

2.2.1.1. "Закрытым" способом проводят анализ арбитражных проб. Для этого навеску исследуемого образца массой 40 г, взвешенную с погрешностью не более 0,01 г, помещают в колбу Кьельдаля и соединяют о обратным холодильником или помещают в реакционную колбу аппарата (см. рисунок). Перед минерализацией жировых продуктов рекомендуется добавить от 5 до 10 мл 10%-ного персульфата калия для обеспечения спокойного течения минерализации. Перед минерализацией мясных и рыбных продуктов добавляют 1 мл этилового спирта, 15 мл дистиллированной воды. Из капельной воронки через обратный холодильник (или боковую капельную воронку аппарата) добавляют 30 мл смеси концентрированных серной и азотной кислот (1:1). Массу осторожно нагревают на водяной бане при 60-70°С, избегая бурной реакции и чрезвычайного вспенивания. Через 15 мин. помещают колбу в кипящую водяную баню, и нагревание продолжают еще 1-2 часа (в зависимости от природы продукта). Если во время разложения начинается обугливание массы, необходимо добавить через обратный холодильник или специальную боковую воронку (небольшими порциями) азотную кислоту. После окончания минерализации реакционную колбу охлаждают, фильтрат переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

2.2.1.2. При производстве массовых анализов допускается ускоренное сжигание более быстрым "открытым способом", при котором могут происходить некоторые потери ртути (до 30%). /В случае, если полученные данные будут близки к предельным санитарным нормативам, определение повторяют "закрытым" способом по 2.2.1.1./.

Для сжигания "открытым" способом в коническую колбу вместимостью 750 мл вносят образец, затем в колбу добавляют 1 мл этилового спирта, дистиллированной воды до общего объема воды 45 мл с учетом естественной влаги в продукте (например, для мясных продуктов добавляют 15 мл, для зерновых - 40 мл) и 15 мл концентрированной азотной кислоты, перемешивают и оставляют на 10 минут при комнатной температуре. Колбу закрывают воронкой (диаметром 3 см) и по каплям (!) добавляют 20 мл концентрированной серной кислоты, регулируя скорость так, чтобы постоянно поддерживалась реакция разложения азотной кислоты, но при этом не происходило выделение окислов азота из горла колбы (пары окислов азота не должны подниматься выше половины высоты колбы, т.к. при бурном течении реакции возможны потери ртути). По окончании внесения серной кислоты колбу оставляют в вытяжном шкафу на 15 минут при комнатной температуре до прекращения выделения бурых паров окислов азота. Затем колбу нагревают 30-40 минут на кипящей водяной бане. При анализе мышечной ткани или образцов с большим содержанием жира, количество серной кислоты должно быть доведено до 25-30 мл и соответственно увеличено время нагревания до 45-60 минут. При бурном течении реакции (выделение окислов азота или сильное пенообразование) в колбу добавляют 30-50 мл кипящей дистиллированной воды или снимают ее на 1-2 минуты с водяной бани. Минерализацию проводят до полного просветления придонного слоя жидкости в колбе.

Горячий минерализат желтоватого цвета фильтруют в коническую колбу (объемом не менее 500 мл) через предварительно увлажненный двойной бумажный фильтр. Колбу из-под минерализата и фильтр несколько раз промывают кипящей (!) дистиллированной водой. Общий объем минерализата и промывных вод около 250-300 мл (на оставшийся на фильтре остаток не обращают внимания, т.к. он ртути не содержит). В случае необходимости полученный минерализат может быть оставлен на 10-20 часов (но не более) до последующих операций.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора ртути

2.2.2.1. 0,1354 г двухлористой ртути () помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки при постоянном перемешивании 0,5 н раствором соляной кислоты. Получают основной стандартный раствор, содержащий 0,2 мг ртути в 1 мл.

Непосредственно перед определением готовят рабочий стандартный раствор. Для этого 1 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят до метки 0,5 н соляной кислотой. Полученный стандартный рабочий раствор содержит 1 мкг ртути в 1 мл.

2.2.2.2. 1,708 г азотнокислой окисной ртути () растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в 20%-ной азотной кислоте (без окислов азота) и доводят 2%-ной азотной кислотой до метки. Получает основной стандартный раствор, содержащий 1 мг ртути в 1 мл. Далее получают промежуточный раствор. Для этого вносят 1 10 мл основного раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки 2% азотной кислотой (без окислов азота). Рабочий стандартный раствор ртути готовят непосредственно перед определением. Для этого 5 мл промежуточного раствора помещают в мерную колбу на 500 мл и доводят до метки 2% азотной кислотой (без окислов азота). В результате получают рабочий стандартный раствор содержащий 1 мкг ртути в 1 мл.

2.2.2.3. 0.226 г ртути двуйодистой () помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки при постоянном перемешивании 0,25% раствором йода. Получают основной стандартный раствор, содержащий 100 мкг ртути в 1 мл. Непосредственно перед определением готовится рабочий стандартный раствор. Для этого 1 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки 0,25% раствором йода. Полученный стандартный раствор содержит 1 мкг ртути в 1 мл.

2.2.3. Приготовление стандартной шкалы

На пробирках, отобранных для колориметрирования, наносят маркировку: 0; 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 1,75; 2,00 и 5,00. Затем в пробирки вносят точное количество рабочего раствора ртути, указанное в таблице 1, доводят объем до 6 мл 0,25% раствором йода, добавляют 3 мл свежеприготовленного составного раствора и тщательно перемешивают.

Таблица 1

Схема подготовки стандартной шкалы

Количество рабочего раствора ртути (мл)	Количество 0,25% р-ра йода	Содержание ртути (мкг)
0	6,0	0
0,25	5,75	0,25
0,50	5,50	0,50
0,75	5,25	0,75
1,00	5,00	1,00
1,25	4,75	1,25
1,50	4,50	1,50
1,75	4,25	1,75
2,00	4,00	2,00
5,00*	1,00	5,00

_____________________________

* Пробирку шкалы с содержанием ртути 5 мкг используют для ориентировки при планировании хода повторного анализа образцов с концентрацией более 2 мкг.

2.3. Проведение испытаний

В минерализат, полученный по 2.2.1. сначала добавляют 10-15 мл 2,5 н раствора сернистокислого натрия, а затем для осаждения ртути - 10 мл взвеси йодида меди. Если взвесь йодида меди окрасится в розовый или оранжевый цвет, то дополнительно добавляют еще 30 мл взвеси для полного осаждения ртути.

Содержимое колбы тщательно перемешивают и оставляют до полного осаждения осадка. Если образующийся осадок окрашен в ярко-розовый или кирпично-красный цвет, что свидетельствует о содержании ртути в образце более 25 мкг, анализ повторяют, уменьшив навеску в 2 раза. Соответственно уменьшают и количество кислот для минерализации.

Через час максимально возможную часть надосадочной жидкости сливают, стараясь не взмутить осадок, и отбрасывают. К осадку добавляют 10-15 мл 1% раствора сернокислого натрия, взбалтывают и переносят на увлажненный однослойный бумажный фильтр (синяя лента), плотно уложенный в воронку диаметром не более 5-6 см. Края фильтра должны на 2-3 мм выступать из воронки. Колбу из-под осадка несколько раз ополаскивают 1% р-ром натрия сернокислого и сливают на тот же фильтр с тем, чтобы весь осадок был перенесен на фильтр.

Когда вся жидкость стечет через фильтр, осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетона с 1% р-ром сернокислого натрия в соотношении 1:1. По прохождении смеси через фильтр, осадок и фильтр промывают 1% раствором сернокислого натрия.

Отмывание осадка производят до исчезновения желтой окраски промывных вод и до pH не менее 5 (устанавливают по универсальной индикаторной бумаге). Промывные воды отбрасывают. Полоской фильтровальной бумаги удаляют снизу остатки жидкости из узкой части воронки и осадок подсушивают на воздухе в течение 15 минут. Затем его обрабатывают на фильтре определённым объемом 0,35% раствора йода в зависимости от цвета осадка (табл. 2). Для этого необходимое количество раствора йода отмеряют в цилиндр или пробирку и проводят обработку фильтра небольшими порциями из пипетки (по 1-2 мл), нанося жидкость по краю фильтра (не касаясь фильтра). Полученный фильтрат доводят до объёма () 10, 15 или 25 мл в зависимости от цвета осадка. Фильтрат можно хранить в пробирках с притертыми пробками в темном месте в течение суток.

Таблица 2

Ориентировочная схема проведения анализа

Цвет осадка	Примерное содержание ртути в образце (мкг)	Объем 0,35% раствора йода для обработки осадка	Объем раствора ртути для калориметрирования - аликвотные части (мл)
Белый	0-5	10	6 и 4
С розоватым оттенком	5-15	15	3 и 1
Бледно-розовый	15-25	25	1, 2 и 3
Ярко-розовый	свыше 25	Повторить деструкцию, уменьшив навеску

Для проведения испытаний точно отмерянную честь раствора () (cм. табл. 2, крайнюю правую графу) помещают в пробирки для колориметрического определения и доводят до 6 мл 0,25% раствором йода. Затем прибавляют в пробирки (лучше всего из бюретки) по 3 мл свежеприготовленного составного раствора, закрывают пробками и перемешивают.

Количественное определение ртути производят через 15 минут путем визуального сравнения цвета осадка в пробирке пробы с пробирками стандартной шкалы. Рекомендуется сравнение проводить на белом фоне при дневном свете. Для этого жидкость осторожно переводят на пробку, а цвет осадка на дне пробирки сравнивается с цветом осадка стандартов.

2.4. Обработка результатов

Содержание ртути (С) в мг/кг определяют по формуле:

, где

С - содержание ртути в образце, мг/кг.

А - количество ртути в анализируемой пробе, определённое по стандартной шкале, мкг.

V - объём 0,35% растворе йода, использованного для обработки осадка на фильтре, мл.

- объём аликвотной части анализируемой пробы, взятой для калориметрирования, мл.

М - масса образца, г.

За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью 0,001. Допустимое расхождение параллельных определений - не более 15%.

Конечный результат анализа выражают с точностью 0,001 мг/кг.

Минимальное содержание ртути, определяемое данным методом - 0,005 мг/кг.

3. Атомно-абсорбционный метод

Настоящий метод определения общей ртути распространяется на рыбу и рыбные продукты. Метод основан на определении поглощения селективной линии ртути, интенсивность которого определяется на атомно-абсорбционном фотометре.

3.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Анализатор ртути или атомно-абсорбционный спектрофотометр с устройством для определения ртути.

Весы лабораторные рычажные по ГОСТ 19491-74.

Аппарат для минерализации из стекла "Пирекс", прилагаемый к анализатору, или аппарат, представленный на рис. в 2.1. или колба Кьельдаля вместимостью 200 мл с обратным холодильником длиной 35-40 см, соединенным с колбой на шлифе.

Баня водяная.

Воронка стеклянная по ГОСТ 8613-64 диаметром от 70 до 90 мм.

Кислота серная х.ч., по ГОСТ 4204-77, плотностью 1840 и 18 н раствор.

Кислота азотная, х.ч. по ГОСТ 4461-67, плотностью 1400 и 5,6 н раствор.

Олово двухлористое ч.д.а., по ГОСТ 36-68, 10%-ный раствор.

Вода дистиллированная или деминерализованная.

Калий марганцевокислый х.ч., по ГОСТ 20490-75, и 5%-ный раствор.

Гидроксиламин гидрохлорид ч.д.а., по ГОСТ 5456-65 и 1,5% раствор.

Калий персульфат ч.д.а., по ГОСТ 4146-65, 10%-ный раствор.

В мерную посуду вместимостью 100 мл дистиллированной воды, добавляют 24 мл концентрированной серной кислоты и доводят объём дистиллированной или деминерализованной водой до метки.

Ртуть азотнокислая окисная (по ГОСТ 4520-68.

Ртуть двухлористая по ГФ X СССР.

Фильтр бумажный.

Масло силиконовое.

Примечание. Вся стеклянная посуда должна быть вымыта сначала горячей азотной кислотой (1:1), а затем выполоскана водопроводной и дистиллированной или деминерализованной водой.

3.2. Подготовка к испытанию

3.2.1. Подготовка пробы

Навеска образца массой около 3-20 г, отвешенная с погрешностью не более 0,01 г помещается в колбу вместимостью 250 мл для минерализации. Перед минерализацией жировых продуктов рекомендуется добавить от 5 до 10 мл 10%-ного раствора персульфата калия для обеспечения более спокойного течения минерализации.

В колбу для минерализации добавляют 15 мл смеси концентрированных азотной и серной кислот (1:1), немедленно соединяют её с обратным холодильником и помещают на водяную баню с температурой от 60 до 70°С на 15 мин. (Допускается внесение смеси кислот через обратный холодильник). Затем колбу опускают на 5 мин в кипящую водяную баню. При использовании навесок образца более 5 г (в случае анализа продуктов с малым содержанием ртути) длительность кипячения может быть увеличена до 2 часов. После окончания кипячения в колбу осторожно добавляют через специальный отвод или обратный холодильник 30 мл дистиллированной или деминерализованной воды и оставляют в кипящей водяной бане ещё на 20 минут. Горячий минерализат фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл через стеклянную вату или двойной бумажный фильтр.

После фильтрования колбу из-под минерализата и фильтр промывают горячей (почти кипящей) водой, собирая промывные воды в ту же мерную колбу.

Жидкость охлаждают, объём в колбе доводят до метки дистиллированной водой. В дальнейшем минерализат полностью используется для исследований.

Примечание. При необходимости минерализованные пробы можно оставлять до 24 ч.

3.2.2. Приготовление стандартных растворов ртути

Приготовление стандартных растворов ртути проводят по 2.2.2.

3.2.3. Построение градуировочного графика

В склянку прибора для определения ртути помещают 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4 и 1,6 мл рабочего стандартного раствора ртути. Затем в каждую склянку добавляют при помешивании раствор марганцевокислого калия (или порошок перманганата калия на кончике шпателя) в количестве, обеспечивающем полное окисление исследуемого образца (от 15 до 20 мл; раствор должен приобрести коричневую окраску). Пробу оставляют на 5 минут, затем добавляют 5 мл раствора азотной кислоты и перемешивают 15 сек. После этого добавляют 5 мл раствора серной кислоты и выдерживают, периодически помешивая 45 сек.

Для удаления избытка марганцевокислого калия к пробе добавляют не меньше 5 мл раствора солянокислого гидроксиламина (или порошок солянокислого гидроксиламина на кончике шпателя) до тех пор, пока раствор не станет совершенно прозрачным. Затем приливают 5 мл раствора двухлористого олова и сразу (иначе будут потери) в склянку вводят барботер (аэратор). Ртуть, испаряясь, циркулирует по системе аэратора или при подсоединении к атомному спектрофотометру проходят через измерительную кювету прибора. Интенсивность поглощения паров ртути определяется по шкале прибора при длине волны 253,7 нм. Одновременно проводится холостой опыт с использованием тех же реактивов, но без добавления стандартного рабочего раствора ртути. По полученным данным строится калибровочный график.

3.3. Проведение испытания

Для проведения испытаний используют минерализат, полученный по 3.2.1. Для этого его целиком переносят в склянку прибора анализатора (или соответствующую склянку к приставке к атомному спектрофотометру). Затем в склянку добавляют при помешивании раствор марганцевокислого калия (или на шпателе порошок марганцевокислого калия) в количестве, обеспечивающем полное окисление исследуемого образца (обычно в пределах 15-20 мл 5% раствора). Пробу оставляют на 5 минут, затем добавляют 5 мл 5,6 н раствора азотной кислоты и перемешивают 15 сек. После этого добавляют 5 мл 18 н раствора серной кислоты и перемешивают периодически 45 сек.

Для удаления избытка марганцевокислого калия к пробе добавляют не менее 5 мл раствора солянокислого гидроксиламина (или порошка солянокислого гидроксиламина на кончике шпателя) до тех пор, пока раствор не станет совершенно прозрачным. Затем приливают 5 мл раствора двухлористого олова и сразу (иначе будут потери!) в склянку вводят барботер (аэратор) прибора.

Ртуть, испаряясь, циркулирует по системе аэратора или проходит через измерительную кювету без циркуляции. Количество ртути определяется по шкале прибора или по калибровочному графику. В качестве холостого опыта используют минерализат, полученный по 3.2.1, но без исследуемого образца, с которым проводят все операции, предусмотренные выше.

Примечание. В случае если при анализе происходит вспенивание образца, для гашения пены перед добавлением двухлористого олова в склянку вносят 1 каплю силиконового масла.

3.4. Обработка результатов

Содержание ртути (С) в мг/кг или мг/л определяют по формуле:

, где

А - содержание ртути в исследуемом образце, найденное по градуировочному графику, мкг.

- содержание ртути в холостом опыте, мкг.

М - масса образца, взятого для минерализации, г или мл.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженное с точностью до 0,001. Допустимое расхождение результатов параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,001 мг/кг. Минимальное содержание ртути, определяемое данным методом, - 0,005 мг/кг.

Методы определения кадмия

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты и пищевое сырье для их производства и устанавливают метод определения в них кадмия.

1. Отбор проб

Отбор проб для испытаний проводится в соответствии с действующими ГОСТами или техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на реакции кадмия с дитизоном с образованием розово-окрашенного комплексного соединения, которое экстрагируют хлороформом. Интенсивность окраски экстрагированного соединения определяют фотометрически.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы и растворы

Фотоэлектроколориметр, имеющий светофильтр с максимумом пропускания 515 нм.

Аппарат для перегонки органических растворителей.

Баня водяная электрическая.

Баня песчаная электрическая.

Бюретка стеклянная с краном, ёмкостью 25 мл.

Весы лабораторные по ГОСТ 19491-74.

Печь муфельная с терморегулятором.

Колба для перегонки по ГОСТ 10394-72.

Плитка электрическая по ГОСТ 306-76.

Стаканы химические жаростойкие на 100 и 200 мл.

Часы песочные на 1 и 3 мин по ГОСТ 10576-74.

Штатив для сжигания по Кьельдалю.

Эксикатор вакуумный по ГОСТ 6371-73.

Вата гигроскопическая медицинская по ГОСТ 10477-75, свободная от металлов: 10 г ваты погружают в 100 мл теплой 0,2 н соляной кислоты и выдерживают 24 часа. Затем фильтруют на воронке Бюхнера, промывают 500 мл бидистиллята и высушивают.

Фильтры беззольные (белая лента) диаметром 5 и 7 см по ТУ 6-69-1678-72.

Воронка Бюхнера.

Воронки делительные 100, 200, 500, 1000 и 2000 мл по ГОСТ 8613-75.

Воронки для фильтрования NN 3, 5 по ГОСТ 8613-75.

Колбы круглые плоскодонные вместимостью 200 мл из стекла "пирекс" по ГОСТ 10394-72.

Поcуда мерная стеклянная лабораторная по ГОСТ 1770-74 и ГОСТ 20292-74 вместимостью: колбы мерные 25, 50, 100, 500, 1000 мл; пипетки 0,1; 1, 2, 5, 10, 25 мл с делениями 0,002; 0,01; 0,1 мл; цилиндры измерительные 25, 50, 100 мл с притертыми пробками.

Чашки фарфоровые выпарительные вместимостью 150-500 мл по ГОСТ 9147-73.

Колбы Кьельдаля, вместимостью 100 и 250 мл по ГОСТ 10394-72.

Бидистиллят. Получают повторной перегонкой дистиллированной воды в стеклянном аппарате. Применяется для приготовления всех реактивов и для разбавления проб.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

Дитизон по ГОСТ 10165-79, ч.д.а. или импортный. Реактив используют без предварительной очистки, если 0,01%-ный раствор дитизона в четыреххлористом углероде (или хлороформе) после встряхивания с разбавленным (1:100) раствором аммиака (аммиак не должен содержать металлов) дает очень слабую желтую окраску.

При необходимости дитизон очищают следующим образом: 0,20 г дитизона растворяют (допускается растирание в фарфоровой чашке с небольшим количеством растворителя) в 400 мл четыреххлористого углерода (или в 100 мл хлороформа). Переносят раствор в делительную воронку вместимостью 1 л (или 500 мл в случае хлороформа), добавляют 200 мл бидистиллированной воды, 2,0 мл 25%-ного или 3,5 мл 14-15% раствора аммиака, встряхивают в течение 2-3 мин; после расслаивания жидкостей органический слой отбрасывают. Аммиачный раствор дитизона затем дважды промывают 5-10 мл четыреххлористого углерода (или хлороформа). К аммиачному раствору дитизона добавляют 2,0 мл концентрированной соляной кислоты и 400 мл четыреххлористого углерода (или 100 мл хлороформа), встряхивают 1-2 мин. После разделения слоев раствор дитизона в органическом растворителе отделяют и дважды промывают от соляной кислоты 200 мл бидистиллированной воды. Затем раствор дитизона переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят до метки четыреххлористым углеродом или хлороформом. В результате получают основной 0,02%-ный раствор дитизона. Его хранят в темной склянке и в холодильнике не более 1 месяца.

Аммиак по ГОCТ 3760-79 о.с.ч. (без очистки) или х.ч., очищенный изотермической перегонкой. Для этого на дно эксикатора помещают 500 мл концентрированного раствора аммиака х.ч., добавляют 2-3 г едкого калия или едкого натрия, на фарфоровый вкладыш помещают чашку с 250 мл бидистиллированной воды. Эксикатор закрывают крышкой и выдерживают при комнатной температуре 4-5 дней. В результате получают 14-15%-ный раствор аммиака.

Кислота соляная о.с.ч. или х.ч., по ГОСТ 3118-77, плотностью 1,19 .

Углерод четыреххлористый х.ч. или ч.д.а. по ГОСТ 20288-74. Растворитель используют без предварительной очистки, если 0,001-0,002%-ный раствор дитизона в четыреххлористом углероде не обесцвечивается при стоянии в темноте в течение 2-3 часов. Если раствор обесцветился, то четыреххлористый углерод очищают следующим образом: в склянку с притертой пробкой вместимостью 1 л помещают 500 мл четыреххлористого углерода и 10 г активированного угля. Встряхивают склянку в течение 5 мин и отфильтровывают четыреххлористый углерод в сухую склянку. Затем процедуру повторяют с новой порцией активированного угля. Обработанный дважды активированным углем четыреххлористый углерод перегоняют в стеклянном перегонном аппарате, собранном на шлифах.

Хлороформ х.ч. по ГОСТ 3160-51 перегоняют, собирая отгон в этиловый спирт, который добавляют из расчета 10 мл спирта на 1 л растворителя.

Индикатор тимоловый синий, ч.д.а по ГОСТ

Индикаторная бумага универсальная, ТУ МХП ОРУ 76-56.

Кадмий металлический, ч.д.а. по ТУ 6-09-3097-73

Кадмий хлористый, ч.д.а.

Катионит КРС-8п, ТУ 6-09-10-151-79 или Дауэкс-50.

Подготовка катионита к работе. Катионит, не бывший в использовании, выдерживают в химическом стакане 1 сутки в насыщенном растворе хлористого натрия. Затем раствор соли сливают и 3-4 раза промывают 5%-ным раствором соляной кислоты и в конце промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции. Промытую таким образом смолу помещают в бюретку на 25 мл с краном (предварительно на низ бюретки помещают кусочек промытой стекловаты). Для этого смолу с водой взбалтывают и взвесь заливают через воронку в бюретку. Взвесь добавляют в колонку до тех пор, пока высота слоя смолы не составит 15 см. Затем, для перевода смолы в Н-форму колонку промывают последовательно 5, 10 и 15% раствором соляной кислоты (по 25-30 мл каждой) до полного удаления ионов железа в элюате (проба с роданистым аммонием не дает окраски).

Далее смолу отмывают от ионов хлора бидистиллированной водой (проба с азотнокислым серебром не дает осадка).

Регенерация смолы проводится через каждые 7 анализов.

Для этого колонку сначала промывают по 25 мл 5 и 10%-ным раствором едкого натрия, затем бидистиллированной водой до нейтральной реакции элюата и далее последовательно 5, 10 и 15% раствором соляной кислоты и бидистиллированной водой как описано выше.

Кислота азотная, х.ч. по ГОСТ 4461-67, плотностью 1,40 .

Кислота лимонная, х.ч. по ГОСТ 3652-69.

Кислота серная, х.ч. по ГОСТ 4204-77, плотностью 1,84 .

Пергидроль (перекись водорода) х.ч. по ГОСТ 10979-64.

Натрия гидроокись, х.ч. по ГОСТ 4328-66.

Натрий хлористый, х.ч., насыщенный раствор.

Спирт этиловый ректификованный.

Аммония оксалат, насыщенный при 20° водный раствор.

Дитизон, рабочий раствор в хлороформе, 0,005 мг/мл. Готовят разбавлением исходного 0,02%-ного раствора в 4 раза очищенным хлороформом.

Индикатор тимоловый синий, 0,1 мг/мл.

Дли этого 100 мг индикатора вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 10 мл 20%-ного этилового спирта, 0,5 мл 0,05 н гидроокиси натрия и после растворения реагента доводят объем до метки 20%-ным этанолом.

Примечание. Для приготовления растворов и проведения анализов используют бидистиллированную воду.

Вся лабораторная стеклянная посуда, используемая при определении, заранее проверяется на устойчивость к действию дитизона.

Для этого вся стеклянная лабораторная посуда (мерные колбы, пипетки, стаканы и др.) тщательно промывается хромовой смесью, затем концентрированной азотной кислотой, несколько раз дистиллированной водой и дважды бидистиллятом, высушивают, а затем промывают 0,001%-ным раствором дитизона в хлороформе и оставляют посуду, заполненную раствором дитизона на 1 час. Изменение окраски раствора свидетельствует о неустойчивости стекла к действию дитизона.

При изменении окраски, даже незначительном, проводят несколько раз обработку стекла 0,02% раствором дитизона в хлороформе, затем промывают хлороформом и снова заливают 0,001% раствором дитизона в хлороформе на 1 час. Стеклянную посуду, неустойчивую к действию дитизона, использовать для проведения испытаний не разрешается.

Вместо хлороформа в качестве растворителя можно использовать четыреххлористый углерод.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1. Подготовка проб

Для большинства продуктов методика подготовки проб является одной и той же. Исключение составляют: 1) напитки типа вина, пива, фруктовых вод и прозрачных соков; 2) жировые продукты типа растительного и животного масла, их производные и продукты, в которых они преобладают.

2.2.1.1. При анализе большинства продуктов (кроме напитков и жировых продуктов) используют как сухое, так и мокрое озоление по следующим прописям.

2.2.1.1.1. Сухое озоление

В связи с тем, что некоторые соединения исследуемого элемента, например, хлориды, летучи, при озолении их переводят в менее летучие нитраты.

Озоление продуктов с влажностью более 15% начинают с высушивания образца в сушильном шкафу при 105° или на водяной бане (параметры высушивания зависят от вида продукта).

Пробу (20-50 г в зависимости от предполагаемого содержания элемента в продукте) обугливают на электрической плитке (можно дополнительно облучать ИК-лампой) и затем помещают в холодную муфельную печь. Затем постепенно увеличивают температуру муфеля до 450°. После получения бурой золы её смачивают разбавленной азотной кислотой (1:1), квалификации о.с.ч., или к золе добавляют несколько капель дистиллированной воды и затем столько же капель азотной кислоты. Полученный образец золы подсушивают на электроплитке и далее снова помещают в охлажденную до 200° муфельную печь и озоляют до получения белой золы. В необходимых случаях обработку азотной кислотой повторяют несколько раз. Полученную белую золу далее используют целиком, без каких-либо разбавлений, для проведения испытаний.

Примечание. Если при озолении использовалась азотная кислота иной квалификации, чем о.с.ч., то проводят с ней холостой опыт в количестве, эквивалентном использованному при сжигании.

2.2.1.1.2. Мокрое озоление

В колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 20-30 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивает навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляет азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (соотношение зависит от вида продукта); образец оставляют для обугливания на 15-30 мин. Затем осторожно добавляют сначала азотную, а затем серную кислоту в количестве равном первоначальному, и далее образец нагревают (при необходимости можно оставить образец на 18-20 час для предварительного обугливания, после чего производить кипячение). Кипячение образца проводят 0,5-2 часа. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному, или последовательно азотную, серную и хлорную кислоты (в отношении 2:1:1), или азотную, серную и 30% перекись водорода (2:1:1) и кипятят до обесцвечивания. (Внимание! Хлорную кислоту всегда добавляют последней!). Следует обращать внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 3-4 мл жидкости.

Для удаления остатков кислот, которые мешают дальнейшему анализу, проводят их удаление. Для этого в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Полученный прозрачный раствор используют в дальнейшем целиком, без каких-либо разбавлений, для проведения испытаний.

Примечание. Холостой опыт (все реактивы за исключением образца) обязателен перед нечалом работы или замены партии хотя бы одного реактива.

2.2.1.2. При анализе напитков производят сухое или мокрое озоление.

2.2.1.2.1. Сухое озоление

Напитки выпаривают досуха на водяной бане или сушильном шкафу и далее следуют по 2.2.1.1.1.

2.2.1.2.2. Мокрое озоление

50 мл напитка отмеривают в колбу Кьельдаля и добавляют для напитков с содержанием сахара до 1 г/100 мл на 25 мл пергидроля, для остальных напитков - 50 мл пергидроля, нагревают до кипения и далее следуют по одной из следующих прописей:

Напитки с содержанием сахара от 1 до 10 г/100 мл кипятят, пока не останется 5-6 мл, затем колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают пока не останется 2-3 мл жидкости.

Напитки с содержанием сахара от 10 до 13 г/100 мл, кипятят, пока не останется 5-6 мл, охлаждают, добавляют ещё 10 мл пергидроля, кипятят до 5-6 мл и выпаривают в кипящей водяной бане до 2-х - 3-х мл.

Напитки с содержанием сахара от 13 до 22 г/100 мл, кипятят, пока не останется 10-15 мл, охлаждают, добавляют 25 мл пергидроля, вновь кипятят до 5-6 мл и выпаривают в водяной бане до 2-х - 3-х мл.

Напитки с содержанием сахара выше 22 г/100 мл кипятят, пока не останется около 20-25 мл, вносят 25 мл пергидроля, кипятят до получения 10 мл и эту операцию повторяют, если жидкость при доведении до объёма 10 мл темнеет. Затем колбу помещают в кипящую водяную баню и жидкость выпаривают до 2-х - 3-х мл. Полученный в результате минерализации раствор в дальнейшей целиком, без каких-либо разбавлений, используется для проведения испытаний.

Примечание. 1. В случае, если при выпаривании на водяной бане жидкость потемнеет, то после охлаждения добавляют еще 10 мл пергидроля, кипятят до получения 5-6 мл жидкости и вновь выпаривают в водяной бане до 2-х - 3-х мл.

2. Во избежание воспламенения пергидролем органических веществ кипячение следует проводить при умеренном нагревании и оставлять не менее того же количества жидкости, которое указано выше. При выпаривании в водяной бане колба не должна касаться дна бани. Нагревание с пергидролем проводят в вытяжном шкафу.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов используют только мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жиростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл концентрированной азотной кислоты и 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл и продолжают нагревание. Полученный остаток целиком используется для исследований.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора кадмия

Стандартный раствор кадмия готовится одним из следующих способов.

2.2.2.1. 100,0 мг чистого металлического кадмия растворяют в 3 мл азотной кислоты (1:9) в фарфоровой чашке. Жидкость удаляют выпариванием. Затем в чашку вносят 1 мл 6 н соляной кислоты и раствор выпаривают досуха. После этого вносят 1 мл бидистиллята и снова выпаривают раствор досуха. Остаток соли растворяют в бидистилляте, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём до метки бидистиллятом. В результате получают основной стандартный раствор, содержащий 1 мг кадмия в 1 мл. Затем готовят промежуточный стандартный раствор. Для этого 10 мл основного раствора вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки 0,2 н соляной кислотой. Рабочий стандартный раствор готовят непосредственно перед определением. Для этого 5 мл промежуточного раствора вносят в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки 0,2 н соляной кислотой. Полученный рабочий стандартный раствор содержит кадмия 1 мкг в 1 мл.

2.2.2.2. 163,0 мг хлористого кадмия помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Полученный основной стандартный раствор содержит 0,1 мг кадмия в 1 мл.

Рабочий стандартный раствор готовят непосредственно перед определением. Для этого 5 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Полученный рабочий стандартный раствор содержит кадмия 1 мкг в 1 мл.

2.2.3. Построение градуировочного графика

В ряд делительных воронок вместимостью 200 мл вносят рабочий стандартный раствор кадмия в количеств 0, 1, 2,5, 5, 10, 15, 20 и 25 мл. Объём раствора доводят до 40 мл 0,2 г соляной кислотой. Затем добавляют 5 мл 20%-ного раствора гидроокиси натрия и 5 мл раствора дитизона в хлороформе (0,005 мг/мл). Экстрагируют в течение 3 минут. Затем экстрагируют по 5 мл раствором дитизона в хлороформе до тех пор, пока раствор хлороформа не перестанет окрашиваться в розовый цвет. Объединенные хлороформенные экстракты дитизоната кадмия собирают в мерную колбу на 25 мл, фильтруя через гигроскопическую вату и доводят хлороформом до метки. Колориметрирование проводится очень быстро при длине волны 515 нм.

Холостой опыт проводят со всеми реактивами, но без стандартного раствора кадмия.

2.3. Проведение испытания

К минерализату, полученному по 2.2.1, добавляют 100-150 мл бидистиллята. Далее раствор пропускают через подготовительную ионообменную колонку со скоростью 1 мл в минуту. Элюат отбрасывают. Далее колонку промывают 15 мл бидистиллированной воды. Затем кадмий вымывают с помощью 100 мл 0,2 н соляной кислоты (со скоростью 1 мл в минуту).

Элюат, содержащий только раствор кадмия, помещают в химический стакан и выпаривают до объёма 2-5 мл. Затем приливают 5 мл 20%-ного раствора гидроокиси натрия и 5 мл раствора дитизона в хлороформе (0,005 мг/мл). Экстракцию проводят несколько раз в течение 3 минут до тех пор, пока органический слой не перестанет окрашиваться в розовый цвет. Экстракты помещают в мерную колбу на 25 мл и доводят хлороформом до метки. Дитизоновый раствор фотометрируют при 515 нм в кювете толщиной 5 см. По градуировочному графику находят содержание элемента в пробе.

В качестве холостого опыта используют образец минерализата, полученного по 2.2.1., но без исследуемого образца, с которым проделывают все операции, предусмотренные в настоящем разделе.

2.4. Обработка результатов

Содержание кадмия (С) в мг/кг или мг/л в анализируемом образце рассчитывается по формуле:

, где

А - количество элемента в исследуемом растворе, найденное по калибровочному графику, мкг;

М - масса образца, взятого для испытания, г или мл;

За результат анализа принимается среднее значение результатов 2-3 параллельных определений. Результат анализа выражается с точностью до 0,001 мг/кг. Минимальное содержание кадмия, определяемое вышеуказанным способом - 0,01 мг/кг.

3. Полярографический метод

Метод основан на полярографическом определении кадмия в режиме переменного тока.

3.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Весы лабораторные рычажные по ГОСТ 19491-74.

Полярограф марки ППТ-1 или других аналогичных марок.

Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Колбы конические вместимостью 10, 25 и 250 мл по ГОСТ 23932-79Е.

Кислота азотная, о.с.ч., по ГОСТ 11125-78 или х.ч., по ГОСТ 4461-77, плотностью 1,4 , и разбавленная бидистиллированной водой 1:1 и 1:2 (по объёму).

Кислота ортофосфорная, х.ч., по ГОСТ 6552-58, плотностью 1,88 , разбавленная бидистиллированной водой 1:3 (по объёму).

Кислота соляная, о.с.ч. или х.ч., по ГОСТ 3118-77, плотностью 1,19 и разбавленная бидистиллированной водой 1:1 (по объёму).

Кислота хлорная, х.ч., по МРТУ 6-09-6604-70, плотностью 1,15 , 57%-ный и 30%-ный растворы и 1 М раствор.

Кали едкое, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4203-65, 60%-ный раствор.

Пирогаллол, ч.д.а., по ГОСТ 10451-63, или пирогаллол А, ч.д.а., по ГОСТ 6408-52, 25%-ный раствор.

Кадмий металлический, ч.д.а., по ТУ 6-09-3097-73.

Кадмий хлористый, ч.д.а.

Ртуть металлическая, P-О, по ГОСТ 4658-73.

Вода бидистиллированная.

Азот газообразный, о.с.ч., по ГОСТ 9293-74 или любой другой инертный газ, свободный от кислорода. При наличии примеси кислорода газ пропускают через поглотительную смесь, состоящую из 25%-ного раствора пирогаллола и 60%-ного раствора едкого калия в соотношении 1:5 (по объёму).

3.2. Подготовка к испытаниям

3.2.1. Подготовка пробы

Для подготовки используется только сухое озоление. При этом для большинства продуктов, кроме напитков и жировых продуктов озоление проводится по 2.2.1.1.1., для напитков по 2.2.1.2.1., для жировых продуктов озоление проводится по 2.2.1.3.

3.2.2. Приготовление стандартного раствора кадмия

Стандартный раствор кадмия готовят no 2.2.1.

3.2.3. Приготовление фоновых растворителей

3.2.3.1. Фоновый электролит А - 1 н хлорная кислота (используется для анализа зерно-бобовых, хлеба, кондитерских изделий и напитков). 176,2 мл 57%-ной хлорной кислоты разводят до 1 л бидистиллированной водой.

3.2.3.2. Фоновый электролит В - 1 н ортофосфорная + 0,5 н хлорная кислота (используется для анализа консервов, мяса и мясопродуктов, рыбы и рыбопродуктов). Смешивают разбавленную ортофосфорную кислоту, 30%-ную хлорную кислоту и бидистиллированную воду в соотношении 3:2:5. (по объёму).

3.2.3.3. Фоновый растворитель С - 0,1 н соляная кислота (используется для анализа мяса птицы, птицепродуктов и яичных продуктов). Для этого 3,7 мл концентрированной соляной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

3.3. Проведение испытания

3.3.1. Определение проводят на полярографе, в режиме переменного тока с ртутно-капельным электродом в электролизере вместимостью от 5 до 25 мл. Ячейку электролизера предварительно тщательно промывают дистиллированной водой, фоновым электролитом и затем поляризуемым раствором. Чистота ячейки и фонового раствора может быть проконтролирована полярографированием фона.

Запись полярограмм проводят в диапазоне от минус 0,5 до минус 1,0 относительно донной ртути) в режиме "анализа ", тест-регистрации, синхронизации, равной 2-3, амплитуде переменного тока 4-12 мВ, скорости развертки 2-5 мВ/сек, скорости диаграммной ленты 720-1800 мм/час. Время задержки должно составлять примерно две трети времени жизни капли.

Чувствительность записи от 0,5 х 100 до 4 х 100 в зависимости от содержания металла в пробе.

Пик восстановления кадмия относительно донной ртути находится при потенциале около минус 0,7-0,9 в зависимости от электролитического фона и состава золы.

Получив полярограмму, определяют высоту пика и проводят расчет содержания кадмия в пробе по методу добавок.

Контроль чистоты тиглей и реактивов осуществляют в виде "холостой пробы" и вносят соответствующие поправки в результаты анализа. Рекомендуется проверять каждую новую партию реактивов.

3.3.2. Проводят предварительно подготовку минерализата.

Для этого к минерализату, полученному по 2.2.1. (целиком, без каких-либо разбавлений) добавляют осторожно 2 мл хлорной кислоты и нагревают на кипящей водяной бане в течение 5 мин. Охлажденный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 5 или 25 мл и доводят до метки фоновым растворителем, приготовленным по 3.2.3.

3.3.3. Определение кадмия в пробе проводят методом добавок. Для этого в две одинаковые конические колбы вместимостью 10, 25 или 50 мл (в зависимости от предполагаемого содержания металла) помещают 4 или 10 мл минерализата, подготовленного по 3.2.3. В первой колбе доводят объем до 5 или 15 мл, в зависимости от объёма электролизера, фоновым электролитом, и пропускают инертный газ для удаления кислорода в течение 10-15 мин. Пробу вносят в ячейку, полярографируют и измеряют высоту пика. Во вторую колбу добавляют стандартный раствор, доводят фоновым электролитом до 5 или 25 мл в зависимости от объёма электролизера, пропускают инертный газ и снова полярографируют в тех же условиях.

Концентрацию стандартного раствора подбирают так, чтобы высота пика на второй полярограмме примерно удвоилась по сравнению с первоначальной.

Добавку следует вносить в малом объёме, чтобы предотвратить изменения концентрации фонового электролита и зольных элементов.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

4.4. Обработка результатов

Расчет производят по формуле:

, где

С - содержание металла, в мг/кг;

- концентрация стандартного раствора, мг/мл;

- объём добавленного стандартного раствора, мл;

- объём раствора, подготовленного для первого полярографирования, мл;

- высота пика, полученная при первом полярографировании, мм;

- общий объём раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

- высота пика, полученная при втором полярографировании, мм;

- объём раствора, подготовленного ко второму полярографированнию, мл;

- объём испытуемого раствора, взятый из общего раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

М - масса образца, взятого для испытания, г;

1000 - множитель для пересчёта результата в мг/кг.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,001 мг/кг. Допустимое расхождение результатов параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,001 мг/кг. Минимальное содержание кадмия, определяемое вышеуказанным методом - 0,01 мг/кг.

4. Атомно-абсорбционный метод

Настоящий метод распространяется на рыбу и рыбные продукты. Метод основан на определении поглощения селективной линии кадмия, интенсивность которого определяется на атомно-абсорбционном спектрофотометре.

4.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Спектрофотометр атомно-абсорбционный.

Весы лабораторные рычажные по ГОСТ 19491-74.

Шкаф сушильный по ГОСТ 7365-55.

Тигли кварцевые вместимостью от 50 до 100 .

Пробирки стеклянные мерные вместимостью от 10 до 15 по ГОСТ 10515-75.

Воронки стеклянные диаметром 50 мм по ГОСТ 8613-64.

Стаканчики стеклянные вместимостью от 30 до 40 по ГОСТ 10394-72.

Колбы мерные вместимостью 25 по ГОСТ 1770-74.

Фильтры беззольные.

Кислота азотная, х.ч., концентрированная по ГОСТ 4461-67, плотностью 1520 .

Кадмий металлический, ч.д.а. по ТУ 6-09-3097-73.

Кадмий хлористый, ч.д.а.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

4.2. Подготовка к испытаниям

4.2.1. Подготовка пробы

Подготовка большинства проб, кроме напитков и жировых продуктов, проводится по 2.2.1.1.1. и 2.2.1.1.2., для напитков по 2.2.1.2.1. и 2.2.1.2.2., для жировых продуктов по 2.2.1.3.

4.2.2. Приготовление стандартного раствора кадмия

Стандартный раствор кадмия готовят по 2.2.2.

4.2.3. Построение градуировочного графика

Рабочие стандартные растворы кадмия в количестве 1; 2,5; 5; 10; 15; 20 и 25 мл вводят в атомный спектрофотометр. Фотометрирование на приборе производят при длине волны 228,8 нм.

Одновременно проводится холостой опыт с использованием тех же реактивов, но без добавления раствора исследуемого элемента.

4.3. Проведение испытания

Испытания проводят по 4.2.3., использовав вместо рабочего стандартного раствора образец минерализата продукта, полученного по 2.2.1. В качестве холостого опыта используют минерализат, полученный по 4.2.1. но без исследуемого образца.

4.4. Обработка результатов

Содержание кадмия (С) в мг/кг или мг/л определяют по формуле:

, где:

А - содержание кадмия, найденное по градуировочному графику, мкг;

- содержание кадмия в холостом опыте, мкг;

- количество минерализата, взятого для определения, мл;

V - количество минерализата, полученного по 4.2.1, мл;

М - масса исследуемого образца, взятого для минерализации, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженное с точностью до 0,001. Допустимое расхождение результатов параллельных определений не более 15% отн. Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,001 мг/кг. Минимальное содержание кадмия, определяемое нижеуказанным методом - 0,01 мг/кг.

Методы определения свинца

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты и пищевое сырье для их производства и устанавливают методы определения в них свинца.

1. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с действующими ГОСТами или техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на реакции свинца с дитизоном с образованием комплексного соединения красного цвета, которое экстрагируется хлороформом в щелочной среде. Интенсивность окраски экстрагированного соединения измеряется фотометрически. Для устранения мешающего влияния некоторых металлов перед проведением реакции добавляют раствор цианида калия.

2.1. Посуда, реактивы, растворы

Воронки стеклянные по ГОСТ 8613-64 тип УШ вместимостью 250 и 500 мл и тип 1.

Печь муфельная.

Колбы мерные по ГОСТ 1770-74 вместимостью 100 и 1000 мл.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770-74 вместимостью 25, 50, 100 и 500 мл.

Тигли фарфоровые 20, 50, 100 мл по ГОСТ 9147-73.

Бюретка с краном по ГОСТ 20292-74 вместимостью 25 мл.

Пипетки по ГОСТ 20292-74 вместимостью 0,5, 1, 2, 5, 10 и 50 мл.

Колбы Кьельдаля по ГОСТ 10394-72 вместимостью 250 мл.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70.

Фотоэлектроколориметр по ГОСТ 12083-78.

Кислота азотная по ГОСТ 4461-77, х.ч. концентрированная и 1%-ный раствор.

Кислота серная по ГОСТ 4461-77, х.ч.

Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, х.ч. и 5 н раствор.

Пергидроль (перекись водорода) по ГОСТ 10929-64.

Натрий сернистокислый безводный по ГОСТ 195-77, ч.д.а. 2% раствор.

Фильтры беззольные по ТУ 6-09-1678-72.

Аммиак водный по ГОСТ 3760-64 ч.д.а. и 5 н раствор.

Калий цианистый 10%-ный раствор, который хранят не более двух дней.

Аммиачный раствор сульфита-цианида. К 170 мл аммиака водного добавляют 37,5 мл 2%-ного раствора натрия сернистокислого, 15 мл 10%-ного раствора цианистого калия и 303 мл воды.

Хлороформ х.ч. по ГФ СССР. Для очистки от примесей 250 мл хлороформа взбалтывают в делительной воронке с 1 мл 10%-ного раствора цианистого калия, 25 мл воды и 1 мл 5 н раствора аммиака. После разделения фаз хлороформенный слой сливают в другую делительную воронку и взбалтывают с 25 мл воды. Хлороформенный слой отделяют и отфильтровывают через сухой беззольный фильтр в сухую склянку. Для анализов используют только очищенный хлороформ.

Аммиачный раствор дитизона затем дважды промывают 5-10 мл четыреххлористого углерода (или хлороформа). К аммиачному раствору дитизона добавляют 2,0 мл концентрированной соляной кислоты и 400 мл четыреххлористого углерода (или 100 мл хлороформа), встряхивают 1-2 мин.

После разделения слоев раствор дитизона в органическом растворителе отделяют и дважды промывают от соляной кислоты 200 мл бидистиллированной воды. Затем раствор дитизона переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят до метки хлороформом. В результате получают основной 0,1%-ный раствор дитизона. Его хранят в темной склянке и в холодильнике не более 1 месяца.

Для приготовления рабочего раствора взбалтывают в делительной воронке 10 мл основного раствора с 9 мл воды и 1 мл 5 н раствора аммиака. Осторожно отделяют верхний слой, который затем фильтруют через беззольный фильтр.

Хранят в темной склянке в холодильнике не более двух дней.

Водорода перекись (пергидроль) по ГОСТ 10929-76, х.ч.

Гидроксиламин солянокислый по ГОСТ 5456-65, ч.д.а. 20%-ный раствор, который готовят непосредственно перед определением.

Натрий гексаметафосфат, 10%-ный раствор. Для очистки от примесей растворяют 25 г соли в 120-150 мл воды, вносят 2 капли раствора бромтимолового синего и по каплям водный аммиак до появления синей окраски. Раствор переносят в делительную воронку, добавляют 3 мл основного раствора дитизона и взбалтывают 50-60 сек. Нижний слой отделяют и отбрасывают. Обработку дитизоном повторяют до тех пор, пока нижний слой не станет зеленым. Оставшийся раствор гексаметафосфата натрия подкисляют 5 н раствором соляной кислоты до pH 6 с помощью универсальной индикаторной бумаги, добавляют 10 мл хлороформа и взбалтывают 30 сек. Хлороформенный (нижний слой) сливают и отбрасывают. Обработку хлороформом повторяют до тех пор, пока нижний слой не станет бесцветным. Оставшийся водный раствор сливают в склянку и доводят водой до 250 мл.

Аммоний лимоннокислый по ГОСТ 9264-71, ч.д.а. 25%-ный раствор. Для очистки от примесей 62,5 г соли растворяют в 200 мл воды, добавляют водный аммиак до щелочной реакции (pH 8-9) по индикаторной бумаге, переносят в делительную воронку, взбалтывают 50-60 сек с 3 мл основного раствора дитизона и нижний слой отбрасывают. Обработку дитизоном повторяют до появления в нижнем слое зеленой окраски. Затем в оставшийся раствор лимоннокислого аммония вносят 5 мл 5 н раствора соляной кислоты, 10 мл хлороформа, взбалтывают 30 сек и нижний слой отбрасывают. Обработку хлороформом повторяют пока нижний слой не станет бесцветным. Оставшийся водный раствор сливают в склянку и доводят водой до 250 мл.

Свинец азотнокислый по ГОСТ 4236-77, х.ч. перекристаллизованный и высушенный до постоянного веса при 100-105°С.

Свинец металлический по ГОСТ 22861-77.

Бромтимоловый синий ч.д.а. 0,1%-ный раствор в 80% этиловом спирте.

Свинец уксуснокислый по ГОСТ 1027-67.

Примечание: Для приготовления растворов и проведения анализов используют только бидистиллированную воду.

Специальное и обыкновенное лабораторное стекло, употребляемое для определения свинца, следует заранее проверить на устойчивость к действию дитизона. Для этого промывают стеклянную посуду хромовой смесью, концентрированной азотной кислотой, несколько раз дистиллированной и дважды бидистиллированной водой, высушивают, а затем промывают 0,001%-ным раствором дитизона в хлороформе. Посуду заполняют 0,001%-ным раствором дитизона и оставляют на 1 час. Даже незначительное изменение окраски раствора свидетельствует о неустойчивости стекла к действию дитизона. Такую посуду несколько раз обрабатывают 0,03%-ным раствором дитизона в хлороформе, а затем промывают хлороформом. После этого еще раз наполняют 0,001%-ным раствором дитизона в хлороформе и выдерживают 1 час.

Для определения свинца применяют только стекло, устойчивое в действию дитизона.

2.2. Подготовка к испытаниям

2.2.1. Подготовка пробы

Для большинства продуктов методика подготовки проб является одной и той же. Исключение составляют: 1) напитки типа вина, пива, фруктовых вод и прозрачных соков; 2) жировые продукты типа растительного и животного масел, их производные и продукты, в которых они преобладают.

2.2.1.1.1. Сухое озоление

В связи с тем, что некоторые соединения исследуемого элемента, например, хлориды, летучи при озолении их переводят в менее летучие нитраты.

Пробу (3-50 г в зависимости от предполагаемого содержания элемента в продукте) обугливают на электрической плитке (можно дополнительно облучать ИК-лампой) и затем помещают в муфельную печь. Затем увеличивают температуру муфеля до 450°. После получения бурой золы ее смачивают разбавленной азотной кислотой (1:1), квалификации о.с.ч. или к золе добавляют несколько капель бидистиллированной воды и затем столько же капель азотной кислоты. Полученный образец золы подсушивают на электроплитке и далее снова озоляют в муфельной печи до получения белой золы. В необходимых случаях обработку азотной кислотой повторяют несколько раз. К полученной белой золе добавляют 2 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. Далее полученный сухой минерализат целиком используют для проведения испытаний.

Примечание. Если при озолении использовалась азотная кислота иной квалификации, чем о.с.ч., то проводят с ней холостой опыт в количестве эквивалентном использованному при сжигании.

2.2.1.1.2. Мокрое озоление

В колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 5-30 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивают навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляют азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (соотношение зависит от вида продукта); образец оставляют для обугливания на 15-30 мин. Затем осторожно добавляют азотную кислоту в количестве, равном первоначальному, и далее образец нагревают (при необходимости можно оставить образец на 18-20 часов для предварительного обугливания, после чего производить кипячение). Кипячение образца проводят 0,5-2 часа. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно!) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному, или последовательно азотную и хлорную кислоты (в отношении 2:1) или азотную и 30% перекись водорода (2:1) и кипятят до обесцвечивания. (Внимание! Хлорную кислоту всегда добавляют последней!). Следует обращать внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 3-4 мл жидкости.

Для удаления остатков кислот, которые мешают дальнейшему анализу, проводят их удаление. Для этого в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Полученный прозрачный раствор целиком, без разбавления, используется для проведения испытаний.

Примечание. Холостой опыт (все реактивы за исключением образца) обязателен перед началом работы или замены партии хотя бы одного реактива.

2.2.1.2. При анализе напитков производят сухое иди мокрое озоление.

2.2.1.2.1. Сухое озоление

Напитки выпаривают досуха на водяной бане или сушильном шкафу и далее следуют по 2.2.2.1.

2.2.1.2.2. Мокрое озоление

50 мл напитка отмеривают в колбу Кьельдаля и добавляют для напитков с содержанием сахара до 1 г/100 мл 25 мл пергидроля, для остальных напитков 50 мл пергидроля, нагревают до кипения.

Напитки с содержанием сахара от 1 до 10 г/100 мл далее кипятят пока не останется 5-6 мл, затем колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают пока не останется 2-3 мл жидкости.

Напитки с содержанием сахара от 10 до 13 г/100 мл кипятят пока не останется 5-6 мл, охлаждают, добавляют еще 10 мл пергидроля, кипятят до 5-6 мл и выпаривают в кипящей водяной бане до 2-3 мл.

Напитки с содержанием сахара от 13 до 22 г/100 мл кипятят пока не останется 10-15 мл, охлаждают, добавляют 25 мл пергидроля, вновь кипятят до 5-6 мл и выпаривают в водяной бане до 2-3 мл.

Напитки с содержанием сахара выше 22 г/100 мл кипятят пока не останется около 20-25 мл, вносят 25 мл пергидроля, кипятят до получения 10 мл и эту операцию повторяют, если жидкость при доведении до объема 10 мл темнеет. Затем колбу помещают в кипящую водяную баню и жидкость выпаривают до 2-3 мл. После охлаждения остаток целиком, без разбавления, используется для проведения испытаний.

2. Во избежание воспламенения пергидролем органических веществ кипячение следует проводить при умеренном нагревании и оставлять не менее того количества жидкости, которое указано выше. При выпаривании в водяной бане колба не должна касаться дна бани. Нагревание с пергидролем проводят в вытяжном шкафу.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов используют только мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл концентрированной азотной кислоты и 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл и продолжают нагревание. Полученный остаток целиком используется для исследований.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора свинца

Стандартные растворы свинца готовят одним из следующих способов.

2.2.2.1. 1,831 г уксуснокислого свинца () растворяют в воде, содержащей 1 мл уксусной кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки бидистиллированной водой. Полученный основной стандартный раствор содержит 1 мг свинца в 1 мл. Непосредственно перед определением готовят рабочий раствор. Для этого 5 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу, вместимостью 500 мл и доводят до метки 0,001 н раствором уксусной кислоты. Полученный рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг свинца в 1 мл.

2.2.2.2. 1,600 г азотнокислого свинца (предварительно высушенного до постоянной массы при 100-105°С) растворяют в воде, содержащей 1 мл концентрированной азотной кислоты, переносят в мерную колбу на 1000 мл и доводят до метки бидистиллированной водой. Полученный основной стандартный раствор содержит 1 мг свинца в 1 мл. Непосредственно перед определением 5 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки 0,001 н раствором азотной кислоты. Полученный рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг свинца в 1 мл.

2.2.2.3. 1,000 г металлического свинца растворяют в минимальном количестве разбавленной (1:1) азотной кислоты при слабом подогревании. Затем раствор упариваю досуха, остаток растворяют в бидистиллированной воде и переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 0,5 мл концентрированной азотной кислоты и доводят бидистиллированной водой до метки. Полученный основной стандартный раствор содержит 1 мг свинца в 1 мл. Для получения рабочего стандартного раствора (готовится непосредственно перед определением) 5 мл основного стандартного раствора отмеривают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят 0,001 н раствором азотной кислоты до метки. Рабочий стандартный раствор содержит 100 мкг свинца в 1 мл.

2.2.2.4. Хранение стандартных растворов проводится по ГОСТ 4212-76.

2.2.3. Построение градуировочного графика

0,5; 1,0; 1,5; 2,0 и 2,5 мл рабочего стандартного раствора, приготовленного по 2.2.2 отмеряют в делительные воронки. В каждую воронку добавляют 1%-ный раствор азотной кислоты до получения объема 10 мл, затем вносят 30 мл аммиачного раствора сульфита-цианида, 10 мл хлороформа, отмеренного бюреткой и 0,5 мл рабочего раствора дитизона. Смесь взбалтывают 50-60 сек и после отстаивания нижний хлороформенный слой фильтруют через беззольный фильтр в кювету на 10 мл и кювету тотчас же закрывают крышкой. (Фильтрование следует проводить быстро во избежание потерь хлороформа). Оптическую плотность стандартных растворов измеряют по отношению к раствору сравнения на фотоэлектроколориметре при зеленом светофильтре (). Раствор сравнения готовят из всех применяемых реактивов, кроме рабочего стандартного раствора свинца.

2.3. Проведение испытания

В полученный по 2.2.1 минерализат добавляют 6-7 капель водного аммиака и после прекращения реакции вносят 10 мл 5 н раствора соляной кислоты, нагревают до кипения, охлаждают, добавляют 5 мл раствора лимоннокислого аммония, 10 мл раствора гексаметафосфата натрия, 2-3 капли раствора бромтимолового синего, и прибавляют по каплям водный аммиак до появления синей или сине-зеленой окраски. После охлаждения вносят 1 мл 10%-ного раствора цианистого калия и 1 мл раствора солянокислого гидроксиламина. Смесь с промывными водами (общее количество 5-7 мл) переносят в делительную воронку, в которую вносят 10 мл хлороформа, 0,5 мл рабочего раствора дитизона и взбалтывают 50-60 сек. Хлороформенный слой сливают в другую делительную воронку, промывая оставшийся в первой воронке водный слой 1-2 мл хлороформа и сливая хлороформ также во вторую воронку. В первую воронку вносят 3 мл хлороформа и 0,2 мл рабочего раствора дитизона, взбалтывают 30 сек. После разделения фаз хлороформенный слой сливают во вторую делительную воронку. Этот хлороформенный слой должен иметь зеленую окраску. В противном случае обработку хлороформом повторяют до появления зеленой окраски. Затем во вторую воронку вносят 10 мл 1%-ного раствора азотной кислоты и взбалтывают 50-60 сек и тщательно сливают хлороформенный слой, который затем отбрасывают.

К оставшемуся водному слою добавляют 30 мл аммиачного раствора сульфита-цианида и 10 мл хлороформа, 0,5 мл рабочего раствора дитизона и далее проводят определения как указано при построении градуировочного графика (2.2.3).

Колориметрирование испытуемого раствора производят по отношению к раствору сравнения, который подготавливают точно также из всех применяемых реактивов, но без испытуемого раствора.

2.4. Обработка результатов

Содержание свинца, выраженное в миллиграммах на 1 кг или 1 л пищевого продукта (С), вычисляют по формуле:

,где

А - содержание свинца в исследуемой пробе, найденное по градуировочному графику, мкг;

- количество минерализата, взятое для колориметрического определения, мл;

V - количество минерализата, полученного по 2.2.1, мл;

М - масса пищевого продукта, взятого для минерализации, г или мл.

За результат определения принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,01 мг/кг. Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью 0,01 мг/кг. Минимальное содержание свинца, определяемое данным методом 0,05 мг/кг.

3. Полярографический метод

Метод основан на полярографическом определении свинца в режиме переменного тока.

3.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Весы лабораторные рычажные по ГОСТ 19491-74

Баня водяная

Электроплитка по ГОСТ 306-69 или других аналогичных марок

Инфракрасная лампа 500w марки ЦГ-58 или других аналогичных марок

Шкаф лабораторный сушильный по ГОСТ 111292-65 или других аналогичных марок

Муфельная электропечь с регулированием температуры марки СНОЛ 1, 6.2, 5.1/11-МТУ 4.2 или других аналогичных марок

Полярограф марки ППТ-1, ПУ-1 или других аналогичных марок

Тигли или чашки кварцевые вместимостью 100 мл по ГОСТ 19908-73

Тигли или чашки фарфоровые вместимостью 100 мл по ГОСТ 9147-73, предварительно обработанные в течение одного часа 5%-ным раствором уксусной кислоты при нагревании на кипящей водяной бане.

Колбы конические вместимостью 10 или 25 мл по ГОСТ 23932-79

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74

Пробирки мерные вместимостью 10 и 15 мл по ГОСТ 10515-75

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл по ГОСТ 20292-74

Эксикатор по ГОСТ 6371-73

Фильтры беззольные по ТУ 6-09-1678-72, диаметр 5,5 см с синей полосой

Хлороформ, х.ч., по ГОСТ 3160-51

Дитизон, ч.д.а., по ГОСТ 10165-62, 0,001, 0,010 и 0,030%-ные растворы в хлороформе

Кислота азотная, о.с.ч., по ГОСТ 11125-78 или х.ч., по ГОСТ 4461-67 плотностью 1,4 , концентрированная и разбавленная бидистиллированной водой 1:1 или 1:2.

Кислота ортофосфорная, х.ч., по ГОСТ 6552-58, плотностью 1,88 , разбавленная бидистиллированной водой 1:3 (по объему).

Кислота хлорная, х.ч., по МРТУ 6-09-6604-70, плотностью 1,15 , 57 и 30%-ный растворы

Кали едкое, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4203-65, 60%-ный раствор

Пирогаллол, ч.д.а., по ГОСТ 10451-63, или пирогаллол А, ч.д.а., по ГОСТ 6408-52, 25%-ный раствор

Свинец азотнокислый, х.ч., по ГОСТ 4236-67, перекристаллизованный и высушенный до постоянного веса при 100-105°С

Свинец металлический по ГОСТ 22861-77

Кальций хлористый гранулированный ч., по ГОСТ 4161-67, прокаленный

Свинец уксуснокислый по ГОСТ 1027-67

Ртуть металлическая Р-О по ГОСТ 4658-73

Вода бидистиллированная

Азот газообразный, о.с.ч., по ГОСТ 9293-74 или любой другой инертный газ, свободный от кислорода. При наличии примеси кислорода газ пропускают через поглотительную смесь, состоящую из 25%-ого раствора пирогаллола и 60%-ного раствора едкого кали в соотношении 1:5 (по объему).

Примечание. Все лабораторное стекло заранее проверяют на устойчивость к действию дитизона. Для этого его промывают хромовой смесью, водой, затем концентрированной азотной кислотой, несколько раз дистиллированной и дважды бидистиллированной водой; высушивают, а затем промывают 0,001%-ным раствором дитизона. При минимальном изменении окраски дитизона проводят несколько раз травление стекла 0,030%-ным раствором дитизона, а затем, после промывки хлороформом, еще раз проверяют 0,001%-ным раствором дитизона, как указано выше.

Для работы по определению свинца применяют стекло, устойчивое к действию дитизона.

3.2. Подготовка к испытаниям

3.2.1. Подготовка пробы

Используют, как правило, сухое озоление. Для большинства продуктов, кроме напитков и жировых продуктов, сухое озоление проводят по 2.2.1.1.1., для напитков по 2.2.1.2.1. Подготовку проб для жировых продуктов проводят по 2.2.1.3.

3.2.2. Приготовление стандартного раствора свинца

Стандартные растворы свинца готовят по 2.2.2.

3.2.3. Приготовление фоновых электролитов

3.2.3.2. Фоновый электролит В - 1 н ортофосфорная + 0,5 н хлорная кислота (используется для анализа фруктов, овощей, соков, компотов, варенья, повидла, консервов овощных и мясных, мяса и мясопродуктов, рыбы и рыбных продуктов). Смешивают разбавленную ортофосфорную кислоту, 30%-ную хлорную кислоту и бидистиллированную воду в отношении 3:2:5 (по объему).

3.2.3.3. Фоновый электролит С - 0,1 н соляная кислота (используется для анализа мяса птицы, яичных продуктов, неконсервированных в металлическую тару).

3.3. Проведение испытания

Запись полярограмм проводят в диапазоне от минус 0,35 до минус 0,9 (относительно донной ртути) в режиме "анализ ", тест-регистрации, синхронизации равной 2-3, амплитуде переменного тока 4-12 мВ, скорости развертки 2-5 мВ/сек, скорости диаграммной ленты 720-1800 мм/час. Время задержки должно составлять примерно две трети от времени жизни капли.

Чувствительность записи от 0,5х100 до 4х100 в зависимости от содержания металла в пробе.

Пик восстановления свинца относительно донной ртути находится при потенциале около минус 0,5-0,7 в зависимости от электролитического фона и состава золы.

Получив полярограмму, определяют высоту пика и проводят расчет содержания свинца в пробе по методу добавок.

3.3.2. Проводят предварительную подготовку минерализата. Для этого к минерализату, полученному по 3.2.1 (целиком, без разбавления), добавляют осторожно 2 мл 30%-ного раствора хлорной кислоты и нагревают на кипящей водяной бане в течение 5 минут. Охлажденный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 10 или 25 мл и доводят до метки фоновым электролитом, приготовленным по 3.2.3.

3.3.3. Определение свинца в пробе проводят методом добавок. Для этого в две одинаковые конические колбы вместимостью 10, 25 или 50 мл (в зависимости от предполагаемого содержания металла) помещают 4 или 10 мл минерализата, подготовленного по 3.3.2. В первой колбе доводят объем до 5 иди 25 мл, в зависимости от объема электролизера фоновым растворителем и пропускают инертный газ для удаления кислорода в течение 10-15 минут. Пробу вносят в ячейку, полярографируют и измеряют высоту пика. Во вторую колбу добавляют стандартный раствор, доводят фоновым электролитом до 5 иди 25 мл, в зависимости от объема электролизера, пропускают инертный газ и снова полярографируют в тех же условиях.

Добавку следует вносить в малом объеме, чтобы предотвратить изменение концентрации фонового электролита и зольных элементов.

4. Обработка результатов

Расчет производят по формуле:

, где

С - содержание свинца, в мг/кг;

- концентрация стандартного раствора, мл/мл;

- объём добавленного стандартного раствора, мл;

- объём раствора, подготовленного для первого полярографирования, мл;

- высота пика, полученная при первом полярографировании, мм;

- общий объём раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

- высота пика, полученная при втором полярографировании, мм;

- объём раствора, подготовленного ко второму полярографированнию, мл;

- объём испытуемого раствора, взятый из общего раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

М - масса образца, взятого для испытания, г;

1000 - множитель для пересчёта результата в мг/мл.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,01 мг/кг. Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,01 мг/кг. Минимальное содержание свинца, определяемое данным методом - 0,05 мг/кг.

Метод определения мышьяка

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты и пищевое сырье для их производства и устанавливает метод определения в них мышьяка.

1. Отбор проб для испытаний

Отбор проб и подготовка их к испытанию проводятся в соответствии с действующими ГОСТами или Техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на превращении соединений мышьяка в газообразный мышьяковистый водород, который реагируя с диэтилдитиокарбаматом серебра в хлороформе образует окрашенное соединение, интенсивность окраски которого измеряют колориметрически.

2.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Печь муфельная любой марки.

Спектрофотометр или фотометр любой марки с принадлежностями (кюветы, фильтры).

Весы аналитические (типа АДВ-200).

Прибор для отгонки и поглощения мышьяка (см. рис.).

Прибор изготавливается из лабораторного стекла и включает:

1) реакционную колбу емкостью 250 мл со шлифом 24/29;

2) соединительную трубку со шлифом 24/29 на одном конце и каппиляром на другом конце. Соединительная трубка имеет расширение для поглотителя;

3) пробирка для поглощающего раствора емкостью 20 мл;

4) стеклянная спираль с 10 витками для увеличения пути прохождения газа через поглощающий раствор.

Перед употреблением прибор следует промыть азотной кислотой 1:1 и затем тщательно прополоскать водой.

Рис. Прибор для отгонки и поглощения мышьяка

1 - Реакционная колба, ёмкостью 250 мл.

2 - Соединительная трубка с поглотителем и капилляром.

3 - Поглотительная вата, пропитанная ацетатом свинца.

4 - Пробирка с поглощающим раствором.

5 - Стеклянная спираль, длиной 7 см с 10 витками, для увеличения пути прохождения газа через раствор.

6 - Тефлоновая резинка.

Посуда мерная лабораторная стеклянная вместимостью:

колбы мерные с притертыми пробками - 100, 250, 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Пипетки - 1, 2, 5, 10 мл по ГОСТ 1770-74.

Цилиндры мерные - 50, 100 мл по ГОСТ 1770-74 и 20292-74.

Воронки стеклянные тип В вместимостью 100 мл по ГОСТ 8613-75.

Фильтр обеззоленный по МРТУ 6-09-2411-65.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

Нитрат магния, х.ч., по ГОСТ 11088-64; 10%-ный раствор,

Иодид калия, х.ч., по ГОСТ 4232-65; 15%-ный раствор.

Хлорид олова, ч.д.а., по ГОСТ 36-68, 20%-ный раствор в концентрированной (35-38%) хлористоводородной кислоте.

Цинк металлический, х.ч. по ГОСТ 989-62, гранулы диаметром 3-5 мм.

Гидразин сернокислый, ч.д.а. ГОСТ 5841-65.

Гидроксид натрия (едкий натр) по ГОСТ 4328-77.

Мышьяковистый ангидрид по ГОСТ 1973-77, 1-й сорт.

Гидроарсенат натрия по МРТУ 6-09-6055-69.

Оксид магния (окись магния), ч.д.а. ГОСТ 4526-67.

Бутиловый спирт, ч.д.а. по ГОСТ 6006-51.

Моноэтаноламин, ч. по МРТУ 6-09-3909-67.

Хлороформ, х.ч. по ГОСТ 3160-51, свежеперегнанный.

Перекись водорода, х.ч. по ГОСТ 10979-64; 30%-ный раствор.

Ацетат свинца, х.ч., по ГОСТ 1027-67, 5%-ный раствор.

Поглотитель сероводорода: вата, пропитанная 5%-ным раствором ацетата свинца и высушенная при комнатной температуре под вакуумом (хранить в герметически закрытом сосуде).

Кислота азотная, х.ч. по ГОСТ 4461-77.

Диэтилдитиокарбамат натрия, ч.д.а. ГОСТ 8864-58.

Нитрат серебра, х.ч. по ГОСТ 1277-63.

Кислота соляная, о.с.ч. 21-4 по ГОСТ 14261-69, концентрированная (35-38%) и раствор 1:1.

Кислота серная, х.ч. по ГОСТ 4204-66.

Фенолфталеин.

Раствор диэтилдитиокарбамата серебра (0,4%).

Для этого сначала получают диэтилдитиокарбамат серебра следующим образом: медленно смешивают при перемешивании и при температуре менее 20°С раствор 1,7 г азотнокислого серебра в 100 мл воды с раствором 2,3 г диэтилдитиокарбамата натрия а 100 мл воды. Отфильтровывают образовавшийся лимонно-желтый осадок диэтилдитиокарбамата серебра и тщательно промывают его водой до исчезновения реакции на серебро. Осадок сушат при температуре не выше 30°С. Сухая соль не разлагается при хранении в темноте в течение шести месяцев. Для получения поглощающего раствора непосредственно перед анализом 0,4 г соли растворяют в 100 мл хлороформа, в который предварительно добавлено 1,0 мл моноэтаноламина. Для работы используется только свежеприготовленный раствор.

2.2. Подготовка к исследованию

2.2.1. Подготовка пробы

При исследовании пищевых продуктов используют сухое или мокрое озоление.

Для большинства продуктов методика подготовки проб является одной и той же. Исключение составляют:

1) напитки типа вина, пива, фруктовых вод и прозрачных соков;

2) жировые продукты типа растительного и животного масла, их производные и продукты, в которых они преобладают.

2.2.1.1. Мокрое озоление

2.2.1.1.1. При анализе большинства продуктов в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 5-50 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивают навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляют азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (при этом азотная кислота должна полностью покрывать продукт); образец оставляют для обугливания на 15-30 мин (можно оставлять на ночь). Затем осторожно добавляют сначала азотную, а затем серную кислоту в количестве, равном первоначальному, и далее образец нагревают. Кипячение образца проводят 0,5-2 часа. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно!) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному, или азотную кислоту и 30% перекись водорода (2:1) и кипятят еще 0,5-2 часа до обесцвечивания. Если обесцвечивание не происходит, то вновь добавляют азотную кислоту до прекращения выделения бурых паров окиси азота. Следует обращать внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 5 мл жидкости.

Для удаления остатков кислот, которые мешают дальнейшему анализу в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Затем в колбу или жаростойкий стакан добавляют 20 мл воды и небольшое количество (0,1 г или на кончике шпателя) сернокислого гидразина.

Далее полученную жидкость кипятят 1,5-2 часа для разложении гидразина.

Полученный раствор переносят в цилиндр на 100 мл, доводят водой до 90 мл.

2.2.1.1.2. При анализе напитков 50 мл напитка отмеривают в колбу Кьельдаля и добавляют для напитков с содержанием сахара до 1 г/100 мл 25 мл пергидроля, для остальных напитков - 50 мл пергидроля нагревают до кипения и далее следуют по одной из следующих прописей.

Напитки с содержанием сахара от 1 до 10 г/100 мл кипятят пока не останется 5-6 мл, затем колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают пока не останется 2-3 мл жидкости.

Напитки с содержанием сахара от 10 до 13 г/100 мл кипятят, пока не останется 5-6 мл, охлаждают, добавляют еще 10 мл пергидроля, кипятят до 5-6 мл и выпаривают в кипящей водяной бане до 2-3 мл.

Напитки с содержанием, сахара выше 22 г/100 мл кипятят пока не останется около 20-25 мл, вносят 25 мл пергидроля, кипятят до получения 10 мл и эту операцию повторяют, если жидкость при доведении до объема 10 мл темнеет. Затем колбу помещают в кипящую водяную баню и жидкость выпаривают до 2-3 мл.

Полученные тем или иным способом минерализаты напитков переносят в мерный цилиндр на 100 мл и доводят до 90 мл водой.

Примечание. 1 В случае, если при выпаривании на водяной бане жидкость потемнеет, то после охлаждения добавляют еще 10 мл пергидроля, кипятят до получения 5-6 мл жидкости и вновь выпаривают в водяной бане до 2-3 мл.

2.2.1.1.3. При анализе жировых продуктов используют мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл. конц. азотной кислоты и 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл и продолжают нагревание. Для удаления остатков кислот поступают по 2.2.1.1.1. Полученный в результате раствор минерализата переносят в мерный цилиндр на 100 мл и доводят водой до 90 мл.

2.2.1.2. Сухое озоление

Для большинства продуктов и напитков к 5-50 г образца в тигле или чашке добавляют 3 г окиси магния и 3 г нитрата магния, небольшое количество воды (при анализе напитков вода не добавляется) и смесь перемешивают для образования кашицы. Затем смесь выпаривают досуха на водяной бане и озоляют в муфеле при 450-500°. При анализе жировых продуктов к 20-50 г образца добавляют 4 г окиси магния, 5 г измельченного беззольного фильтра и 5 мл бутилового спирта и прокаливают до обугливания, охлаждают, смешивают с 3 г нитрата магния и досушивают в сушильном шкафу и далее озоляют в муфеле. Далее тигель помещают в муфель.

Полученную белую золу растворяют в воде и переносят в мерный цилиндр на 100 мл и доводят водой до 90 мл. В случае плохого растворения золы к ней добавляется разбавленная (1:1) соляная кислота. Количество добавленной кислоты учитывается при проведении испытаний по 2.3.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора мышьяка

Стандартные растворы мышьяка готовятся одним из следующих способов.

2.2.2.1. 0,132 г мышьяковистого ангидрида () растворяют в 15 мл 2 н едкого натрия, затем нейтрализуют 2 н раствором серной кислоты в присутствии фенолфталеина, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки водой. Полученный стандартный раствор содержит 0,1 мг мышьяка в 1 мл. Для получения рабочего стандартного раствора непосредственно перед определением 10 мл основного стандартного раствора мышьяка помещают в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Полученный рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг мышьяка в 1 мл. Хранение стандартных растворов проводится по ГОСТ 4212-76.

2.2.2.2. 0,4160 г арсената натрия () вносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят дистиллированной водой до метки. Полученный основной стандартный раствор содержит 0,1 мг мышьяка в 1 мл. Непосредственно перед определением 10 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят дистиллированной водой до метки. Полученный рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг мышьяка в 1 мл.

2.2.3. Построение градуировочного графика

2.2.3.1. В 7 поглотительных пробирок наливают по 10 мл поглощающего раствора (0,4% диэтилдитиокарбамат серебра в хлороформе, содержащем 1% этаноламина).

В соединительные трубки помещают поглотитель - вату, пропитанную 5% раствором ацетата свинца.

2.2.3.2. Затем в 7 отдельных реакционных колб на 250 мл вносят 0,0; 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 мл рабочего раствора мышьяка (10 мкг/мл), соответственно добавляют в каждую 87,5 мл воды и 90 мл соляной кислоты (1:1), и 0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 и 2,5 мл воды соответственно.

2.2.3.3. Добавляют в реакционную колбу 5 мл раствора йодида калия, 2,5 мл раствора хлорида олова и в самом конце операции 5 г гранулированного цинка, после чего быстро надевают на колбу соединительную трубку с поглотителем и с капилляром, конец которого погружен в пробирку с поглощающим раствором. Отгоняют образовавшийся арсин в течение 30-60 минут и измеряют оптическую плотность поглощающего раствора в кювете толщиной 2 см при длине волны 535 нм или со светофильтром с при 535 нм. В качестве холостого опыта используют вышеописанную процедуру, но вместо испытуемого раствора используют воду.

2.3. Проведение испытания

Подготавливают прибор согласно 2.2.3.1. Затем минерализат (90 мл), подготовленный для анализа согласно 2.2, помещают в реакционную колбу прибора, туда же добавляют 90 мл раствора соляной кислоты (1:1) (если для растворения золы по 2.2.1.2. использовали соляную кислоту, то это учитывают при добавлении) до общего объёма 180 мл, далее следуют по 2.2.3.3. В качестве холостого опыта используют образец минерализата, полученного по 2.2, но без исследуемой пробы, который подвергается всем вышеописанным операциям.

2.4. Обработка результатов

Содержание мышьяка (С) в мг/кг или мг/л вычисляют по следующей формуле:

где: А - содержание мышьяка в исследуемом растворе, найденное по градуировочному графику, мкг;

М - масса навески, взятой на исследование, мг или мл.

Конечный результат анализа выражают с точностью 0,01 мг/кг. Минимальное содержание мышьяка, определяемое данным методом - 0,05 мг/кг.

Методы определения цинка

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты и пищевое сырьё для их производства и устанавливает методы определения в них цинка.

1. Отбор проб

Отбор проб производят в соответствии с действующими ГОСТами или техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на образовании окрашенного комплекса цинка с дитизоном, экстракции его четыреххлористым углеродом и измерении интенсивности окраски на фотоэлектроколориметре. Влияние меди, свинца, серебра и некоторых других элементов, образующих окрашенные дитизонаты, устраняют связыванием их в прочные комплексы с тиосульфатом натрия.

2.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Фотоэлектроколориметр

Весы аналитические с погрешностью взвешивания не более 0,0002 г.

Весы технические с погрешностью взвешивания не более 0,01 г.

Печь муфельная с терморегулятором.

Плитка электрическая по ГОСТ 306-76.

Перегонный аппарат из стекла, не содержащего цинка.

Тигли фарфоровые вместимостью 20, 50 и 100 мл по ГОСТ 9147-73.

Колбы мерные вместимостью 50, 100, 500 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Бюретки вместимостью 50 мл со стеклянными кранами по ГОСТ 20292-74.

Пипетки вместимостью 1, 5 и 10 мл по ГОСТ 20292-74.

Делительные воронки вместимостью 50, 1000 и 2000 мл по ГОСТ 8613-75.

Колбы Кьельдаля, вместимостью 100 и 250 мл по ГОСТ 10394-72.

Штатив для сжигания по Кьельдалю.

Беззольные фильтры по ТУ-6-09-1678-72.

Стеклянные шарики.

Стеклянные палочки.

Пергидроль (перекись водорода) х.ч. по ГОСТ 10979-64, 30%-ный раствор.

Вода бидистиллированная.

Кислота азотная, х.ч., по ГОСТ 11125-78 и 1%-ный раствор.

Кислота уксусная, х.ч., по ГОСТ 61-75.

Кислота соляная, х.ч., по ГОСТ З118-77, плотностью 1,19 , 20%-ный раствор. Если кислота загрязнена цинком, ее перегоняют в перегонном аппарате, собранном на шлифах. В перегонную колбу помещают 450 мл дистиллированной воды и 550 мл соляной кислоты плотностью 1,19 и перегоняют. Фракция, перегоняющаяся при температуре 108,6°С, имеет концентрацию 20,24%. Из этой кислоты разбавлением готовят 0,3 н раствор.

Углерод четыреххлористый х.ч. или ч.д.а. по ГОСТ 20288-74.

Растворитель используют без предварительной очистки, если 0,001-0,002%-ный раствор дитизона в четыреххлористом углероде не обесцвечивается при стоянии в темноте в течение 2-3 часов. Если раствор обесцветился, то четыреххлористый углерод очищают следующим образом. В склянку с притертой пробкой вместимостью 1 л помещают 500 мл четыреххлористого углерода и 10 г активированного угля. Встряхивают склянку в течение 5 мин и отфильтровывают четыреххлористый углерод в сухую склянку. Затем процедуру повторяют с новой порцией активированного угля. Обработанный дважды активированным углем четыреххлористый углерод перегоняют в стеклянном перегонном аппарате, собранном на шлифах.

При необходимости дитизон очищают следующим образом.

0,20 г дитизона растворяют (допускается растирание в фарфоровой чашке с небольшим количеством растворителя) в 400 мл четыреххористого углерода (или в 100 мл хлороформа). Переносят раствор в делительную воронку вместимостью 1 л (или 500 мл) в случае хлороформа, добавляют 200 мл бидистиллированной воды, 2,0 мл 25%-ного или 3,5 мл 14-15% раствора аммиака, встряхивают в течение 2-3 мин; после расслаивания жидкостей органический слой отбрасывают.

После разделения слоев раствор дитизона в органическом растворителе отделяют и дважды промывают от соляной кислоты 200 мл бидистиллированной воды. Затем раствор дитизона переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят до метки четыреххлористым углеродом или хлороформом.

В результате получают основной 0,02%ный раствор дитизона.

Хранят в темной склянке в холодильнике не более 1 месяца.

Рабочий раствор дитизона в четыреххлористом углероде или хлороформе:

120 мл 0,02%-ного основного раствора дитизона помещают в сухую мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем раствора до метки четыреххлористым углеродом или хлороформом и перемешивают, раствор применяют только свежеприготовленным.

Аммиак по ГОСТ 3760-75 о.с.ч, (без очистки) или х.ч., очищенный изотермической перегонкой.

Для очистки на дно эксикатора помещают 500 мл концентрированного раствора аммиака, х.ч., добавляют 2-3 г едкого калия или едкого натрия, на фарфоровый вкладыш помещают чашку с 250 мл бидистиллированной воды.

Эксикатор накрывают крышкой и выдерживают при комнатной температуре 4-5 дней. В результате получают 14-15% раствор аммиака.

Натрий уксуснокислый. ч.д.а., по ГОСТ 199-78.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), ч.д.а., по ГОСГ 4215-66.

Комплексный буферный раствор с pH 5,0.

Раствор применяется для устранения влияния мешающих элементов.

Для его приготовления 272 г уксуснокислого натрия растворяют примерно в 700 мл дистиллированной воды, приливают 58 мл ледяной уксусной кислоты и тщательно перемешивают. В полученном растворе растворяют 100 г тиосульфата натрия и доводят объем раствора до 1 л дистиллированной водой. Раствор очищают от следов цинка дитизоном. Для этого его переносят в делительную воронку вместимостью 2 л, приливают 5-10 мл 0,02%-ного раствора дитизона и встряхивают в течение 3 мин. Оставляют воронку в покое до полного расслоения жидкости. Нижний органический слой сливают и отбрасывают. Очистку раствора повторяют с новыми порциями дитизона до тех пор, пока раствор дитизона перестанет менять свою окраску. Затем очищаемый раствор отмывают от следов дитизона, встряхивая его с 5-10 мл четыреххлористого углерода в течение 2-3 мин и отбрасывая органическую фазу. Промывку повторяют до тех пор, пока четыреххлористый углерод перестанет окрашиваться в зеленый цвет. Очищенный раствор фильтруют через фильтр, предварительно очищенный от следов цинка, и хранят в холодильнике в течение месяца.

Окись цинка по ТУ 6-09-2175-72

Цинк гранулированный металлический, х.ч., по ГОСТ 989-75.

Примечание. 1. Посуду (колбы, пипетки, бюретки, делительные воронки, тигли) сначала очищают от жировых загрязнений содой или другими моющими средствами, а затем - от загрязнения цинком замачиванием посуды в растворе соляной кислоты (примерно 10%) в течение 3-4 ч. Посуду после обработки кислотой тщательно промывают водой и ополаскивают не менее 3-х раз дистиллированной водой и 2-х раз бидистиллированной водой. Для проверки устойчивости лабораторной посуды к дитизону её заливают на 1 час рабочим раствором дитизона в четыреххлористом углероде. Если происходит изменение окраски, то посуду несколько раз обрабатывают 0,02%-ным раствором дитизона в четырёххлористом углероде. Затем промывают четыреххлористым углеродом и снова испытывают 1 час рабочим раствором дитизона в четыреххлористом углероде. Посуда, не устойчивая к действию дитизона, для определения цинка не используется. Делительные воронки и колбы после растворов дитизона достаточно 3 раза промыть бидистиллированной водой. Порозовевшие от дитизоната цинка шлифы колб, делительных воронок, бюреток моют в растворе соляной кислоты; высохшие остатки растворов дитизона растворяют в разбавленном растворе аммиака.

2. Бумажные фильтры очищают от следов металлов пятикратной промывкой примерно 1%-ным раствором соляной кислоты (перегнанной). Затем фильтры промывают от остатков кислоты бидистиллированной водой и сушат в сушильном шкафу при температуре 95°С.

2.2. Подготовка к испытаниям

2.2.1. Подготовка проб

2.2.1.1.1. Сухое озоление

Пробу (1-50 г в зависимости от предполагаемого содержания элемента в продукте) обугливают на электрической плитке (можно дополнительно облучать ИК-лампой) и затем помещают в муфельную печь и постепенно увеличивают температуру муфеля до 450°. После получения бурой золы её смачивают разбавленной азотной кислотой (1:1), квалификации о.с.ч., или к золе добавляют несколько капель бидистиллированной воды и затем столько же капель азотной кислоты. Полученный образец подсушивают на электроплитке и далее снова озоляют в муфельной печи до получения белой золы. В необходимых случаях обработку азотной кислотой повторяют несколько раз. К полученной белой золе добавляют 2 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают досуха, до состояния влажных солей. Затем белую золу растворяют в 20 мл 1% азотной кислоты, нагревают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл. Доводят до метки 1%-ной азотной кислотой, перемешивают и используют для проведения исследований.

2.2.1.1.2. Мокрое озоление

В колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 5-30 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивают навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляют азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (соотношение зависит от вида продукта), образец оставляют для обугливания на 15-30 мин. Затем осторожно добавляют азотную кислоту в количестве, равном первоначальному, и далее образец нагревают (при необходимости можно оставить образец на 18-20 час для предварительного обугливания, после чего производить кипячение). Кипячение образца проводят 0,5-2 час. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно!) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному или последовательно азотную и хлорную кислоту (в отношении 2:1, или азотную и 30% перекись водорода (2:1) и кипятят до обесцвечивания. (Внимание! Хлорную кислоту всегда добавляют последней!). Следует обращать внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 3-4 мл жидкости.

Для удаления остатков кислот, которые мешают дальнейшему анализу, проводят их удаление. Для этого в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Полученный прозрачный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл, разбавляют 1%-ной азотной кислотой и используют для исследований.

Примечание. Холостой опыт (все реактивы, за исключением образца) обязателен перед началом работы или замены партии хотя бы одного реактива.

2.2.1.2. При анализе напитков производят сухое или мокрое озоление.

2.2.1.2.1. Сухое озоление

Напитки выпаривают досуха на водяной бане или сушильном шкафу и далее следуют по 2.2.2.1.

2.2.1.2.2. Мокрое озоление

1-50 мл напитка отмеривают в колбу Кьельдаля и добавляют для напитков с содержанием сахара до 1 г/100 мл 25 мл пергидроля, для остальных напитков - 50 мл пергидроля, нагревают до кипения и далее следуют по одной из следующих прописей.

Напитки с содержанием сахара от 1 до 10 г/100 мл далее кипятят, пока на останется 5-6 мл, затем колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают пока не останется 2-3 мл жидкости.

Напитки с содержанием сахара от 10 до 13 г/100 мл кипятят, пока не останется 5-6 мл, охлаждают, добавляют ещё 10 мл пергидроля, кипятят до 5-6 мл и выпаривают в кипящей водяной бане до 2-х - 3-х мл.

Напитки с содержанием сахара выше 22 г/100 мл кипятят пока не останется около 20-25 мл, вносят 15 мл пергидроля, кипятят до получения 10 мл и эту операцию повторяют, если жидкость при доведении до объёма 10 мл темнеет. Затем колбу помещают в кипящую водяную баню и жидкость выпаривают до 2-х - 3-х мл.

Полученные тем или иным способом минерализаты напитков переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл или 100 мл и доводят до метки 1% азотной кислотой.

Примечание. 1. В случае, если при выпаривании на водяной бане жидкость потемнеет, то после охлаждения добавляют ещё 10 мл пергидроля, кипятят до получения 5-6 мл жидкости и вновь выпаривают в водяной бане до 2-х - 3-х мл.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов используют только мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля иди жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл конц. азотной кислоты к 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл и доводят до метки 1% азотной кислотой.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора цинка

2.2.2.1. Основной стандартный раствор цинка, содержащий 1 мг цинка в 1 мл, готовится одним из следующих способов.

2.2.2.1.1. 1000 г гранулированного цинка растворяют в 7 мл разбавленной (1:1) соляной кислоты, раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки дистиллированной водой.

2.2.2.1.2. 4,398 г сернокислого цинка () помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки 0,001 н раствором серной кислоты.

2.2.2.1.3. 1,242 г окиси цинка растворяют в 3,65 мл концентрированной соляной кислоты, раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки 0,001 н раствором серной кислоты.

2.2.2.2. Рабочие стандартные растворы цинка готовят непосредственно перед испытанием. Для этого 5 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки 1%-ным раствором азотной кислоты. Полученный рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг цинка в 1 мл.

2.2.3. Построение градуированного графика

В мерные колбы вместимостью 50 мл помещают 0; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 и 7,0 мл рабочего раствора цинка, доводят объем до метки 1%-ным раствором азотной кислоты и перемешивают. В ряд делительных воронок вместимостью 50 мл помещают по 5 мл приготовленных растворов, что соответствует 0; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 и 7,0 мкг цинка, приливают по 10 мл комплексного буферного раствора и перемешивают. Затем приливают по 10 мл рабочего раствора дитизона, встряхивают содержимое воронок в течение 1 мин и оставляют в покое до полного расслоения жидкости. Нижний слой, содержащий дитизонат цинка, сливают в кювету фотоэлектроколориметра с толщиной слоя 1 см, закрывают крышкой для предотвращения испарения четыреххлористого углерода и измеряют оптическую плотность экстракта по отношению к рабочему раствору дитизона при светофильтре с 538 нм (зеленый светофильтр). По полученным данным строят градуировочный график.

2.3. Проведение испытания

В делительную воронку вместимостью 50 мл помещают пипеткой 5 мл минерализата, нейтрализуют концентрированным аммиаком до pH 5,0, добавляют 10 мл комплексного буферного раствора и далее поступают также, как в 2.2.3.

Если в 5 мл минерализата находится более 5 мкг цинка, то минерализат соответствующим образом разбавляют 1%-ным раствором азотной кислоты и повторяют анализ, взяв 5 мл разбавленного минерализата. Если в 5 мл минерализата содержится менее 0,5 мкг цинка, то для получения минерализата анализ повторяют, увеличивая навеску пробы продукта.

В качестве холостого опыта используют минерализат, полученный по 2.2.1., но без исследуемой пробы, который обрабатывают также, как и минерализат исследуемой пробы.

2.4. Обработка результатов

Содержание цинка (С) в пищевом продукте в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:

, где

А - содержание цинка в исследуемом растворе, найденное по градуировочному графику, мкг;

- количество минерализата, пошедшее на исследование, мл;

- общее количество минерализата, полученное по 2.2.1.;

М - масса образца, взятого для испытания, г или мл.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,1 мг/кг.

Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,1 мг/кг. Минимальное содержание цинка, определяемое данным методом - 1 мг/кг.

3. Полярографический метод определения цинка в пищевых продуктах

Метод основан на полярографическом определении цинка в режиме переменного тока.

3.1. Аппаратура, реактивы и растворы

Весы лабораторные рычажные по ГОСТ 19491-74.

Полярограф марки ППТ-1 или других аналогичных марок.

Печь муфельная с терморегулятором.

Плитка электрическая по ГОСТ 306-76.

Тигли фарфоровые вместимостью 20, 50 и 100 мл по ГОСТ 9147-73 или чашки кварцевого стекла вместимостью 100, 150 и 200 мл по ГОСТ 19908-74.

Колбы Кьельдаля, вместимостью 100, 250 мл по ГОСТ 10394-72.

Штатив для сжигания по Кьельдалю.

Беззольные фильтры по ТУ 6-69-1678-72.

Стеклянные шарики.

Стеклянные палочки.

Колбы мерные вместимостью 100, 500 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Колбы конические вместимостью 10 или 25 мл по ГОСТ 23932-79Е.

Кислота азотная, х.ч., по ГОСТ 11125-78.

Кислота ортофосфорная, х.ч., по ГОСТ 6552-58, плотностью 1,88 , разбавленная бидистиллированной водой 1:3 (по объёму).

Кислота серная по ГОСТ 4204-77, х.ч.

Кислота хлорная, х.ч., по МРТУ 6-09-6604-70, плотностью 1,15 , 57%-ный и 30%-ный растворы и 1 М раствор.

Кали едкое, х.ч., или ч.д.а., по ГОСТ 4203-65, 60%-ный раствор.

Пирогаллол, ч.д.а., по ГОСТ 10451-63, или пирогаллол А, ч.д.а., по ГОСТ 6408-52, 25%-ный раствор.

Пергидроль (перекись водорода), х.ч., по ГОСТ 10979-64, 30%.

Ртуть металлическая, P-О, по ГОСТ 4658-73.

Цинк металлический, ч.д.а., по МРТУ 6-09-5477-68.

Цинка окись, о.с.ч. 14-2, по ТУ 6-09-2175-72 или х.ч. по ГОСТ 10262-62, высушенная до постоянного веса при 105°С.

Вода бидистиллированная.

Азот газообразный, о.с.ч., по ГОСТ 9293-74 или любой другой инертный газ, свободный от кислорода. При наличии примеси кислорода газ пропускают через поглотительную смесь, состоящую из 25%-ного раствора пирогаллола и 60%-ного раствора едкого кали в соотношении 1:5 (по объёму).

Аммоний хлористый, х.ч. по ГОСТ 3760-79.

Аммиак водный очищенный 8,0-8,5 М (14-15%). Водный раствор, для получения которого на дно эксикатора помещают 2-3 г или и приливают 500 мл концентрированного аммиака, на фарфоровый вкладыш устанавливают чашку с 250 мл бидистиллированной воды. Эксикатор закрывают и выдерживают 4-5 дней. В результате в чашке получают 8,0-8,5 М (14-15%) раствор аммиака.

Примечание. Подготовку посуды к анализу проводят по 2.1, примечание 1.

3.2. Подготовка к испытаниям

3.2.1. Подготовка пробы

Подготовка проб зависит от вида продукта и предполагаемого использования фонового электролита. Используется только сухое озоление. При этом сухое озоление, вплоть до стадии получения белой золы, проводится для большинства продуктов по 2.2.1.1.1., для напитков по 2.2.1.2.1., а далее в зависимости от состава фонового электролита. Озоление жировых продуктов проводят по 2.2.1.3.

При использовании фонового электролита А, приготовленного по 3.2.3.1., в чашку с белой золой вносят 2 мл 30%-ного раствора хлорной кислоты и нагревают в течение 5 мин. Охлажденный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 10 или 25 мл и доводят до метки фоновым электролитом 3.2.3.1.

При использовании фонового электролита В, приготовленного по 3.2.3.2., в чашку с белой золой добавляют 5 мл разбавленной (1:2) азотной кислоты и полученный раствор выпаривают досуха на кипящей водяной бане. Затем в чашку добавляют 2 мл 30%-ной хлорной кислоты и нагревают на водяной бане 5 мин. Раствор охлаждают, добавляют 3 мл разбавленной (1:3) ортофосфорной кислоты и количественно переносят в мерную колбу на 10 мл и доводят до метки бидистиллированной водой. В случае образования осадка раствор перед определением фильтруют через беззольный фильтр, предварительно промытым фоновым электролитом по 3.2.3.2. и высушенным на воздухе до сухого состояния.

При использовании фонового электролита С, приготовленного по 3.2.3.2., в чашку с белой золой добавляют 10 мл разбавленной (1:1) соляной кислоты и нагревают на водяной бане до полного растворения золы. Затем полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, смывая чашку бидистиллированной водой. Далее раствор нейтрализуют 15%-ным водным раствором аммиака по универсальной индикаторной бумаге и добавляют 0,5 мл раствора 15%-ного аммиака. Затем доводят раствор в колбе до метки бидистиллированной водой. В случае образования осадка раствор перед определением фильтруют через беззольный фильтр.

3.2.2. Приготовление стандартного раствора цинка

Стандартные растворы цинка готовятся по 2.2.2.

3.2.3. Приготовление фоновых электролитов

3.2.3.1. Фоновый электролит А - 1 н. хлорная кислота (используется для анализа зернобобовых, хлеба, кондитерских изделий и напитков). 176,2 мл 57%-ной хлорной кислоты разводят до 1 л бидистиллированной водой.

3.2.3.2. Фоновый электролит В (используется для анализа ягод, фруктов, овощей, мяса и рыбы). Для этого смешивают разбавленную (1:3) ортофосфорную кислоту, 30%-ную хлорную кислоту и бидистиллированную воду в отношении 3:2:5.

3.2.3.3. Фоновый электролит С (используется для анализа мяса, птицепродуктов и желатина). Для этого 53,49 г хлористого аммония растворяют в небольшом количестве воды и переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляю. 235-250 мл 8,0-8,5 М (14-15%) раствора аммиака и доводят до метки бидистиллированной водой.

3.3. Проведение испытания

3.3.1. Определение проводят на полярографе, в режиме переменного тока с ртутно-капельным электродом в электролизере вместимостью от 5 до 25 мл. Ячейки электролизера предварительно тщательно промывают дистиллированной водой, фоновым электролитом и затем поляризуемым раствором. Чистота ячейки и фонового раствора должна быть проконтролирована полярографированием фона.

Запись полярограмм проводят в диапазоне от минус 1,1 до минус 1,8 (относительно данной ртути) в соответствии с инструкцией к полярографу. При этом следят, чтобы время задержки составляло примерно две трети времени жизни капли.

Пик восстановления цинка относительно донной ртути находится при потенциале около минус 1,1-1,4 в зависимости от электролитического фона и состава золы.

Получив полярограмму, определяют высоту пика и проводят расчет содержания цинка в пробе по методу добавок.

При использовании фонового электролита С высота пика определяется относительно касательной к участкам кривой, близлежащим к пику цинка.

3.3.2. Определение цинка в пробе проводят методом добавок.

Для этого в две одинаковые конические колбы вместимостью 10, 25 или 50 мл (в зависимости от предполагаемого содержания металла), помещают 4 или 10 мл минерализата, подготовленного по 3.2.1. В первой колбе доводят объём до 5 или 25 мл, в зависимости от объема электролизера, фоновым электролитом и пропускают газ для удаления кислорода в течение 10-15 мин. Пробу вносят в ячейку, полярографируют и измеряют высоту пика. Во вторую колбу добавляют стандартный раствор, доводят фоновым электролитом до 5 мл или 25 мл, в зависимости от объёма электролизера, пропускают инертный газ и снова полярографируют в тех же условиях.

Добавку следует вносить в малом объёме, чтобы предотвратить изменение концентрации фонового электролита и зольных элементов.

3.4. Обработка результатов

Расчет производят по формуле:

где: С - содержание металла, в мг/кг;

- концентрация стандартного раствора, мг/мл;

- объём добавленного стандартного раствора, мл;

- объём раствора, подготовленного для первого полярографирования, мл;

- высота пика, полученная при первом полярографировании, мм;

- общий объём раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

- высота пика, полученная при втором полярографировании, мм;

- объём раствора, подготовленного ко второму полярографированию, мл;

- объём испытуемого раствора, взятый из общего раствора, приготовленного из озоленной навески, мл;

М - масса образца, взятого для испытания, г;

1000 - множитель для пересчёта результата в мг/кг.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,1 мг/кг. Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается о точностью до 0,1 мг/кг. Минимальное содержание цинка, определённое данным методом, - 1 мг/кг.

Метод определения олова

Нестоящие# методические указания распространяются на все пищевые продукты, консервированные в металлической таре, или упакованные с использованием материалов, содержащих соединения олова, и устанавливают метод определения в них олова.

1. Отбор проб

2. Колориметрический метод

Настоящий стандарт распространяется на все пищевые продукты, консервированные в металлической таре или упакованные с использованием материалов, содержащих соли олова, и устанавливает колориметрический метод определения олова, основанный на образовании окрашенного соединения четырехвалентного олова с кверцетином и измерении интенсивности окраски колориметрически.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы и растворы

Весы лабораторные марки ВЛА - 200 г -М или других аналитических марок.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр марки ФЭК-56 или другой аналогичной марки.

Пипетка электрическая по ГОСТ 306-76.

Штативы химические.

Колбы Кьельдаля вместимостью 250 мл по ГОСТ 10394-72.

Колбы мерные вместимостью 50, 250, 500, 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Воронки капельные вместимостью 100 мл.

Цилиндры мерные вместимостью 10 и 50 мл по ГОСТ 1770-74.

Воронки вместимостью 25 мл по ГОСТ 1770-74.

Аммиак водный по ГОСТ 3760-64, 25%-ный раствор.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

Кверцетин, раствор. Готовят растворением 0,2 г кверцетина (ч.д.а.) в 100 мл 96%-ного спирта при комнатной температуре.

Раствор фильтруют.

Кислота азотная х.ч. по ГОСТ 4461-77, концентрированная.

Кислота серная х.ч. по ГОСТ 4204-77, концентрированная.

Кислота соляная х.ч. по ГОСТ 3118-77, 8%-ный раствор.

Натрия гидрат окиси (натр едкий) по ГОСТ 4328-77, 20%-ный раствор.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233-77, насыщенный раствор.

Олово (гранулированное) ч.д.а., ТУ 6-09-2704-78.

Олово двухлористое () по ГОСТ 36-68.

Перекись водорода (пергидроль) по ГОСТ 177-77, 30%-ная.

Спирт этиловый по ГОСТ 5962-67 или 18300-72.

Тиомочевина по ГОСТ 6344-73, 10%-ный раствор.

Фильтры беззольные по ТУ 6-69/-1678-72.

2.2. Подготовка к испытаниям

2.2.1. Подготовка пробы

2.2.1.1. Для большинства продуктов, кроме напитков (типа вина, пива, фруктовых вод и прозрачных соков) и жировых продуктов (типа растительного и животного масла) используется мокрое озоление по следующей прописи.

Навеску гомогенизированного продукта весом около 25 г взвешивают на беззольном фильтре с точностью до 0,001 г и помещают в колбу Кьельдаля вместимостью 250 мл или в жаростойкий стакан. Вносят туда 2-3 стеклянные бусинки или немного толченного химического стекла, обработанного при нагревании в смеси концентрированных серной и азотной кислот. Приливают в колбу или стакан концентрированную азотную кислоту из расчёта 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ, дают постоять 15-30 минут и прибавляют столько же концентрированной серной кислоты, смесь нагревают сначала слабо, а затем сильнее. Как только содержимое колбы начнет темнеть, добавляют по каплям концентрированную азотную кислоту в количестве в 5 раз больше первоначального. Скорость прибавления азотной кислоты должна быть такой, чтобы сжигаемая смесь имела желтоватый цвет (не допускать потемнения смеси). В конце минерализации, когда содержимое колбы становится светлокоричневого цвета, его охлаждают и осторожно добавляют 10 мл концентрированной азотной кислоты и 3 мл 30%-ной перекиси водорода. Смесь снова нагревают до появления густых белых паров серной кислоты. Если после этого раствор не обесцветился, его снова охлаждают и добавляют ещё одну порцию азотной кислоты и 30%-ной перекиси водорода и вновь нагревают до выделения паров серной кислоты, после чего кипятят ещё 10 минут. Если в течение этого времени жидкость остается бесцветной или светло-желтой, то минерализацию органического вещества считают законченной. Если же начинается потемнение жидкости, то снова прибавляют порцию азотной кислоты и перекиси водорода, дожидаясь выделения густых белых паров серной кислоты. Бесцветную или слабозеленоватую жидкость охлаждают, добавляют 30 мл дистиллированной воды и снова кипятят до появления белых паров серной кислоты. Затем проводят повторное добавление такого же количества воды и нагревают. Дальнейшая обработка минерализата зависит от того, образуется ли во время минерализации осадок окиси кальция:

а) если осадок не образовался, содержимое колбы Кьельдаля переводят полностью в мерную колбу вместимостью 250 мл, колбу Кьельдаля несколько раз промывают небольшими порциями дистиллированной воды, которой дополняют колбу до метки;

б) в случае образования осадка - в колбу с минерализованным раствором вливают 100 мл дистиллированной воды, 10 мл концентрированной серной кислоты, 25 мл концентрированной соляной кислоты и кипятят, пока не растворится осадок, постоянно дополняя испаряющуюся воду. После растворения осадка и охлаждения раствора переносят его полностью в мерную колбу вместимостью 250 мл, колбу Кьельдаля несколько раз промывают дистиллированной водой и дополняют ею содержимое мерной колбы до метки.

Одновременно проводят контрольный опыт, используя применяемые для минерализации и растворения осадка реактивы, прибавляя их в том же количестве и последовательности, что и при озолении пробы.

2.2.1.2. Напитки (кроме вин) выпаривают досуха на водяной бане и следуют по 2.2.1.1. Вина анализируют без озоления.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл конц. азотной кислоты и 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл.

Полученную жидкость переносят в мерную колбу на 250 мл и доводят до метки водой.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора олова

Стандартные растворы олова готовят одним из двух способов.

2.2.2.1. 0,1 г металлического олова, взвешенного с точностью до 0,001 г, растворяют в 10 мл концентрированной соляной кислоты при добавлении 2 мл 30%-ной перекиси водорода. Раствор умеренно нагревают и после добавления 40 мл концентрированной соляной кислоты количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объем раствора до метки дистиллированной водой. В результате получают основной стандартный раствор, в 1 мл которого содержится 1 мг олова. Затем непосредственно перед использованием готовят рабочий стандартный раствор. Для этого 10 мл основного стандартного раствора отмеривают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Полученный рабочий стандартный раствор содержит в 1 мл 100 мкг олова.

2.2.2.2. Непосредственно перед определением 0,190 г двуххлористого олова растворяют в разбавленной (1:1) соляной кислоте и помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки разбавленной (1:1) соляной кислотой. В результате получают основной стандартный раствор, содержащий олова 1 мг в 1 мл. Раствор хранению не подлежит. Перед испытанием готовят рабочий стандартный раствор. Для этого 10 мл основного стандартного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки 0,2 н соляной кислотой. В результате получают рабочий стандартный раствор, содержащий 100 мкг олова в 1 мл.

2.2.2.3. Хранение стандартных растворов проводят по ГОСТ 4212-76.

2.2.3. Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 50 мл вносят пипетками последовательно 0,10; 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50 рабочего стандартного раствора олова, приготовленного по 2.2.2. Затем в каждую колбу наливают 1 мл раствора хлористого натрия и столько дистиллированной воды, чтобы объём общий равнялся 10 мл. Добавив в каждую колбу 5 мл 8%-ной соляной кислоты, 10 мл раствора тиомочевины, 5 мл раствора кверцетина, колбы доливают почти до метки 96%-ным этиловым спиртом. Содержимое колб перемешивают и выдерживают в водяной бане в течение 20 минут при температуре 20°С. Затем добавляют этиловый спирт точно до метки и после перемешивания определяют оптическую плотность по сравнению с холостой пробой на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре. При работе на фотоэлектроколориметре используют кювету толщиной 2 см и синий светофильтр с около 437 нм. Измерение оптической плотности на спектрофотометре производят при длине волны 437 нм. Холостая проба готовится аналогично, но без введения стандартного раствора олова.

2.3. Проведение испытания

5 мл минерализата переносят пипеткой в мерную колбу вместимостью 50 мл, опускают в нее кусочек лакмусовой бумаги и очень осторожно нейтрализуют из бюретки 20%-ным раствором едкого натра или концентрированным раствором гидрата окиси аммония, отмечая объём израсходованной щелочи. После этого добавляют столько воды, чтобы общий объём раствора составил 10 мл. Затем добавляют 5 мл 8%-ной соляной кислоты, 10 мл тиомочевины, 5 мл раствора кверцетина, доливают этиловым спиртом почти до метки, осторожно перемешивают и выдерживают на водяной бане 20 мин при температуре 20°С. Устанавливают уровень раствора в колбе точно по метке, доливая в случае необходимости этиловый спирт, и после перемешивания определяют оптическую плотность по сравнению с холостой пробой, которая готовится так же, но вместо минерализата образца используется образец, приготовленный по 2.2.1. без исследуемой пробы. Определение оптической плотности ведут при тех же условиях, что и при построении градуировочного графика (2.2.3).

2.4. Обработка результатов

Содержание олова в образце (С) в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:

где: А - количество олова в исследуемой пробе, найденное по градуировочному графику, мкг;

- количество раствора после минерализации пробы, взятое для исследования, мл.

V - количество минерализата, полученное по 2.2.1, мл.

М - масса пищевого продукта, взятого для минерализации, г или мл.

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,1.

Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью 1 мг/кг. Минимальное содержание олова, определяемое данным методом - 5 мг/кг.

Методы определения меди

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты и пищевое сырье для их получения и устанавливают методы определения в них меди.

1. Отбор проб для испытаний

Отбор проб проводится в соответствии с действующими ГОСТами или Техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод с дибензилдитиокарбаматом цинка

Метод основан на реакции меди с дибензилдитиокарбаматом цинка в результате которой образуется комплексное соединение желтого цвета, которое экстрагируется четыреххлористым углеродом. Интенсивность окраски экстрагированного соединения измеряется колориметрически.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Воронки стеклянные по ГОСТ 8613-75 тип ВД вместимостью 100 и 250 мл и тип В.

Колбы мерные 100 и 500 мл по ГОСТ 1770-74

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026-76

Пипетки 1, 2, 5 и 20 мл по ГОСТ 20292-74

Пробирки стеклянные с притертыми пробками по ГОСТ 10515-75

Кислота серная по ГОСТ 4204-77, х.ч., плотностью 1,83-1,84 , 10%-ный раствор

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67

Тигли фарфоровые вместимостью 20, 50 и 100 мл по ГОСТ 9147-73

Печь муфельная с терморегулятором

Стаканы химические жаростойкие вместимостью 50 и 100 мл

Кислота азотная, х.ч., по ГОСТ 4461-67, концентрированная

Пергидроль (перекись водорода), х.ч., по ГОСТ 10929-64, 30%-ный раствор

Штатив для сжигания по Кьельдалю

Колбы Кьельдаля вместимостью 100 и 250 мл по ГОСТ 10394-72

Электроплитка

Фильтры беззольные по ТУ 6-09-1678-72

Стеклянные шарики

Стеклянные палочки

Углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288-74, ч

Дибензилдитиокарбамат цинка, ч.д.а., 0,05%-ный раствор в четыреххлористом углероде

Медь сернокислая, х.ч. или ч.д.а., по ГОСТ 4165-68, дважды перекристаллизованная

2.2. Подготовка к испытаниям

2.2.1. Правила подготовки проб

Для большинства продуктов методика подготовки проб является одной и той же. Исключение составляют: 1) напитки типа вина, пива, фруктовых вод и прозрачных соков; 2) жировые продукты типа растительного и животного масел, их производные и продукты, в которых они преобладают.

2.2.1.1.1. Сухое озоление

Пробу (3-50 г в зависимости от предполагаемого содержания элемента в продукте) обугливают на электрической плитке (можно дополнительно облучать ИК-лампой) и затем помещают в муфельную печь. Затем постепенно увеличивают температуру муфеля до 450°. После получения бурой золы ее смачивают разбавленной азотной кислотой (1:1), квалификации о.с.ч. или к золе добавляют несколько капель бидистиллированной воды и затем столько же капель азотной кислоты. Полученный образец золы подсушивают на электроплитке и далее снова озоляют в муфельной печи до получения белой золы. В необходимых случаях обработку азотной кислотой повторяют несколько раз. К полученной белой золе добавляют 2 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают досуха. Затем воду растворяют в мерной колбе вместимостью 50 или 100 мл в 1%-ной азотной кислоте и используют для проведения испытаний.

2.2.1.1.2. Мокрое озоление

В колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 5-30 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивают навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляют азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (соотношение зависит от вида продукта); образец оставляют для обугливания на 15-30 минут. Затем осторожно добавляют сначала азотную, а затем серную кислоту в количестве равном первоначальному, и далее образец нагревают (при необходимости можно оставить образец на 18-20 часов для предварительного обугливания после чего производить кипячение). Кипячение образца проводят 0,5-2 часа. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно!) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному или последовательно азотную, серную и хлорную кислоту (в отношении 2:1:1) иди азотную, серную и 30% перекись водорода (2:1:1) и кипятят до обесцвечивания. (Внимание! Хлорную кислоту всегда добавляют последней!). Следует обращать внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 3-4 мл жидкости.

Для удаления остатков кислот, которые мешают дальнейшему анализу, в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Полученный прозрачный раствор переносят в мерную колбу на 50 или 100 мл, доводят до метки 1% азотной кислотой и используют для проведения испытаний.

2.2.1.2. При анализе напитков, кроме вин, коньяков и коньячных спиртов, производят сухое или мокрое озоление. Вина, коньяки и коньячные спирты озолению не подвергают и анализируют непосредственно без озоления.

2.2.1.2.1. Сухое озоление

Напитки выпариваю досуха на водяной бане или сушильном шкафу и далее следуют по 2.2.1.1.1.

2.2.1.2.2. Мокрое озоление

Полученный тем или иным способом минерализат переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл и доводят до метки 1% азотной кислотой и используют для исследований.

Примечание 1. В случае, если при выпаривании на водяной бане жидкость потемнеет, то после охлаждения добавляют еще 10 мл пергидроля, кипятят до получения 5-6 мл жидкости и вновь выпаривают в водяной бане до 2-3 мл.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов используют только мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл концентрированной азотной кислоты и 20 мл 56% хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл. Полученный минерализат переносят в мерную колбу вместимостью 50 иди 100 мл, доводят до метки 1% азотной кислотой и используют для исследований.

2.2.2. Приготовление стандартного раствора меди

3,929 г сернокислой меди (свежеперекристаллизованной и высушенной до постоянного веса в эксикаторе ) растворяют в 1 мл концентрированной серной кислоты и переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят до метки дистиллированной водой. Полученный основной стандартный раствор содержит 1 мг меди в 1 мл. Непосредственно перед определением готовят рабочий стандартный раствор. Для этого 5 мг основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки 0,001 н раствором серной кислоты. Рабочий стандартный раствор содержит 10 мкг меди в 1 мл. Хранение стандартных растворов проводят по ГОСТ 4212-76.

2.2.3. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика 0,5; 1,0; 1,5; 2,0, 2,5; 3,0; 3,5 мл рабочего стандартного раствора, полученного по 2.2.2., отмеряют в делительные воронки вместимостью 250 мл, добавляют 40-50 мл воды, затем в каждую воронку вносят по 5 мл 10%-ного раствора серной кислоты и по 10 мл раствора дибензилдитиокарбамата цинка. После этого полученный раствор взбалтывают 2 минуты и оставляют для расслаивания. Затем фильтруют нижний слой через сухую (обязательно!) стеклянную воронку, в которую вложен небольшой сухой ватный тампон, в сухую (обязательно!) пробирку с притертой пробкой. Оптическую плотность стандартных растворов, содержащих 5, 10, 15, 20, 25, 30 и 35 мкг меди, измеряют на фотоэлектроколориметре при синем светофильтре (=443 нм) или спектрофотометре при длине волны 435 нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют все компоненты, только вместо раствора сернокислой меди берут такое же количество дистиллированной воды.

2.3. Проведение испытания

В делительную воронку вместимостью 250 мл вносят 1-5 мл минерализата, подготовленного по 2.2.1. (при анализе вин, коньяков и коньячных спиртов вносят непосредственно образец, без озоления), добавляют 40-50 мл дистиллированной воды, 5 мл 10%-ного раствора серной кислоты и 10 мл раствора дибензилдитиокарбамата цинка. Взбалтывают 2 минуты, добавляют 5 мл этилового спирта (для красных вин 10 мл) и оставляют для расслаивания. Затем фильтруют нижний слой через сухую (обязательно!) стеклянную воронку с небольшим ватным тампоном в сухую пробирку с притертой пробкой (при наличии следов влаги на посуде образуется эмульсия, мешающая определению).

Испытуемый раствор колориметрируют вместе с раствором сравнения. Раствор сравнения готовят из 50 мл дистиллированной воды и тех же реактивов, которые применялись для приготовления испытуемого раствора.

Примечание. Остающаяся после расслаивания в делительной воронке в нижнем слое незначительная эмульсия не мешает определению. Частички водной фазы в слое четыреххлористого углерода при фильтрации остаются на ватном тампоне.

2.4. Обработка результатов

Содержание меди С в мг/кг или мг/л определяют по формуле

где А - количество меди в испытуемом растворе, найденное по градуировочному графику, мкг;

- количество минерализата, взятое для анализа, мл;

- общее количество минерализата, полученное по 2.2.1., мл;

М - масса продукта, взятая для минерализации, г или мл.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,1 мг/кг. Допускаемые расхождения между параллельными определениями не должны превышать 15% отн. Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,1 мг/кг.

Минимальное содержание меди, определяемое данным методом - 0,1 мг/кг.

3. Колориметрический метод с диэтилдитиокарбаматом натрия

Метод основан на реакции меди с диэтилдитиокарбаматом натрия, в результате которой образуется комплексное соединение желтого цвета, которое экстрагируется четыреххлористым углеродом, интенсивность окраски экстрагированного соединения измеряется колориметрически.

3.1. Аппаратура, реактивы и материалы

Весы аналитические марки АДВ-200 или других аналогичных марок.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр типа ФЭК-56 М.

Печь муфельная.

Плитка электрическая.

Тигли фарфоровые 20, 50 и 100 мл по ГОСТ 9147-73.

Штативы химические.

Воронки химические диаметром 30 мм по ГОСТ 8613-64.

Воронки делительные вместимостью 250 мл.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 2, 5, 10, 20 мл по ГОСТ 1770-74.

Часы песочные на 1 мин по ГОСТ 10576-74 или секундомер по ГОСТ 5072-72.

Фильтры беззольные по ТУ 6-09-1678-72.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

Аммиак водный по ГОСТ 3760-64, 10%-ный раствор.

Аммоний лимоннокислый двухзамещенный по ГОСТ 3653-70

Кислота серная по ГОСТ 4204-66, 10%-ный раствор.

Кислота соляная по ГОСТ 3118-67, 25%-ный раствор.

Натрия гидрат окиси (натр едкий) по ГОСТ 4328-66, 0,1 н раствор

Натрия N,N - диэтилдитиокарбамат по ГОСТ 8864-71, 1%-ный раствор. Готовят растворением 1 г натрия N,N - диэтилдитиокарбамата, взвешенного с точностью до 0,01 г, в дистиллированной воде. Раствор дополняют водой до 100 мл в мерной колбе и хранят в сосуде из темного стекла. Срок хранения раствора - 7 дней.

Медь сернокислая по ГОСТ 4165-68, дважды перекристаллизованная.

Трилон Б по ГОСТ 10652-73.

Смешанный реактив лимоннокислого аммония и трилона Б

20 г лимоннокислого аммония и 5 г трилона Б вносят в мерную колбу на 100 мл, растворяют и доводят до метки дистиллированной водой. Для устранения следов меди полученный раствор переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл, добавляют 0,1 мл 1%-ного раствора диэтилдитиокарбамата натрия и экстрагируют 10 мл хлороформа или четыреххлористого углерода. Органический слой выбрасывают. Повторяют экстрагирование меди из водного раствора до получения бесцветного слоя органического растворителя.

Углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288-74 или

Хлороформ (трихлорметан) по ГОСТ 3160-51.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67 или по ГОСТ 18300-72.

Феноловый красный по ГОСТ 4599-73, 1%-ный раствор.

Готовят растворением 0,1 г фенолового красного, взвешенного с точностью до 0,01 г в 2,85 мл 0,1 н раствора едкого натра и дополняют дистиллированной водой до 100 мл.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850-72, 1% спиртовой раствор.

3.2. Подготовка к испытаниям

3.2.1. Подготовка проб

Подготовка проб к испытаниям, в том числе вин, коньяков и коньячных спиртов проводится по 2.2.1, с использованием сухого или мокрого озоления.

3.2.2. Приготовление стандартного раствора меди

Стандартные растворы меди готовятся по 2.2.2.

3.2.3. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика в делительные воронки вместимостью 250 мл пипетками вносят 0,5; 1; 2; 3; 4 мл рабочего стандартного раствора, т.е. в воронки вносят соответственно 5, 10, 20, 30, 40 мкг меди. Доливают дистиллированной водой до объёма 50 мл, добавляют 10 мл смешанного раствора лимоннокислого аммония и трилона Б, две капли раствора фенолового красного и 25%-ный раствор гидроокиси аммония каплями до тех пор, пока цвет не изменится в фиолетовый (pH 8-9). Вместо фенолового красного можно использовать фенолфталеин. Прибавление аммония в этом случае прекращается после возникновения красной окраски. Смесь охлаждают и добавляют 2 мл 1%-ного раствора диэтилдитиокарбамата натрия и 15 мл четыреххлористого углерода или хлороформа. Интенсивно встряхивают в течение 1 мин, измеряя время песочными часами или секундомером, оставляют стоять до разделения раствора на два слоя. Нижний слой сливают в мерную колбу вместимостью 25 мл. К водному слою в делительной воронке приливают ещё 10 мл четыреххлористого углерода или хлороформа и снова экстрагируют в ту же мерную колбу, в случае небходимости колбу доводят до метки растворителем. После перемешивания содержимое колбы фильтруют через сухой бумажный фильтр в кювету и измеряют оптическую плотность по сравнению с растворителем на спектрофотометре при длине волны 440 нм или на фотоэлектроколориметре, используя синий светофильтр (=443 нм) и кювету с толщиной слоя жидкости 20 мм.

3.3. Проведение испытания

В делительную воронку вместимостью 250 мл вносят 10-25 мл раствора исследуемой пробы (объём аликвоты зависит от содержания меди в образце). Прибавляют в воронку 10 мл смешанного реактива двухзамещенного лимоннокислого аммония и трилона Б, 2 капли фенолового красного и гидроокись аммония каплями до изменения цвета в фиолетовый. Смесь охлаждают, добавляют 2 мл 1%-ного раствора диэтилдитиокарбамата натрия, экстрагируют четыреххлористым углеродом и хлороформом в той же последовательности и количествах, как при построении градуировочного графика по п. 3.2.3. Определяют оптическую плотность относительно растворителя.

3.4. Обработка результатов

Содержание меди в образце (С) в мг/л или мг/кг вычисляют по формуле:

, где

А - количество меди, найденное по градуировочному графику.

- количество минерализата.

- количество минерализата, полученного по 3.2.1.

М - масса продукта, взятого для минерализации, г или мл.

Вычисление результатов проводят с точностью до 0,1. За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух параллельных определений, выполненных из одной пробы.

Расхождение между параллельными определениями не должно превышать 15% отн.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,1 мг/кг. Минимальное содержание меди, определяемое данным методом, - 1 мг/кг.

4. Полярографический метод

Метод основан на полярографическом определении меди в режиме переменного тока.

4.2. Аппаратура, реактивы и материалы

Весы лабораторные по ГОСТ 19491-74.

Полярограф марки ППТ-1 или других аналогичных марок.

Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Колбы конические вместимостью 10 или 25 мл по ГОСТ 23932-79Е.

Кислота ортофосфорная, х.ч., по ГОСТ 6652-58, плотностью 1,88 , разбавленная бидистиллированной водой 1:3 (по объёму).

Кислота хлорная, х.ч., по МРТУ 6-09-6604-70, плотностью 1,5 , 57% и 30%-ный раствор и 1 М раствор.

Кали едкое, х.ч., или ч.д.а., по ГОСТ 4203-65, 60%-ный раствор.

Пирогаллол, ч.д.а., по ГОСТ 10451-63; или пирогаллол А, ч.д.а., по ГОСТ 6408-52, 25%-ный раствор.

Медь сернокислая, х.ч. для ч.д.а. по ГОСТ 4165-68, дважды перекристаллизованная.

Ртуть металлическая, P-О, по ГОСТ 4658-73.

Вода бидистиллированная.

Азот газообразный, о.с.ч., по ГОСТ 9293-74 или любой другой инертный газ, свободный от кислорода. При наличии примеси кислорода газ пропускают через поглотительную смесь, состоящую из 25%-ного раствора пирогаллола и 60%-ного раствора едкого кали в соотношении 1:5 (по объёму).

Тигли фарфоровые, вместимостью 20; 50; 100 мл по ГОСТ 9147-73.

Печь муфельная с терморегулятором.

Кислота азотная, х.ч. по ГОСТ 4461-67, концентрированная.

Кислота серная, х.ч. по ГОСТ 4207-77, плотность 1,83-1,84 .

Пергидроль (перекись водорода) по ГОСТ 10929-64, 30%-ный р-р.

Фильтры беззольные по ТУ 6-09-1678-72.

Стеклянные шарики.

Стеклянные палочки.

Штатив для сжигания по Кьельдалю.

Колбы Кьельдаля, вместимостью 100 и 250 мл по ГОСТ 10394-72.

4.2. Подготовка к испытаниям

4.2.1. Подготовка проб

Используют только сухое озоление. При этом подготовка проб для большинства продуктов, кроме напитков и жировых продуктов проводится по 2.2.1.1.1., для напитков, включая вина, коньяки и коньячные спирты по 2.2.1.2.1. Подготовка проб для жировых продуктов проводится по 2.2.1.3.

4.2.2. Приготовление стандартного раствора меди

Стандартные растворы меди готовятся по 2.2.2.

4.2.3. Приготовление фоновых электролитов

4.2.3.1. Фоновый электролит А - 1 н хлорная кислота (используется для анализа зернобобовых, хлеба, кондитерских изделий и напитков).

Для этого 176,2 мл 57%-ной хлорной кислоты разводят до 1 л бидистиллированной водой.

4.2.3.2. Фоновый электролит В - 1 М ортофосфорная + 0,5 н хлорная кислота (используется для анализа фруктов, овощей, соков, компотов, варенья, консервов овощных, мясных и рыбных, мяса и мясопродуктов, рыбы и рыбопродуктов).

Для этого смешивают разбавленную (1:3) ортофосфорную кислоту, 30%-ную хлорную кислоту и бидистиллированную воду в соотношении 3:2:5.

4.2.3.3. Фоновый электролит С - 0,1 н соляная кислота (используется для анализа мяса птицы, птицепродуктов и яичных продуктов).

4.3. Проведение испытания

4.3.1. Определение проводят на полярографе, в режиме переменного тока с ртутно-капельным электродом в электролизере вместимостью от 5 до 25 мл. Ячейку электролизера предварительно тщательно промывают дистиллированной водой, фоновым электролитом и затем поляризуемым раствором. Чистота ячейки и фонового раствора должна быть проконтролирована полярографированием фона.

Запись полярограмм приводят в диапазоне от 0 до минус 0,4 (относительно донной ртути) в режиме "анализ тест-регистрации", синхронизации, равной 2-3, амплитуде, равной 2-3, амплитуде переменного тока 4-12 мВ, скорости развертки 2-5 мВ/сек, скорости диаграммной ленты 720-1800 мм/час. Время задержки должно составлять примерно две трети времени жизни капли.

Чувствительность записи от 20 х 100 до 10 т/25 т х 100 в зависимости от содержания металла в пробе.

Пик восстановления цинка относительно донной ртути находится при потенциала около минус 0,2-0,3 в зависимости от электролитического фона и состава золы.

Получив полярограмму, определяют высоту пика и проводят расчет содержания цинка в пробе по методу добавок.

4.3.2. Проводят предварительную подготовку минерализата. Минерализат, полученный по 4.2.1, помещают в фарфоровую чашку и выпаривают на кипящей водяной бане до состояния влажных солей. Затем вносят 2 мл 30%-ного раствора хлорной кислоты и нагревают в течение 5 минут. Охлажденный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 10 или 25 мл и доводят до метки фоновым растворителем, приготовленным по 4.2.3.

4.3.3. Определение меди в пробе проводят методом добавок. Для этого в две одинаковые конические колбы вместимостью 10, 25 или 50 мл (в зависимости от предполагаемого содержания металла) помещают 4 или 10 мл минерализата, подготовленного по 4.3.2. В первой колбе доводят объём до 5 или 25 мл в зависимости от объёма электролизера, фоновым электролитом и пропускают инертный газ для удаления кислорода в течение 10-15 минут. Пробу вносят в ячейку, полярографируют и измеряют высоту пика. Во вторую колбу добавляют стандартный раствор, доводят фоновым электролитом до 5 или 25 мл, в зависимости от объёма электролизера, пропускают инертный газ и снова полярографируют в тех же условиях.

Концентрацию стандартного раствора подбирают так, чтобы высота пика на второй полярограмме примерно удвоилась по сравнению первоначальной.

4.4. Обработка результатов

Расчет производят по формуле:

где С - содержание металла, в мг/кг.

- концентрация стандартного раствора, мг/мл.

- объём добавленного стандартного раствора, мл.

- объём раствора, подготовленного для первого полярографирования, мл.

- высота пика, полученная при первом полярографировании, мм.

- общий объём раствора, приготовленного из озоленной навески, мл.

- высота пика, полученная при втором полярографировании, мм.

- объём раствора, подготовленного ко второму полярографированию, мл.

- объём испытуемого раствора, взятый из общего раствора, приготовленного из озоленной навески, мл.

М - масса образца, взятого для испытания, г.

1000 - множитель для пересчёта результата в мг/кг.

Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,1 мг/кг.

Минимальное содержание меди, определяемое данным методом, - 1 мг/кг.

Метод определения железа

Настоящие методические указания распространяются на все пищевые продукты, выпускаемые промышленностью, и устанавливают метод определения в них железа.

1. Отбор проб

Отбор проб для испытаний проводится в соответствии с действующими ГОСТами или Техническими условиями на исследуемую продукцию.

2. Колориметрический метод

Метод основан на образовании комплексного соединения красного цвета при взаимодействии ионов двухвалентного железа с ортофенантролином.

2.1. Аппаратура, материалы, реактивы

Весы лабораторные по ГОСТ 19491-74.

Спектрофотометр СФ-10 или других аналогичных марок, или фотоэлектроколориметр ФЭК-56 ПМ или других аналогичных марок, имеющих светофильтр с максимумом пропускания в области 480-520 нм (оптимально 508 нм).

Электроплитка по ГОСТ 306-76 или других аналогичных марок.

Штатив для сжигания по Кьельдалю.

Колбы Кьельдаля, вместимостью 100 и 250 мл по ГОСТ 10394-72.

Стеклянные шарики.

Колбы мерные вместимостью 50, 100 и 1000 мл по ГОСТ 1770-74.

Печь муфельная с терморегулятором.

Стаканы химические, жаростойкие, вместимостью 50 и 100 мл.

Тигли фарфоровые вместимостью 20, 50 и 100 мл по ГОСТ 9147-73 или чашки из кварцевого стекла по ГОСТ 19908-74, вместимостью 100, 150 и 200 мл.

Цилиндры мерные вместимостью 10, 25 и 50 мл по ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл по ГОСТ 1770-74.

Стеклянные палочки.

Кислота азотная, о.с.ч. по ГОСТ 4461-67, плотностью 1,4 ,концентрированная.

Кислота серная, х.ч. по ГОСТ 4204-66, плотностью 1,84 , концентрированная и 20%-ный раствор.

Кислота соляная, х.ч., по ГОСТ 3118-77, плотностью 1,19 ,концентрированная.

Кислота хлорная, х.ч., по МРТУ 6-09-6604-70, плотностью 1,15 , 57%-ный раствор.

Пергидроль (перекись водорода) х.ч., по ГОСТ 10929-64, 30%-ный раствор.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

Натрий уксуснокислый х.ч. или ч.д.а. по ГОСТ 199-68, 20%-ный раствор.

Гидроксиламин солянокислый, ч.д.а., по ГОСТ 5456-65 или гидроксиламин сернокислый, ч.д.а., по ГОСТ 7298-65, 1%-ный раствор.

О-фенантролин, ч.д.а., по МРТУ 6-09-2680-65, 0,25%-ный раствор.

Соль закиси железа и аммония двойная сернокислая (соль Мора) по ГОСТ 4208-72.

Бумага универсальная рН 1-10 по ТУ МХП ОРУ 76-56.

Беззольные фильтры по ТУ 6-09-1678-72.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1. Подготовка проб

2.2.1.1.1. Сухое озоление

В связи с тем, что некоторые соединения исследуемого элемента, например, хлориды, летучи - при озолении их переводят в менее летучие нитраты.

Пробу (3-50 г) в зависимости от предполагаемого содержания элемента в продукте обугливают на электрической плитке (можно дополнительно облучать ИК-лампой) и затем помещают в муфельную печь. Затем постепенно увеличивают температуру муфеля до 450°. После получения бурой золы её смачивают разбавленной азотной кислотой (1:1), квалификации о.с.ч. или к золе добавляют несколько капель бидистиллированной воды и затем столько же капель азотной кислоты. Полученный образец золы подсушивают на электроплитке и далее снова озоляют в муфельной печи до получения белой золы. В необходимых случаях обработку азотной кислотой повторяют несколько раз. Полученную белую золу растворяют в мерной колбе на 50 или 100 мл в 1% азотной или соляной кислоте и используют для проведения испытаний.

2.2.1.1.2. Мокрое озоление

В колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан вносят образец продукта в количестве 5-30 г в зависимости от содержания сухих веществ. Для этого отвешивают на беззольном фильтре навеску измельченной пробы с точностью не хуже 0,01 г, заворачивают навеску в этот фильтр и с помощью стеклянной палочки помещают навеску на дно колбы Кьельдаля или жаростойкого стакана, добавляют 2-3 стеклянных шарика. Далее добавляют азотную кислоту из расчета 1-3 мл кислоты на 1 г сухих веществ (соотношение зависит от вида продукта); образец оставляют для обугливания на 15-30 мин. Затем осторожно добавляют сначала азотную, а затем серную кислоту в количестве, равном первоначальному, и далее образец нагревают (при необходимости можно оставить образец на 18-20 час. для предварительного обугливания, после чего производить кипячение). Кипячение образца проводят 0,5-2 часа. Если раствор за это время не обесцветился, то образцы охлаждают (обязательно!) и добавляют в зависимости от вида продукта азотную кислоту в количестве, равном первоначальному или (последовательно азотную, серную и хлорную кислоты в отношении 2:1:1) или азотную, серную и 30% перекись водорода (2:1:1) и кипятят до обесцвечивания. (Внимание! Хлорную кислоту всегда добавляют последней!). Следует обратить внимание, чтобы в колбе или стакане при кипячении всегда оставалось не менее 3-4 мл жидкости.

Для удаления остатка кислот, которые мешают дальнейшему анализу, проводят их удаление. Для этого в колбу или жаростойкий стакан добавляют бидистиллированную воду в двойном количестве по отношению к первоначальному количеству азотной кислоты и кипятят до выделения белых паров. Эту операцию повторяют дважды. Полученный прозрачный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл, разбавляют водой и используют для проведения испытаний.

2.2.1.2. При анализе напитков производят сухое или мокрое озоление.

2.2.1.2.1. Сухое озоление

Напитки выпариваю досуха на водяной бане или сушильном шкафу и далее следуют по 2.2.2.1.

2.2.1.2.2. Мокрое озоление

10-20 мл напитка отмеривают в колбу Кьельдаля и добавляют для напитков с содержанием сахара до 1 г/100 мл 25 мл пергидроля, для остальных напитков 50 мл пергидроля, нагревают до кипения и далее следуют по одной из следующих прописей.

Напитки с содержанием сахара от 13 до 22 г/100 мл кипятят, пока не останется 10-15 мл, охлаждают, добавляют 25 мл пергидроля, вновь кипятят до 5-6 мл и выпаривают в водяной бане до 2-3-х мл.

Полученный тем или иным способом минерализат переносят в мерные колбы вместимостью 50 или 100 мл и доводят до метки 1%-ной азотной кислотой.

При выпаривании в водяной бане колба не должна касаться дна бани. Нагревание с пергидролем проводят в вытяжном шкафу.

3. Белые вина и светлые сорта пива минерализации не подлежат и используются для определения непосредственно.

2.2.1.3. При анализе жировых продуктов используют только мокрое озоление. Для этого 10 г образца помещают в колбу Кьельдаля или жаростойкий стакан и нагревают 7-8 часов до образования вязкой массы, охлаждают и затем добавляют 40 мл концентрированной азотной кислоты и 20 мл 56%-ной хлорной кислоты и вновь нагревают до получения бесцветной жидкости. Если жидкость при этом темнеет, то к ней добавляют азотную кислоту порциями по 5 мл. Полученную жидкость переносят в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл и доводят до метки 1%-ной азотной кислотой.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

3.2.2. Приготовление стандартного раствора железа

0,702 г соли Мора растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в воде, содержащей 0,4 мл 10%-ного раствора серной кислоты и доводят до метки дистиллированной водой. Основной стандартный раствор содержит 1 мг железа в 1 мл. Раствор хранению не подлежит и готовится непосредственно перед определением.

Для получения рабочего стандартного раствора 10 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят до метки 0,001 н серной кислотой. Полученный в результате рабочий стандартный раствор содержит 20 мкг железа в 1 мл.

Условия хранения стандартных растворов должны соответствовать ГОСТ 4212-76 "Реактивы. Методы приготовления растворов для колориметрического, нефелометрического и других видов анализа".

3.2.3. Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 50 мл вносят 0,25; 0,50; 1,00; 1,50; 2,00; 2,50; 3,00 и 4,00 мл рабочего стандартного раствора железа, содержащих соответственно 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60 и 80 мкг железа. В каждую колбу добавляют по 10 мл раствора солянокислого или сернокислого гидроксиламина. Доводят pH до 4-6 по универсальной индикаторной бумаге, добавляя 20%-ный раствор уксуснокислого натрия. Затем в колбы вносят по 1 мл 0,25%-ного раствора о-фенантролина и доводят объём до метки дистиллированной водой. Перемешивают и через 15 мин фотометрируют при светофильтре с 508 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм. В качестве раствора сравнения используют все компоненты, исключая раствор железа.

2.3. Проведение испытания

В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят аликвоту раствора минерализата пробы, подготовленного по 2.2.1. в таком объёме, чтобы содержание железа в колбе составляло 10-80 мкг. Прибавляют в колбу все компоненты и в той же последовательности, что и при построении градуировочного графика по 2.2.3.

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Вместо цифр "2.2.3" следует читать "3.2.3"

Содержимое колб доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Измеряют оптическую плотность растворов при светофильтре с 508 нм по сравнению с холостой пробой. Для получения холостой пробы используют мнерализат, полученный по 2.2.1, но без испытуемого образца, который подвергается всем вышеописанным операциям.

ГАРАНТ:

Нумерация разделов приводится в соответствии с источником

3.4. Обработка результатов

Содержание железа в образце (С) в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:

где: А - содержание железа в аликвоте пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

- количество минерализата, взятое для анализа, мл;

- общее количество минерализата, полученное по 2.1.2. мл;

М - масса продукта, взятая для минерализации, г или мл.

За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений, выраженных с точностью до 0,1 мг/кг. Допустимое расхождение параллельных определений не более 15% отн. Конечный результат анализа выражается с точностью до 0,1 мг/кг. Минимальное содержание железа, определяемое данным методом, - 1 мг/кг (для коньяков - 0,1 мг/л).

<< Назад		Приложение 2. >> Рекомендации по определению сурьмы, никеля, селена, хрома, алюминия, фтора и йода
	Содержание Временные гигиенические нормативы содержания некоторых химических элементов в основных пищевых продуктах (утв. Главным государственным...

Приложение 1. Методические указания по количественному определению ртути, кадмия, свинца, мышьяка, меди, цинка, олова и железа в пищевых продуктах

ГАРАНТ:

ГАРАНТ:

ГАРАНТ:

ГАРАНТ:

ГАРАНТ:

Вы можете открыть актуальную версию документа прямо сейчас.