Приложение А (обязательное). Методика определения массовой доли лактозы поляриметрическим методом для градуировки инфракрасных анализаторов при измерении массовой доли лактозы в молоке и молочных продуктах

Информация об изменениях:

Изменением N 1, утвержденным приказом Росстандарта от 22 сентября 2016 г. N 1194-ст, в гриф внесены изменения, вступающие в силу с 1 января 2017 г.

См. текст грифа в предыдущей редакции

Приложение А
(обязательное)

Методика
определения массовой доли лактозы поляриметрическим методом для градуировки инфракрасных анализаторов при измерении массовой доли лактозы в молоке и молочных продуктах

С изменениями и дополнениями от:

22 сентября 2016 г.

Б.1 Сущность метода

Метод основан на поляриметрическом определении содержания лактозы после осаждения белков и жиров уксуснокислым цинком и железистосинеродистым калием.

Метод применяется для молока и молочных продуктов, не содержащих сахарозу.

Б.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы

Сахариметр универсальный диапазоном измерения угла вращения плоскости поляризации при длине волны 589,3 нм от минус 40°S до плюс 130°S, пределом абсолютной допускаемой погрешности не более 0,05, со стеклянными кюветами длиной 200 и 400 мм.

Весы неавтоматического действия по ГОСТ 24104, ГОСТ OIML R 76-1-2011 с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более 0,001 г.

Часы электронно-механические по ГОСТ 27752.

Колбы 1-100-2, 2-100-2,1-200-2, 2-200-2, 1-1000-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-2-5, 2-2-5, 1-2-25, 2-2-25 по ГОСТ 29169.

Воронки типа В, диаметром 36, 75, 100 мм, из химически стойкого стекла группы ХС по ГОСТ 25336.

Колбы Кн-1-250, Кн-2-250 ТС по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-100, В-2-100 ТС по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Калий йодистый по ГОСТ 4232, ч.д.а.

Калий железистосинеродистый 3-водный (желтая кровяная соль) по ГОСТ 4207, х.ч. Или ч.д.а., раствор массовой концентрации 150 .

Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч., раствор молярной концентрации с (HCI) = 4,0 .

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, 1%-ный раствор.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат натрия) 5-водный ГОСТ 27068, х.ч., раствор молярной концентрации 0,1 моль/.

Цинк уксуснокислый 9-водный по ГОСТ 5823, ч.д.а., раствор массовой концентрации 300 .

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерения, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающих необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

Б.3 Подготовка к проведению измерений

Б.3.1 Приготовление раствора уксуснокислого цинка массовой концентрации 300 

В мерную колбу вместимостью 1000  помещают (300,000,01) г уксуснокислого цинка, добавляют небольшое количество дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора при температуре (205)°С - не более 3 мес.

Б.3.2 Приготовление раствора железистосинеродистого калия массовой концентрации 150 

В мерную колбу вместимостью 1000  помещают (150,0000,001) г железистосинеродистого калия, добавляют небольшое количество дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора в склянке из темного стекла в темном месте при температуре (205)°С - не более 3 мес.

Б.3.3 Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации с (HCI) = 4

В мерную колбу вместимостью 1000  помещают 300 - 400  дистиллированной воды и осторожно при перемешивании 340  концентрированной соляной кислоты плотностью 1,188 . Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора при температуре (205)°С - не более 3 мес

Б.3.4 Приготовление раствора серноватистокислого натрия (тиосульфата натрия) молярной концентрации с () = 0,1 моль/

Б.3.4.1 В мерную колбу вместимостью 1000  помещают (24,8000,001) г тиосульфата натрия, растворяют в небольшом количестве бидистиллированной воды, прибавляют (0,2000,001) г безводного углекислого натрия и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки. Для приготовления раствора тиосульфата натрия используют также свежепрокипяченную дистиллированную воду. Охлаждают воду в колбе с закрытой пробкой, через которую проходит хлоркальциевая трубка, наполненная кусочками натронной извести.

Срок хранения раствора в склянке из темного стекла в темном месте при температуре (205)°С - не более 1 мес.

Б.3.4.2 Определение массовой концентрации раствора серноватистокислого натрия

В коническую колбу вместимостью 500  с притертой пробкой вносят 1 - 2 г йодистого калия, приливают 2 - 3  дистиллированной воды, затем прибавляют 5  соляной кислоты, полученной разбавлением с дистиллированной водой в соотношении 1:5, вносят 20  раствора двухромовокислого калия (Б.3.6). Закрыв колбу пробкой, содержимое тщательно перемешивают, дают раствору постоять 5 мин, после чего титруют раствором серноватистокислого натрия (массовую концентрацию которого устанавливают), приливая его из бюретки вместимостью 25  постепенно при постоянном перемешивании. Когда коричневый цвет раствора перейдет в желтовато-зеленый, в колбу добавляют 1  1%-ного раствора крахмала (Б.3.5) и 250 - 300  дистиллированной воды (для более точного определения окончания титрования). Затем титрование продолжают, приливая тиосульфат натрия по каплям до резкого перехода цвета раствора от синего до светло-зеленого, обусловленного ионами трехвалентного хрома.

Массовую концентрацию (титр раствора) раствора серноватистокислого натрия , в пересчете на сахарозу, , вычисляют по формуле

(Б.1)

где 0,0171 - массовая концентрация сахарозы, соответствующая 1  раствора тиосульфата натрия молярной концентрации 0,1 , ;

20 - объем раствора двухромовокислого калия молярной концентрации 0,1 , ;

- объем раствора тиосульфата натрия, израсходованный на титрование 20  раствора двухромовокислого калия молярной концентрации 0,1 моль/, .

Вычисления проводят до четвертого десятичного знака.

Б.3.5 Приготовление 1%-ного раствора крахмала

(1,0000,001) г крахмала растворяют в 10  холодной дистиллированной воды. Полученную смесь приливают тонкой струйкой при непрерывном помешивании в 90  кипящей дистиллированной воды. Горячий готовый крахмал отфильтровывают в бутылку и закрывают ее пробкой.

Приготовленный крахмал может быть пастеризован при температуре (852)°С.

Срок хранения пастеризованного раствора крахмала при температуре (62)°С - не более 1 мес.

Б.3.6 Приготовление раствора двухромовокислого калия молярной концентрации с - 0,017

В мерную колбу вместимостью 1000  помещают 4,9038 г двухромовокислого калия, предварительно перекристаллизованного и высушенного при температуре (1582)°С, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора в склянке из темного стекла в темном месте при температуре (205)°С - не более 1 мес.

Б.4 Проведение измерений

Б.4.1 Приготовление фильтрата

В стакан вместимостью 100  помещают (33,0000,001) г продукта, подготовленного в соответствии с разделом 7, и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 , омывая стакан несколько раз дистиллированной водой, при этом объем дистиллированной воды должен составлять не более половины объема колбы.

Для осаждения белков и жиров в колбу прибавляют по 3  для сыворотки и сывороточных напитков и по 5  для остальных продуктов растворов уксуснокислого цинка (Б.3.1) и железистосинеродистого калия (Б.3.2).

После добавления каждого раствора содержимое колбы осторожно перемешивают, не допуская образования пузырьков. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают и оставляют на 10 мин при температуре (202)°С.

Через 10 мин содержимое колбы фильтруют через сухой складчатый бумажный фильтр в сухую колбу.

Фильтраты должны быть прозрачные.

Б.4.2 Фильтрат поляризуют без светофильтра в поляриметрической кювете длиной 400 мм.

Кювету заполняют раствором дважды и каждый раз делают по три - пять отсчетов по шкале сахариметра. Среднеарифметическое значение результатов показаний шкалы сахариметра (Р) находят из 6 - 10 отсчетов.

Б.5 Обработка результатов измерений

Б.5.1 Массовую долю лактозы в твороге и творожных продуктах %, при использовании кюветы длиной 400 мм, вычисляют по формуле:

,

(Б.2)

где - среднеарифметическое значение показаний шкалы сахариметра, °S;

- поправка на объем осадка.

При использовании кюветы длиной 200 мм полученное значение массовой доли лактозы умножают на коэффициент 2.

Б.5.2 Массовую долю лактозы в других молочных продуктах , %, при использовании кюветы длиной 400 мм, вычисляют по формуле:

,

(Б.3)

где - среднеарифметическое значение показаний шкалы сахариметра, °S;

- поправка на объем осадка.

При использовании кюветы длиной 200 мм полученное значение массовой доли лактозы умножают на коэффициент 2.

Б.5.3 Определение поправки на объем осадка

В коническую колбу вместимостью 250  пипеткой приливают 25  фильтрата (Б.4.1). Добавляют (0,6000,001) г йодистого калия и 5  раствора соляной кислоты молярной концентрации 4 моль/ (Б.3.3). Содержимое колбы перемешивают и титруют раствором серноватистокислого натрия молярной концентрации 0,1 моль/ (Б.3.4). После перехода цвета титруемого раствора из бурого в желтоватый в колбу прибавляют 1  1%-ного раствора крахмала (Б.3.5) и титруют до исчезновения синей окраски. Поправку на объем образовавшегося осадка () в мерной колбе при осветлении раствора вычисляют до четвертого десятичного знака и округляют до первого десятичного знака по формуле

,

(Б.4)

где 12,5 - эмпирический коэффициент пересчета;

- количество раствора серноватистокислого натрия молярной концентрации 0,1 , пошедшее на титрование, .

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, округленное до первого десятичного знака, если выполняется условие приемлемости по разделу 11.

Б.5.4 Приписанные характеристики погрешности и ее составляющих метода определения содержания лактозы при Р = 0,95 приведены в таблице Б.1.

Таблица Б.1

Диапазон измерений массовой доли лактозы, %	Предел повторяемости , %	Предел воспроизводимости , %	Границы абсолютной погрешности , %
0,5 - 2,0	0,2	0,4	0,3
2,0 - 50,0	0,4	0,9	0,7