Методические указания на газохроматографическое определение тестостерона и метилтестостерона в воздухе (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 31 января 1977 г. N 1584-77)

II. Реактивы и аппаратура

5. Применяемые реактивы и растворы.

Тестостерон и метилтестостерон химически чистые или хроматографически чистые для приготовления стандартных смесей.

Газообразный гелий, водород и воздух в баллонах с редуктором.

Твердый носитель - хроматон N-AW-DMCS (фракция 0,16-0,20 мм).

Жидкая фаза - неопентилгликоль адипинат.

Спирт этиловый, ГОСТ 5962-67, обезвоженный (абсолютный).

Хлороформ, ГОСТ 3160-51, обезвоженный.

6. Применяемые посуда и приборы.

Хроматограф с пламенно-ионизационным детектором и спиральной стеклянной колонкой.

Аспирационное устройство.

Патрон для фильтров.

Фильтры АФА-В-10.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, емкостью 25, 100 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, емкостью 1, 2, 5, 10 мл с делениями от 0,01 до 0,1 мл.

Стаканы высокие с носиком, ГОСТ 10394-64, емкостью 50 мл.

Колбы остродонные, емкостью 10 мл.

Баня водяная.

Микрошприц, емкостью 10 мкл.

III. Отбор пробы воздуха

7. Воздух протягивают со скоростью 15 л/мин через фильтр АФА-В-10, помещенный в патрон.

Для анализа следует отобрать не менее 400 л воздуха.

IV. Описание определения

8. Хроматон N-AW-DMCS сушат при 300°С в сушильном шкафу 2-3 часа. 20 г подготовленного сорбента заливают раствором неопентилгликоль адипината в хлороформе (0,8% от веса твердого носителя). После полного выпаривания хлороформа на водяной бане сорбент высушивают и заполняют хроматографическую колонку.

Прибор для анализа готовят согласно инструкции. Пробу вводят через самоуплотняющуюся мембрану.

Фильтр с отобранной пробой переносят в стакан и промывают абсолютным этиловым спиртом 2 раза по 3 мл. При помощи стеклянной палочки тщательно отжимают фильтр, под вакуумом упаривают раствор досуха в остродонной колбе, емкостью 10 мл при температуре 60°. Микрошприцом прибавляют 0,1 мл этилового спирта. Полученный раствор хроматографируют.

Условия анализа

Размер колонки 1 м х 3 мм

Насадка - 0,8% неопентилгликоль адипината

Температура термостата колонки 215°С

Газ-носитель - гелий

Скорость потока водорода - 30 мл/мин

Скорость потока воздуха - 300 мл/мин

Скорость потока газа-носителя - 67 мл/мин

Скорость движения бумажной ленты - 200 мм/час

Объем вводимой пробы - 4 мкл

Время удерживания (мин): тестостерона - 7,5; метилтестостерона - 10,0.

Для калибровки прибора методом абсолютной калибровки приготавливают серию стандартных растворов с известной концентрацией определяемого вещества. Для этого 0,1 г вещества растворяют в 100 мл этилового спирта в мерной колбе. Из полученного раствора готовят серию растворов с содержанием 10, 25, 50, 100 мкг/мл путем разбавления 1; 2,5; 5; 10 мл стандартного р-ра этиловым спиротом до объема 100 мл в мерной колбе. Полученные растворы хроматографируют по 4 мкл. Площади пиков определяют путем умножения высоты пика на его ширину, измеренную на половине высоты.

Строят графическую зависимость между вычисленными площадями пиков и количеством отдельных компонентов в пробах стандартной смеси.

Абсолютное количество компонентов в воздухе находят по калибровочным кривым: рассчитывают площади пиков пробы и по площади находят количество тестостерона или метилтестостерона в воздухе.

Концентрацию тестостерона и метилтестостерона в воздухе в (X) вычисляют по формуле:

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И. Заиченко