Методические указания по фотометрическому измерению концентраций азлоциллина в воздухе рабочей зоны (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 10 сентября 1991 г. N 5940-91)

"Рис. 1. Азлоциллин"

Азлоциллин относится к группе полусинтетических пенициллинов.

Натриевая соль 6-/Д-2 (2-оксо-имидазолидин-1 карбоксамидо)-2-фелилацетамидо/-пенициллановой кислоты. Пористая масса или порошок белого цвета, горького вкуса, без запаха, гигроскопичен, легкорастворим в воде, труднорастворим в 95% этиловом спирте, практически нерастворим в эфире и хлороформе.

В воздухе находится в виде аэрозоля дезинтеграции.

Антибиотик обладает умеренно выраженными аллергическими свойствами. Может вызвать нарушение нормальной микрофлоры организма.

ПДК в воздухе рабочей зоны - 0,1 .

Характеристика метода

Метод основан на реакции окисления азлоциллина реактивом Фолина и последующем фотометрировании образующейся "молибденовой сини" при 750 нм.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме раствора - 5 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,05 (при отборе 250 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,05 до 1,25 .

Определению мешает присутствие пенициллиновых антибиотиков и других восстановителей.

Суммарная погрешность не превышает 10%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 60 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-72.

Фильтры АФА-ХП-20.

Фильтродержатели.

Водяная баня, Ту 641-2850-76.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Колба круглодонная, вместимостью 750 мл.

Обратный холодильник.

Штатив для пробирок.

Пинцет.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100, 1000 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 250 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 мл.

Стаканы химические, ГОСТ 19908-85, вместимостью 50 мл.

Пробирки с притертыми пробками, ГОСТ 10613-75, вместимостью 50 мл.

Воронки с пористой пластинкой N 1-ПС-1.

Реактивы, растворы и материалы

Натрий вольфрамовокислый, ГОСТ 18289-79, х.ч. или ч.д.а.

Натрий молибденовокислый, ГОСТ 10931-77, х.ч. или ч.д.а.

Кислота ортофосфорная, 85%, ГОСТ 5653-75, х.ч. или ч.д.а.

Кислота соляная концентрированная, d = 1,119, ГОСТ 3118-77, и 0,1 н водный раствор.

Литий сернокислый, гидрат, ГОСТ 10563-76, х.ч. или ч.д.а.

Бром, ГОСТ 4109-79, жидкий.

Реактив Фолина. В круглодонную колбу вместимостью 750 мл вносят 50 г гидрата вольфрамовокислого натрия, 12,5 г гидрата молибденовокислого натрия. Добавляют 350 мл дистиллированной воды, 25 мл и 85% ортофосфорной кислоты и 50 мл концентрированной соляной кислоты. Колбу соединяют с обратным холодильником и кипятят раствор в течение 10 часов. Затем добавляют 75 г гидрата сернокислого лития, 25 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и добавляют 3 капли жидкого брома, кипятят 15 минут без холодильника для удаления избытка брома и снова хорошо перемешивают. После охлаждения раствор фильтруют, доводят до 500 мл водой. Хранят в склянке темного стекла на холоде. В этих условиях раствор пригоден длительное время. Реактив не должен иметь зеленого оттенка, в противном случае необходимо добавить бром и прокипятить.

Аммиак, водный раствор, ГОСТ 3760-79, 5% раствор.

Натрия гидроксид, ГОСТ 4328-77, 0,1 н раствор в воде.

Стандартный раствор азлоциллина N 1 с концентрацией 50 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точную навеску стандартного образца азлоциллина, добавляют 10 мл 0,1 н едкого натра, перемешивают до растворения, выдерживают 10 минут и доводят до метки водой.

Стандартный раствор азлоциллина N 2 с концентрацией 5 мкг/мл готовят путем соответствующего разбавления раствора N 1 в воде.

Растворы устойчивы в течение 8 часов.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХП-20. Для определения 1/2 величины ПДК следует отобрать 250 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 5 дней.

Подготовка к измерению

Для построения градуировочного графика готовят градуировочные растворы (устойчивы в течение 3 часов) согласно таблице 1.

Таблица 1

Шкала градуировочных растворов

N стандарта	Стандартный раствор N 1, мл	Стардартный раствор N 1, мл	Дистиллированная вода, мл	Содержание азлоциллина, мкг
1	0	0	4,0	0
2	1,0	-	3,0	5
3	2,0	-	2,0	10
4	-	0,5	3,5	25
5	-	1,0	3,0	50
6	-	1,5	2,5	75
7	-	2,0	2,0	100
8	-	2,5	1,5	125

Во все пробирки шкалы добавляют по 0,25 мл реактива Фолина и нагревают в кипящей водяной бане 20 минут. В горячие растворы добавляют по 0,5 мл 5% раствора аммиака и оставляют на 10-15 минут, затем быстро охлаждают до комнатной температуры под струей холодной воды и измеряют на спектрофотометре оптическую плотность синих растворов при длине волны 750 нм в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптической плотности градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочных растворах (в мкг).

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой при помощи пинцета помещают в химический стакан, заливают 2,0 мл 0,1 н едкого натра, выдерживают при перемешивании 10 минут, затем добавляют 2 мл 0,1 н соляной кислоты, перемешивают и добавляют 6 мл дистиллированной воды. Выдерживают при перемешивании еще 30 минут.

Полученные растворы фильтруют через воронку с пористой пластинкой. Для анализа в пробирки с притертой пробкой отбирают 4 мл раствора антибиотика и обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного анализируемого раствора измеряют по отношению к контрольному раствору, который готовят одновременно и аналогично пробам.

Количественные измерения содержания азлоциллина во взятой аликвоте проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентраций

Концентрацию азлоциллина "С" в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание азлоциллина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

М.И. Наркевич