Межгосударственный стандарт ГОСТ 31651-2012 "Средства лекарственные для животных, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли селена методом атомно-абсорбционной спектрометрии" (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 сентября 2012 г. N 442-ст)

Medical remedies for animals, feeds and feed additives. Determination of mass fraction of selenium by atom absorption spectrometric method

Дата введения - 1 января 2014 г.

Введен впервые

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 Разработан Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "БТНКИ")

2 Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 50 от 20 июля 2012 г.)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Сокращенное наименование национального по стандартизации органа
Беларусь	BY	Госстандарт Республики Беларусь
Кыргызстан	KG	Кыргызстандарт
Молдова	MD	Молдова-Стандарт
Российская Федерация	RU	Росстандарт
Узбекистан	UZ	Узстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 сентября 2012 г. N 442-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31651-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2014 г.

5 Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 53351-2009

6 Введен впервые

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на средства лекарственные для животных, корма и кормовые добавки и устанавливает метод гидридной атомно-абсорбционной спектрометрии с использованием способа микроволновой минерализации проб при определении массовых долей селена в диапазоне измерений от 0,25 до 1,50  (мг/кг).

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 177-88 Водорода перекись. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 5457-75 Ацетилен растворенный и газообразный технический. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-6-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ 6691-77 Реактивы. Карбамид. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 10157-79 Аргон газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 11125-84 Кислота азотная особой чистоты. Технические условия

ГОСТ 13496.0-80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 13867-68 Продукты химические. Обозначение чистоты

ГОСТ 14261-77 Кислота соляная особой чистоты. Технические условия

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов по указателю "Национальные стандарты", составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Сущность метода

3.1 Метод основан на образовании гидрида селена после кислотной минерализации образца в закрытой системе микроволновой печи с последующим восстановлением Se (IV) в газообразный гидрид селена боргидридом натрия, введении гидрида селена в нагретый кварцевый атомизатор и измерении величины атомного поглощения селена (аналитическая линия 196,0 нм), образующегося при термическом разложении гидрида селена.

3.2 В процессе подготовки пробы соединения селена переводятся в соединения Se (IV), которые количественно восстанавливаются до гидрида.

3.3 При определении селена в водорастворимых лекарственных средствах кислотная минерализация не требуется.

4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы

4.1 Для определения массовой доли селена используют следующие средства измерений и вспомогательное оборудование:

- пламенный атомно-абсорбционный спектрометр любой марки, работающий в диапазоне длин волн 185 - 900 нм с относительным среднеквадратическим отклонением случайной составляющей погрешности результатов измерения, не превышающим 8%, укомплектованный спектральной лампой, которая излучает спектр селена, и снабженный системой генерации гидридов, включающий в себя аналитический модуль или приставку для генерации гидридов, атомизатор - кварцевую ячейку и программное обеспечение, управляющее работой системы генерации гидридов. Указанное программное обеспечение может быть составной частью программного обеспечения к спектрометру;

- весы лабораторные высокого или специального класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и ценой поверочного деления 0,1 мг по ГОСТ 24104;

- печь микроволновую лабораторную для экспрессной подготовки образцов с мощностью 1600 ватт и частотой магнетрона 220 - 240 V/50 Гц;

- национальные стандартные образцы состава водного раствора ионов Se (IV) с погрешностью аттестованного значения не более 1% при доверительной вероятности Р = 0,95. Массовые концентрации в стандартном образце раствора ионов селена должны быть не менее 0,05  и не более 1,00 ;

- баня ультразвуковая;

- плитка электрическая по ГОСТ 14919;

- баня водяная лабораторная.

4.2 Для определения массовой доли селена используют следующие лабораторную посуду и материалы:

- пипетки градуированные по ГОСТ 29227;

- колбы 1-50 (100; 500)-2 по ГОСТ 1770;

- цилиндры 1(2,3)-100-1 по ГОСТ 1770;

- воронки ВФ-1(2)-60 - ПОР 500 ТХС по ГОСТ 25336;

- фильтры обеззоленные с синей лентой, диаметром от 7 до 10 см.

4.3 Для определения массовой доли селена используют следующие реактивы:

- натрия боргидрид, х.ч.;

- натрия гидроокись по ГОСТ 4328;

- карбамид по ГОСТ 6691;

- аргон газообразный в баллоне, снабженном редуктором по ГОСТ 10157;

- ацетилен технический, растворенный и газообразный по ГОСТ 5457;

- кислоту азотную особой чистоты по ГОСТ 11125;

- кислоту соляную особой чистоты по ГОСТ 14261;

- перекись водорода по ГОСТ 177;

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709.

4.4 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 1 (ос.ч.) или 2 (х.ч.) по ГОСТ 13867.

4.5 Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов по качеству не ниже указанных.

5 Порядок подготовки к проведению испытания

5.1 Отбор проб

Отбор проб лекарственных средств для животных проводят по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт; кормов и кормовых добавок - в соответствии с ГОСТ 13496.0.

5.2 Подготовка прибора к работе и условия выполнения измерений

5.2.1 Подготовку атомно-абсорбционного спектрометра к работе и оптимизацию условий измерения проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации прибора.

При этом должны быть соблюдены следующие условия:

- температура воздуха - от 10°С до 35°С;

- атмосферное давление - от 630 до 800 мм рт. ст. (от 840 до 1067 ГПа);

- влажность воздуха при температуре 25°С - от 30% до 80%.

Рабочая длина волны при определении селена - 196,0 нм.

5.2.2 Систему генерации подготавливают к работе в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации системы и/или прибора.

5.3 Приготовление вспомогательных растворов

5.3.1 Приготовление раствора соляной кислоты

При приготовлении вспомогательных растворов для канала кислоты используют раствор соляной кислоты молярной концентрации 2 . Для этого в мерную колбу вместимостью 500  отбирают мерным цилиндром 93  концентрированной соляной кислоты с плотностью 1,19  и доводят до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.3.2 Приготовление 0,3%-ного раствора боргидрида натрия

Для канала восстановителя используют 0,3%-ный раствор боргидрида натрия в 0,5%-ном растворе гидроокиси натрия. Для этого 0,5 г гидроокиси натрия помещают в мерную колбу вместимостью 100 , растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды, затем добавляют 0,3 г боргидрида натрия и перемешивают. После полного растворения доводят до метки дистиллированной водой.

Для анализа используют свежеприготовленный раствор.

5.3.3 Приготовление 20%-ного раствора карбамида

В мерную колбу вместимостью 100  помещают 20 г карбамида и растворяют в 50  дистиллированной воды. Затем доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Срок хранения раствора - 1 месяц.

5.3.4 Приготовление фонового раствора соляной кислоты

Фоновый раствор соляной кислоты готовят смешиванием 500  концентрированной соляной кислоты с 500  дистиллированной воды.

Срок хранения раствора не ограничен.

5.4 Приготовление градуировочных растворов

5.4.1 Приготовление промежуточного раствора селена А

Для приготовления промежуточного раствора А с массовой концентрацией селена 0,1  вскрывают стеклянную ампулу национального стандартного образца состава водного раствора ионов Se (IV) с массовой концентрацией 1,0 , отбирают пипеткой 5  стандартного образца, помещают в мерную колбу вместимостью 50 , доводят объем до метки раствором соляной кислоты по 5.3.4 и перемешивают.

Срок хранения раствора - 6 мес.

5.4.2 Приготовление промежуточного раствора селена Б

Для приготовления промежуточного раствора селена Б с массовой концентрацией селена 0,01  помещают 5  промежуточного раствора А в мерную колбу вместимостью 50  и доводят до метки раствором соляной кислоты по 5.3.4.

Срок хранения раствора - 20 дней.

5.4.3 Приготовление промежуточных растворов селена В и Г

Промежуточные растворы селена В и Г с массовой концентрацией 1,0 и 0,1  соответственно готовят как раствор Б, последовательно разбавляя каждый вновь приготовленный раствор соляной кислотой по 5.3.4.

Растворы В и Г готовят в день проведения анализа.

5.4.4 Приготовление градуировочных растворов селена массовой концентрацией 5,0; 10,0; 30; 50 

В четыре мерные колбы вместимостью 50  отбирают пипеткой 2,5; 5,0; 15,0; 25,0  раствора Г, доводят до метки фоновым раствором соляной кислоты по 5.3.4 и тщательно перемешивают.

Растворы готовят непосредственно перед проведением анализа.

5.5 Градуировка прибора

Градуировку атомно-абсорбционного спектрометра проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации с использованием градуировочных растворов, приготовленных по 5.4.4. Нуль прибора устанавливают по фоновому раствору соляной кислоты. Градуировочные растворы прокачивают через систему. Регистрируют атомное поглощение каждого раствора три раза и вычисляют среднеарифметическое измеренных значений.

Относительное среднеквадратическое отклонение результатов параллельных измерений градуировочного раствора не должно превышать 10%. Строят градуировочный график.

Устанавливают градуировочную характеристику, представляющую собой зависимость среднеарифметического значения атомного поглощения от массовой концентрации селена в растворе, .

5.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики

5.6.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом работы.

В качестве образца для контроля стабильности градуировочной характеристики используют раствор селена, приготовленного аналогично 5.4.4. Массовую концентрацию селена в образце для контроля стабильности градуировочной характеристики выбирают, исходя из предполагаемого содержания селена в анализируемых пробах.

Регистрируют не менее двух раз атомное поглощение раствора образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, вычисляют среднеарифметическое и при помощи градуировочной зависимости рассчитывают массовую концентрацию селена.

Градуировочная зависимость признается стабильной, если выполняется условие:

,

(1)

где - измеренное значение массовой концентрации селена в растворе образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, ;

- действительное значение массовой концентрации селена в растворе образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, .

Если условие (1) не выполняется, то процедуру контроля повторяют. Результаты повторного контроля считают окончательными, градуировку прибора по 5.5 проводят заново.

6 Порядок проведения испытания

6.1 Микроволновая минерализация проб

6.1.1 Для минерализации проб, имеющих в основе неорганическую матрицу (полиминеральные добавки, лекарственные средства, содержащие селен), процедуру проводят в одну стадию с использованием концентрированной азотной кислоты. При минерализации проб с органической матрицей [белково-витаминно-минеральные концентраты (БВМК), комбикорма, корма для мелких домашних животных] процесс проводят с постепенным увеличением давления и второй стадией минерализации с добавлением перекиси водорода.

Для проведения минерализации пробы в закрытой системе используют микроволновую лабораторную печь.

6.1.2 Устанавливают программу проведения минерализации в соответствии с рекомендациями изготовителя микроволновой печи. Например, при использовании микроволновой печи MDS-2000 фирмы СЕМ (США) параметры программы, подобранные по типам кормов и кормовых добавок, выбирают в соответствии с таблицей 1.

Таблица 1

Тип анализируемого образца	Навеска, г	Параметры разложения
		1 стадия (с )			2 стадия (с )
		этап	давление, МПа	время, мин	этап	давление, МПа	время, мин
Полиминеральные добавки, премиксы, л/с, содержащие селен	0,8	1 2 3	0,35 0,70 1,00	5 10 10	-	-	-
БВМК, комбикорма, корма для непродуктивных животных	0,5	1 2 3 4 5	0,35 0,55 0,70 0,90 1,00	5 5 8 10 10	1	0,35	10

6.1.3 Кислотную минерализацию в микроволновой печи осуществляют в следующем порядке:

- навеску 0,5 или 0,8 г (в зависимости от типа пробы) помещают в стакан-автоклав;

- добавляют 10  концентрированной азотной кислоты и герметизируют сосуд, при необходимости поместив в него датчик контроля давления и/или температуры;

- параллельно проводят минерализацию добавляемых к навеске реактивов для контроля их чистоты (контрольный раствор);

- помещают карусель с автоклавами в печь и проводят разложение в зависимости от выбранной программы для данного типа образца;

- по окончании разложения сосуды охлаждают и вскрывают в соответствии с руководством (инструкцией) изготовителя микроволновой лабораторной печи.

Для образцов с органической матрицей проводят вторую стадию минерализации. Для этого к охлажденной пробе добавляют 2  перекиси водорода, снова закрывают сосуд, помещают в микроволновую печь и вновь подвергают минерализации по выбранной программе.

6.1.4 Для перевода всех форм селена в селен (IV) в колбу вместимостью 50  добавляют 25  концентрированной соляной кислоты и полученный после микроволновой минерализации раствор, фильтруя через обеззоленный фильтр "синяя лента". Добавляют 3  раствора карбамида 20%-ного по 5.3.3 и нагревают на водяной бане в течение 10 мин при температуре не более 90°С. Затем раствор дегазируют в ультразвуковой бане и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 , доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

6.2 Измерение атомного поглощения селена

Измеряют атомное поглощение селена в минерализатах проб и растворе контрольной пробы на реактивы (см. 6.1.3) три раза. Вычисляют среднеарифметическое измеренных значений в тех же условиях, что и при построении градуировочной характеристики по 5.5. Используя градуировочную характеристику 5.5, вычисляют массовую концентрацию элемента.

7 Обработка и оформление результатов испытания

7.1 Массовую долю селена в пробе С, (мг/кг), рассчитывают по формуле

,

(2)

где - массовая концентрация селена в анализируемом растворе, найденная по градуировочному графику по 5.5, ;

- массовая концентрация селена в контрольном растворе 5.4, найденная по градуировочному графику по 5.5, ;

р - коэффициент разбавления пробы;

- объем раствора пробы после минерализации по 6.1.3, ;

B - масса навески, кг;

1000 - коэффициент пересчета мкг в мг.

За результат измерений принимают среднеарифметическое двух параллельных измерений.

7.2 Числовое значение результата анализа должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение погрешности.

8 Метрологические характеристики

Метод атомно-абсорбционной спектрометрии обеспечивает получение результатов измерений с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, приведенных в таблице 2.

Таблица 2

Диапазон измерений, (мг/кг)	Предел повторяемости r, (мг/кг)	Предел воспроизводимости R, (мг/кг)	Границы абсолютной погрешности, , (мг/кг)
От 0,25 до 1,50 вкл.	0,40С	0,47С*	0,35С*
*С - результат измерений массовой доли селена в пробе по формуле (2).

9 Контроль качества результатов измерений

Контроль качества результатов измерений в лаборатории предусматривает проведение контроля стабильности результатов измерений с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6 (раздел 6).

10 Требования к квалификации операторов

Выполнение измерений может производить химик-аналитик, владеющий техникой атомно-абсорбционного анализа, изучивший инструкцию по работе с соответствующими приборами и освоивший настоящую методику выполнения измерений.