Приложение II. Определение веществ, экстрагированных водонасыщенным н-бутанолом

Приложение II
Определение веществ, экстрагированных водонасыщенным н-бутанолом

1. Сфера применения

Данный метод может применяться для анализа сухого женьшеня и экстрактов женьшеня (жидкой и порошкообразной форм).

2. Принципы

Сырой сапонин экстрагируется из продуктов из женьшеня с использованием в качестве растворителя водонасыщенного н-бутанола после удаления неполярных липидов и углеводов с использованием диэтилового эфира и дистиллированной воды.

3. Оборудование и аппаратура

3.1. Воронка делительная (250 мл);

3.2. Колба круглая плоскодонная (200 - 300 мл);

3.3. Колба коническая (200 - 300 мл);

3.4. Стандартное сито (N 80);

3.5. Фильтровальная бумага (N 2);

3.6. Воронка стеклянная;

3.7. Шейкер лабораторный;

3.8. Ротационный испаритель;

3.9. Водяная баня-термостат;

3.10. Электронные весы (точность до 0,1 мг);

3.11. Шкаф сушильный с термостатом (регулировка температуры с точностью 1°С);

3.12. Эксикатор (с силикагелем);

3.13. Мельница лабораторная;

3.14. Щипцы тигельные.

4. Реактивы

4.1. н-бутанол (требования к качеству реактива выше требований Европейской фармакопеи);

4.2. Диэтиловый эфир (требования к качеству реактива выше требований Европейской фармакопеи);

4.3. Вода дистиллированная.

5. Приготовление водонасыщенного раствора н-бутанола

5.1. Смешать н-бутанол и дистиллированную воду в соотношении 70:30.

5.2. Поместить в лабораторный шейкер на достаточное время, затем дать отстояться, чтобы верхний слой (слой водонасыщенного н-бутанола) и нижний слой (вода) полностью разделились.

5.3. После полного разделения слоев водонасыщенный н-бутанола поместить в сосуд для дальнейшего использования и плотно закрыть.

6. Предварительная обработка образцов

Образцы сухого женьшеня измельчают в лабораторной мельнице и просеивают через лабораторное сито N 80. Экстракт женьшеня для настоящего анализа используется без первичной подготовки.

7. Методика испытаний для сухого женьшеня

7.1. Взвесить около 5 г образца и поместить в круглую колбу (A). Затем добавить 50 мл водонасыщенного раствора н-бутанола. Провести экстрагирование с обратным холодильником на водяной бане с постоянной температурой 75 - 80°С в течение 1 часа и оставить на 30 минут.

7.2. Профильтровать и перелить в делительную воронку полученный в пункте 7.1 раствор.

7.3. Дважды повторить пункты 7.1 и 7.2 для получения в круглой колбе (А) твердых остатков.

7.4. Добавить 50 мл дистиллированной воды к смешанному раствору, полученному в соответствии с пунктами 7.2 - 7.3, и перемешать, используя лабораторный шейкер (приблизительно 15 минут). Дать отстояться, чтобы верхний слой (слой водонасыщенного н-бутанола) и нижний слой (вода) полностью разделились.

7.5. Переместить верхний слой (слой водонасыщенного н-бутанола) в заранее взвешенную коническую колбу (B), концентрировать в вакууме и высушивать (при 60°С) образец, пока жидкость полностью не удалится.

7.6. Добавить 50 мл диэтилового эфира в колбу (B), содержащую осадок, и снова провести экстрагирование на водяной бане с обратным холодильником при постоянной температуре 46°С в течение 30 минут.

7.7. Снять диэтиловый эфир из колбы (B) путем фильтрования образца через фильтровальную бумагу, затем собрать осадок на фильтровальной бумаге в колбе (B), растворив его метанолом.

7.8. Концентрировать содержимое колбы (B) до исчезновения запахов диэтилового эфира и метанола.

7.9. После сушки колбы (B) в сушильном шкафу при 105°С в течение 1 часа поместить колбу в эксикатор при комнатной температуре, оставить на 1 час и затем взвесить.

7.10. Содержание в сухом женьшене веществ, экстрагированных водонасыщенным н-бутанолом, рассчитывается по следующей формуле:

Содержание экстрагированных водонасыщенным н-бутанолом веществ (мг/г) ,

: масса колбы (мг);

: масса колбы после концентрирования и сушки (мг);

S: масса образца (г).

8. Методика испытаний для экстрактов женьшеня

8.1. Взвесить около 2 г образца и поместить в коническую колбу, добавить 60 мл дистиллированной воды для разведения образца и затем перенести его в делительную воронку (A).

8.2. Добавить 60 мл диэтилового эфира, несколько