Методические указания по определению трефлана в воде, почве, томатах и капусте методом УФ-спектрофотометрии с использованием тонкослойной хроматографии (утв. Главным государственным санитарным врачом СССР 28 декабря 1982 г. N 2645-82)

Методические указания по определению трефлана в воде, почве, томатах и капусте методом УФ-спектрофотометрии с использованием тонкослойной хроматографии*
(утв. Главным государственным санитарным врачом СССР 28 декабря 1982 г. N 2645-82)

Дополнение к "Методическим указаниям по определению микроколичеств трефлана и нитрофора" N 1790 от 18.11.77

Трефлан - 2,6-динитро-4-трифторметил-N, N-дипропиланилин. Брутто формула . Молекулярная масса 335,5. Общепринятое название трифлуралин. Представляет собой желто-оранжевые кристаллы. Т. пл. 48,5-49°С, давление пара 13,7 МПа (при 25°С). Растворимость в воде менее 1 мг/л (при 27°С), хорошо растворим во многих органических растворителях. Неустойчив под действием УФ-облучения.

МДУ в сое, табаке, капусте, моркови 0,5 мг/кг. ОДК в почве 0,1 мг/кг. ПДК в воде 1,0 мг/л.

Принцип метода. Метод основан на извлечении трефлана из анализируемой пробы органическими растворителями, хроматографировании в тонком слое оксида алюминия с последующим спектрофотометрированием в ультрафиолетовой области спектра.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 2-100 мкг. Другие метрологические показатели приведены в таблице 53.

53. Метрологическая характеристика метода определения трефлана

Параметры	Анализируемый объект
	Вода	Почва	Капуста	Томаты
Среднее значение определения, %	91,1	92,7	93,0	86,3
Стандартное отклонение,	4,0	2,4	3,2	3,0
Доверительный интервал среднего (р = 0,95, n = 20),	4,6	4,8	3,4	3,0

Реактивы и растворы. Хлороформ ч.д.а. Сульфат натрия безводный х.ч. Сульфат кальция ч. (просушивают в течение 5 ч в сушильном шкафу при 225°С и хранят в банке с притертой крышкой). Оксид алюминия II степени активности, просеянный через сито 100 меш. н-Гексан х.ч. Стандартный раствор трефлана в гексане (100 мкг/мл).

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Шкаф сушильный электрический. Ротационный испаритель. Баня водяная. Воронки делительные. Камеры для хроматографирования. Колбы круглодонные на 100 мл. Пластинки стеклянные размером 9х12 см для нанесения тонкого слоя. Пульверизатор стеклянный. Микропипетки на 0,1 мл. Ступки фарфоровые. Миксер. Спектрофотометр СФ-46. Центрифуга лабораторная.

Для приготовления хроматографических пластинок 100 г оксида алюминия, 10 г сульфата кальция (гипса) и 110 мл дистиллированной воды помещают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл с притертой пробкой и энергично взбалтывают до образования однородной массы; 22 г полученной суспензии наносят на заранее подготовленную стеклянную пластинку слоем 0,1 мм. Пластинки сушат на горизонтальной поверхности при комнатной температуре, затем для активации помещают под УФ-лампу на расстоянии 25 см. Хранят активированные пластинки в эксикаторе.

Ход анализа. Выделение трефлана и очистка экстракта. Гомогенизированную растительную пробу томатов, капусты (100 г) трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл. Объединенный экстракт фильтруют, упаривают с помощью ротационного испарителя при температуре бани не выше 35°С до объема 2-3 мл.

Экстракт очищают с помощью колоночной хроматографии. Стеклянную колонку размером 400х10 мм заполняют 5 г оксида алюминия (высота слоя 5 см). Промывают сорбент 25 мл гексана. Затем на колонку наносят остаток из колбы, дважды ополаскивают ее гексаном порциями по 3 мл. Гексан также наносят на колонку. Элюирование проводят 120 мл гексана. Полученный элюат выпаривают досуха.

Анализируемую пробу воды помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом порциями 50; 40 и 30 мл в течение 15 мин при энергичном встряхивании. Экстракты объединяют, фильтруют, осушают безводным сульфатом натрия и упаривают досуха с помощью ротационного испарителя.

Пробу воздушно-сухой почвы (100 г) растирают в ступке, переносят в колбу и заливают 100 мл хлороформа. Экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 30 мин. Растворитель отфильтровывают через складчатый фильтр, почву трижды промывают хлороформом порциями по 20 мл. Объединенный экстракт упаривают досуха. Очистку проводят методом колоночной хроматографии.

Хроматографирование. Колбу с сухим остатком трижды ополаскивают хлороформом порциями по 0,1 мл и наносят на хроматографическую пластинку. Рядом с нанесенной пробой размещают стандарты, причем наносят по 10-20 мкг трефлана. Элюирующей системой является гексан, в котором величина для трефлана составляет 0,6-0,7. После хроматографирования пластинку оставляют на воздухе до полного удаления запаха гексана. Участок сорбента с пробой, соответствующий трефлана, снимают скальпелем, переносят в пробирку, заливают 3 мл гексана и оставляют на 1 ч. Содержимое пробирки периодически встряхивают. Затем содержимое центрифугируют и надосадочную жидкость декантируют в пробирку с делениями. Объем пробы в пробирке доводят до 3 мл гексаном.

Спектрофотометрия. Оптическую плотность раствора определяют при 240 нм относительно гексана. Градуировочный график строят по пробам, полученным для воды, почвы, растительных объектов, в которые вносили известные количества трефлана. Линейность градуировочного графика соблюдается в диапазоне 10-100 мкг.

Обработка результатов анализа. Содержание трефлана в анализируемом объекте (X, мг/кг, мг/л) рассчитывают по формуле

,

где А - количество трефлана, найденное по калибровочному графику, мкг; Р - навеска пробы, г.

______________________________

* Разработаны Н.И. Бабаевым, К.Б. Баратовым и А.З. Меньшиковой (Таджикский НИИ эпидемиологии и гигиены).