Кодекс Алиментариус. Руководство по разработке и имплементации национальной программы законодательного обеспечения безопасности в области применения ветеринарных препаратов для сельскохозяйственных животных (CAC/GL 71-2009)

Кодекс Алиментариус

Руководство по разработке и имплементации национальной программы законодательного обеспечения безопасности в области применения ветеринарных препаратов для сельскохозяйственных животных
(CAC/GL 71-2009)¹

ГАРАНТ:

См. перечень международных пищевых стандартов (Кодекс Алиментариус)

1. Введение

Современные системы производства пищевых продуктов должны быть спроектированы и организованы таким образом, чтобы подверженность сельскохозяйственных животных ветеринарным препаратам не создавала риски для здоровья людей.

Коммерческие организации, участвующие в производстве и реализации пищевых продуктов, несут основную ответственность за обеспечение продовольственной безопасности. Задача компетентных органов состоит в контроле использования ветеринарных препаратов, а также в проверке применения надлежащих практик и эффективных мер в рамках систем распределения ветеринарных препаратов и производства пищевых продуктов в целях обеспечения эффективной защиты здоровья потребителей и добросовестных практик в торговле пищевыми продуктами, совместимых с целями Кодекса Алиментариус. Все стороны также несут ответственность за информирование и обучение потребителей, чтобы облегчить рациональный выбор пищевых продуктов животного происхождения.

Применение программы на основе рисков ко всем видам пищевых продуктов должно предусматривать меры контроля и верификации, совместимые с рисками, которые данные пищевые продукты могут представлять для потребителей. Применение подхода на основе рисков ко всем группам пищевых продуктов и классам опасных факторов обеспечит более целенаправленное выделение ресурсов в те области, где с наибольшей долей вероятности может быть получена реальная польза для защиты здоровья людей.

Профили рисков для различных опасных факторов могут варьироваться в зависимости от страны, региона, вида и/или системы производства. Применение программы по обеспечению контроля и верификации на основе рисков должно стать необходимой основой, с помощью которой страны-экспортеры смогут подтвердить безопасность экспортируемых пищевых продуктов, а страны-импортеры - принимать такие поставки с определенным уровнем доверия.

Признается, что, в частности, развивающимся странам может потребоваться переходный период и/или техническое содействие в части полной имплементации настоящего Руководства.

2. Сфера применения

Настоящее Руководство предназначено для того, чтобы предоставить правительствам общие принципы и инструкции по разработке и внедрению национальных программ обеспечения продовольственной безопасности, связанных с торговлей, для остатков ветеринарных препаратов. Действующие и последующие приложения к настоящему Руководству могут дорабатывать настоящее Руководство в части вопросов, которые могут иметь значение для программ контроля и верификации продуктов, полученных из определенных видов животных. Такие приложения должны рассматриваться в совокупности с принципами, изложенными в настоящем Руководстве.

3. Общие принципы

Программы по контролю остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах:

i. должны быть основаны на рисках с применением реалистичных профилей рисков, которые оценены как с достаточно высокой степенью вероятности связанные с пищевыми продуктами, полученными с помощью соответствующей(-их) системы (систем) производства;

ii. должны быть ориентированы на профилактику на основе реалистичных профилей рисков, связанных с вероятным или известным использованием неутвержденных или запрещенных ветеринарных препаратов в системе производства;

iii. должны включать в себя регулятивные меры, соразмерные соответствующим рискам для здоровья людей, связанным с данными опасными факторами, в сравнении с другими опасными факторами, связанными с пищевыми продуктами;

iv. должны гарантировать ответственность всех лиц, участвующих в системах производства, реализации и обработки животных и/или полученных из них пищевых продуктов, для обеспечения того, чтобы небезопасные продукты животного происхождения не поступили в продажу в результате действия или бездействия указанных лиц;

v. должны признавать, что предуборочные контрольные меры и практики являются основным средством обеспечения безопасности пищевых продуктов;

vi. должны признавать, что основной задачей программ по проведению аудита и выборки является проверка внедрения и эффективности предуборочных контрольных мер и практик;

vii. должны быть ориентированы на предоставление гарантий на уровне системы и населения; а также

viii. должны быть экономически эффективными и пользоваться поддержкой заинтересованных сторон.

Следует признавать, что ветеринарные препараты регулируются во многих странах по ряду причин, в частности здоровье и благополучие животных, защита окружающей среды. Если указанные виды использования и связанные с ними стандарты не входят в сферу компетенции Комиссии Кодекса Алиментариус, они должны быть четко определены и обоснованы в тех случаях, когда в целях эффективности они включены в программу компетентного органа по контролю остатков.

Рекомендованные Комиссией Кодекса Алиментариус процедуры выборки в отношении остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах освобождаются от применения общих процедур выборки продовольственных товаров, разработанных Комитетом по методам анализа и выборки. Соответственно, настоящее Руководство включает в себя процедуры выборки, значимые для всей программы контроля.

Безопасность пищевых продуктов обеспечивается путем внедрения надлежащих правил, применяемых на всех этапах от первичного производства или импорта до розничной продажи или экспорта, и требует вовлечения всех участвующих сторон. Компетентные органы должны проверять надлежащее внедрение программ а также при необходимости проверять, были ли приняты меры.

Для принятия решений компетентными органами важна надежность лабораторных результатов. В этой связи официальные лаборатории должны использовать методы, утвержденные в качестве соответствующих целевому назначению, и работать согласно принципам управления качеством, принятым на международном уровне (например, стандарт ISO 17025).

Программа контроля, разработанная и внедренная в соответствии с настоящим Руководством, дает странам-импортерам уверенность в том, что они могут принимать поставки, сертифицированные как безопасные в стране-экспортере.

4. Подход на основе рисков

Подход на основе рисков, применимый ко всей производственной цепочке и ко всем группам пищевых продуктов и потенциальным опасным факторам, позволит компетентным органам направить ресурсы в зоны повышенного риска, который с наибольшей долей вероятности будет влиять на защиту здоровья потребителей.

Длительное применение надлежащих практик и регулярный контроль в большей степени способствуют достижению продовольственной безопасности, чем испытания конечного продукта.

Остатки могут оказывать негативное воздействие на потребителей. Это может проявляться, в частности:

(а) в хроническом токсикологическом неблагоприятном воздействии;

(b) в остром фармакологическом воздействии на потребителей и на микрофлору желудочно-кишечного тракта потребителей;

Могут быть обоснованы различные виды программ контроля и мониторинга, если оценка риска показывает, что одна или несколько таких иных конечных точек являются существенными для здоровья людей. Выявление не соответствующих нормам остатков (например, остатков, превышающих допустимые MRLs) оправдывает проведение последующих регулятивных мероприятий.

Животные и/или системы производства могут быть подвержены воздействию различных ветеринарных препаратов и иных химических веществ, которые в результате этого могут присутствовать в продуктах, полученных из таких животных или систем. Однако их значение для защиты здоровья потребителей варьируется в зависимости от типа и источника.

Понимание обстоятельств, необходимых для того, чтобы каждый случай введения ветеринарного препарата фактически представлял риск для потребителей продуктов животного происхождения, а также оценка вероятности наступления такого риска необходимы для определения надлежащих мероприятий по контролю и верификации, которые должны быть включены в проекты национальных программ по контролю и верификации остатков.

При применении программ контроля и верификации на основе рисков следует предусматривать необходимую основу для стран-экспортеров в целях сертификации, при необходимости, безопасности экспортируемых продуктов, а для стран-импортеров, с учетом любых иных дополнительных оценок, которые они сочтут необходимыми, в целях принятия таких поставок.

К программам страхования экспорта должны применяться те же принципы, которые применяются к разработке и внедрению национальных программ страхования.

5. Определения (в целях настоящего руководства)

Под "компетентным(-и) органом(-ами)" понимается (понимаются) официальная(-ые) правительственная(-ые) организация(-и)/учреждение(-я), имеющие соответствующие полномочия².

Под "утвержденным" понимается официально разрешенный или признанный компетентным органом.

"На основе рисков" означает ориентированный и соразмерный оценке вероятности и серьезности негативных последствий для потребителей.

Термин "профили риска" определен в Руководстве по процедурам. Что касается ветеринарных препаратов, профили рисков связывают систему производства с потенциальным риском для здоровья потребителя. Они служат основой для разрешений и ограничений использования.

Под "верификацией системы" понимается получение полной информации о степени применения практик и мер контроля.

Под "риск-ориентированными программами верификации" понимаются проверка/аудит и/или выборочный/лабораторный анализ конкретных поставщиков или продуктов в целях выявления отклонений.

Под "объективной выборкой" понимается случайная выборка определенных групп в целях получения информации о наличии отклонений в отношении остатков, как правило, ежегодно на национальном уровне. Соединения, выбранные в рамках объективной выборки, как правило, основаны на профилях рисков и доступности лабораторных методов, пригодных для регулятивных целей. Результаты объективной выборки представляют собой меру эффективности и целесообразности мер и практик контроля в рамках более широкого сегмента системы производства.

Под "опросом" понимается сбор дополнительных данных в целях исследования остатков, связанных с использованием конкретного ветеринарного препарата или с типом производства.

Термины "период выведения"/"период ожидания" (ограничение на заготовку пищевых продуктов) определены в Глоссарии терминов и определений (Остатки ветеринарных препаратов в пищевых продуктах (CAC/MISC 5-1993). Период также может быть представлен в виде комбинации событий или иных факторов.

Под "системой производства" понимаются методы или виды деятельности, применяемые для производства пищевых продуктов для потребления людьми.

Под "контролем качества" (в лабораториях по испытаниям остатков) понимается мониторинг факторов, связанных с анализом образца лицом, проводящим испытания.

Под "обеспечением качества" (в лабораториях по испытаниям остатков) понимается независимая проверка в целях обеспечения надлежащего выполнения аналитической программы.

"Система управления качеством" гарантирует, что управление лабораторией и ее деятельность осуществляются в соответствии с требованиями признанных на международном уровне стандартов качества по производству данных по качеству и результатов проверки качества (например, ISO 17025: 2005).

6. Нормативно-правовая база

6.1 Функции

Операторы/коммерческие структуры, участвующие в производстве, переработке и реализации пищевых продуктов, несут основную ответственность за обеспечение продовольственной безопасности.

Компетентные органы регулируют использование ветеринарных препаратов, проверяют применение надлежащих практик и наличие эффективных мер в рамках системы распределения ветеринарных препаратов и производства пищевых продуктов в целях обеспечения эффективной защиты потребителей и содействия торговле, совместимой с целями Кодекса Алиментариус.

Компетентный орган, ответственный за предоставление потребителям гарантий в отношении пищевых продуктов, должен убедиться в том, что он обладает достаточными знаниями и контролирует ветеринарные препараты, реализуемые и используемые в системах производства, а также обладает достаточными знаниями о продовольственной безопасности.

6.2 Утверждение компетентным органом

6.2.1 Критерии

Следует предусмотреть соответствующие критерии утверждения. Такие критерии могут включать в себя принятие оценок, проведенных иными признанными компетентными органами, в случаях, когда модели применения являются аналогичными.

Системы утверждения должны:

(a) предусматривать оценку безопасности остатков ветеринарных препаратов для человека на основе анализа риска с установлением, при необходимости, предельно допустимых уровней остатков;

(b) учитывать потребности производителей в целях уменьшения их стремления использовать неутвержденные ветеринарные препараты или запрещенные вещества.

Системы утверждения должны учитывать тот факт, что профили рисков и варианты управления рисками могут существенно различаться в разных системах производства и регионах.

6.2.2 Ограничения на утверждение

Условия утверждения ветеринарных препаратов должны быть указаны в соответствующих национальных нормативных актах.

В целях смягчения потенциальных рисков ограничения могут быть предусмотрены для:

(a) составов;

(b) критериев применения (например, время, вид животных) и способов введения препаратов;

(d) периода выведения/периода ожидания/ограничений на заготовку пищевых продуктов.

6.2.3 Национальный реестр

Все составы ветеринарных препаратов, утвержденные в стране, должны быть зарегистрированы в национальном реестре.

6.3 Информация о ветеринарных препаратах

Информационные и/или образовательные программы о надлежащем применении препаратов в целях эффективного лечения при обеспечении защиты потребителей должны быть предусмотрены в отношении каждого утвержденного состава ветеринарного препарата.

6.4 Продажа и применение

Национальные/региональные нормативные акты должны устанавливать, какие ветеринарные препараты могут продаваться на внутреннем рынке и как они могут применяться. Составы, не зарегистрированные в национальном реестре, не должны применяться. Следует предусмотреть санкции в качестве средства, сдерживающего такое применение.

Если это оправдано соответствующими профилями рисков, компетентные органы могут предусматривать дополнительные условия в отношении продажи и применения определенных ветеринарных препаратов в целях обеспечения их надлежащего применения и предотвращения неправильного употребления или злоупотребления.

Условия в отношении продажи и применения могут включать в себя:

(a) требование, чтобы все продажи осуществлялись по рецепту ветеринара или иного специалиста, обладающего надлежащей компетенцией;

(b) ограничение возможности введения препарата только физическими лицами или специалистами, обладающими надлежащей компетенцией;

(c) требование, чтобы все животные/системы производства, к которым применены препараты, были идентифицированы определенным образом;

(d) требование, чтобы все виды применения были зафиксированы и/или внесены в единую(-ые) базу(-ы) данных.

Эффективность и необходимость условий применения должна регулярно пересматриваться с учетом местного профиля рисков. При этом необходимо учитывать, что недоступность необходимого лечения может способствовать применению неутвержденных ветеринарных препаратов или запрещенных веществ.

Компетентные органы вправе разработать законы/нормативные акты, которые разрешают, в качестве исключения, применение неутвержденных ветеринарных препаратов по неутвержденным/незарегистрированным показаниям в соответствии с письменными инструкциями ветеринара и под его прямым контролем. Такое законодательство должно соответствовать национальным и/или международным руководствам и технической информации по данному вопросу.

В отношении животных, которые дают, соответственно, молоко, яйца или мед для потребления людьми, следует применять только ветеринарные препараты, специально утвержденные для применения в отношении кормящих животных, несущих яйца птиц и медоносных пчел. Специальные исключения могут быть предусмотрены для применения по неутвержденным/незарегистрированным показаниям.

6.5 Ответственность операторов (руководство по передовым практикам)

Производители должны применять только те ветеринарные препараты, которые были утверждены для применения в отношении сельскохозяйственных животных. Неутвержденные ветеринарные препараты не должны использоваться. Ветеринарные препараты должны применяться в строгом соответствии с официально утвержденными/признанными инструкциями. Применение по неутвержденным показаниям должно быть разрешено только на основании прямых письменных инструкций ветеринара согласно законам и нормативным актам национальных органов. Такие инструкции должны соответствовать национальным и/или международным руководствам и технической информации по данному вопросу.

Следует рекомендовать производителям обращаться за консультацией к ветеринарам или к иным компетентным специалистам по вопросам применения надлежащего периода ожидания, если инструкции по применению на этикетке отсутствуют или не являются четкими.

Следует вести документацию с подробной информацией о лечении и о периоде выведения/периоде ожидания, который требуется перед тем, как животное или продукт, полученный из такого животного, могут быть заготовлены для потребления людьми.

Операторы (первичные производители и иные операторы) должны сообщать об ограничениях на заготовку пищевых продуктов (периодах выведения/ожидания), которые действуют в отношении животного или продукта животного происхождения в момент продажи последующим покупателям животного(-ых).

Лица, осуществляющие переработку должны гарантировать, что они закупают и/или перерабатывают животных и/или продукты животного происхождения только от тех поставщиков (от первичных производителей или от иных операторов), которые могут достоверно подтвердить пригодность/безопасность животных или продуктов животного происхождения для целевого использования.

Производители должны иметь в своем распоряжении надлежащие внутрихозяйственные меры по обеспечению продовольственной безопасности в отношении применения ветеринарных препаратов и/или подвергания сельскохозяйственных животных их воздействию. Все работники, непосредственно участвующие в работе с животными, должны быть ознакомлены с такими мерами.

Производители должны быть способны идентифицировать всех сельскохозяйственных животных или партии таких животных, которые подвергались лечению ветеринарными препаратами или воздействию ветеринарных препаратов, в целях обеспечения соблюдения периодов выведения/ожидания.

Непрерывные меры по обеспечению продовольственной безопасности, в частности ведение документации, должны гарантировать, что продукты (например, молоко, яйца, мед) заготавливаются только в том случае, если были выдержаны надлежащие периоды выведения/ожидания.

Животные, подвергнутые лечению или воздействию, в отношении которых периоды выведения/ожидания не истекли, должны содержаться отдельно от животных, которые не подвергались лечению, либо должны быть положительно идентифицированы в целях уменьшения вероятности ошибок.

Продукты, полученные от животных, в отношении которых действуют ограничения на заготовку, должны быть обработаны таким способом, который гарантирует, что данный продукт не будет смешан с продуктом, заготавливаемым в целях потребления людьми. Любое оборудование, которое может быть заражено, должно быть надлежащим образом очищено перед его использованием в отношении других животных.

7. Программы верификации

7.1 Цель

Следует внедрить программу верификации, которая совмещает в себе аудит/проверку различных контрольных пунктов и пунктов проведения испытаний заготовок. Такой подход позволит снизить зависимость от химического анализа и получить более высокую степень гарантий.

Общей целью программы верификации является достижение высокой степени уверенности в том, что имеющиеся в распоряжении практики и меры контроля являются надлежащими и применяются в объеме, необходимом для обеспечения здоровья потребителей продуктов животного происхождения. В этой связи в рамках программы будет сделана попытка гарантировать, что воздействие остатков, превышающих допустимое суточное потребление (ADI), имеет место достаточно редко.

Программы верификации могут способствовать:

(a) верификации гипотез, выдвинутых в процессе регистрации;

(b) идентификации недопустимых производства, продажи и/или ряда советов;

(c) оценке эффективности информации на этикетке ветеринарного препарата в той части, в которой она относится к продовольственной безопасности;

(d) оценке эффективности образовательных программ и программ снижения риска;

(e) оценке систем управления качеством;

(f) верификации принятия корректирующих мер и их эффективности.

7.2 Общие принципы разработки

Программы верификации должны охватывать, при необходимости, всю пищевую цепь. Следует внедрить комплексную систему проверки/аудита и выборочного/лабораторного анализа. Частота, центр и вид деятельности должны быть основаны на оценке рисков, чтобы обеспечить максимально эффективный контроль.

Программы верификации можно классифицировать следующим образом в соответствии с целями и критериями, применимыми к отбору образцов:

(a) программы верификации системы;

(b) риск-ориентированные программы верификации;

(d) программы проведения испытаний в пунктах ввоза.

Программы верификации могут быть ориентированы на оценку:

(a) эффективности системы контроля; и/или

(b) соблюдения требований со стороны отдельных лиц или групп лиц.

7.3 Разработка системных и целевых программ верификации

Программы верификации должны:

(a) определять свою цель;

(b) идентифицировать выбранную группу;

- основывать количество образцов для протокола объективной выборки на статистике;

- предварительно устанавливать критерии отбора объектов для прямой выборки;

(d) предварительно устанавливать критерии, подлежащие применению к анализу результатов;

(e) определять процедуры выборки и идентификации, которые позволяют отследить происхождение каждого образца и получить независимое подтверждение результата в случае спора.

7.4 Профили рисков

Компетентные органы несут ответственность за определение профилей рисков для своих стран и/или систем производства.

Частота и интенсивность верификации или проверки/аудита каждого остатка препарата, выбранного в целях мониторинга в рамках программы верификации системы, зависят от ветеринарного препарата и структуры его применения.

Факторы, связанные с профилем риска ветеринарных препаратов, включают в себя:

(a) вид присутствующего опасного фактора;

(b) класс и степень тяжести негативных последствий для здоровья людей, связанных с остатками (например, хроническая токсичность, острые фармакологические, аллергические реакции либо микробиологические нарушения);

(c) обстоятельства применения и/или производства, требуемые для производства остатков, а также вероятность их присутствия в пищевых продуктах, полученных посредством системы производства, в концентрациях и с периодичностью, которые представляют риск для здоровья потребителей;

(d) потребление диетических продуктов, в результате которого остатки представляют реальный риск для здоровья потребителей.

Компетентные органы должны пытаться дать реальную оценку видов, количеств и моделей применения ветеринарных препаратов в соответствующей юрисдикции.

Кроме того, следует принять во внимание:

(a) обстоятельства, при которых каждый ветеринарный препарат начинает оказывать негативное влияние на здоровье потребителей;

(b) вероятность наступления таких обстоятельств.

При рассмотрении и ранжировании остатков ветеринарных препаратов, которые могут присутствовать на некоторых этапах системы производства, следует описывать потенциальные источники и пути воздействия.

Следует анализировать следующие источники остатков ветеринарных препаратов:

(a) ветеринарные препараты, санкционированные в юрисдикции компетентного органа;

(b) ветеринарные препараты, в отношении которых известно или имеются подозрения об их ненадлежащем использовании.

Следует проанализировать следующие пути воздействия остатков ветеринарных препаратов:

(a) целевой, т.е. прямое введение препарата животным;

(b) косвенное введение препарата животным через его добавление в корм или в воду;

Компетентные органы в соответствии с профилями рисков в стране и/или системе производства должны рассматривать следующие потенциальные предуборочные контрольные пункты в целях аудита/проверки в рамках программы верификации:

(a) продавцы и покупатели ветеринарных препаратов - в целях верификации того, какие препараты продаются и каким образом осуществляется их продажа;

(b) пользователи ветеринарных препаратов (включая фермеров, ветеринаров и составителей кормов) - в целях верификации того, как фактически используются препараты в рамках систем производства, например, используются ли они в соответствии с маркировкой, какие документы при этом ведутся и идентифицируется ли статус лечения животных;

(c) дистрибьюторы животных и продуктов животного происхождения - в целях верификации того, что информация о любых ограничениях на заготовку пищевых продуктов, связанных с животным или продуктом, эффективно передается;

(d) системы гарантий, используемые лицами, осуществляющими переработку, и/или производителями, для обеспечения соответствия поставляемых животных или продуктов их целевому назначению.

8. Выбор программы верификации

8.1 Программы верификации системы

При внедрении программ верификации системы следует принимать во внимание:

(a) анализ соответствующих контрольных пунктов системы контроля;

(b) объективную выборку определенной группы с аналогичными признаками в широком смысле, чтобы результаты могли использоваться для получения статистической достоверности в отношении степени контроля, присутствующего в такой группе в целом.

Программы верификации системы могут быть ориентированы на степень применения специальных мер контроля в рамках процесса либо на мониторинг остатков препаратов в животных/продуктах в пунктах заготовок или вблизи них.

Программы объективной выборки должны применяться в целях выявления необходимости корректировки какой-либо меры контроля в рамках системы. Такие программы не следует применять для оценки продуктов.

Если компетентный орган обуславливает утверждение ветеринарного препарата определенными условиями/ограничениями применения во избежание неправильного употребления или злоупотребления, то целесообразность условий/ограничений применения должна регулярно проверяться в рамках риск-ориентированных программ верификации в части их эффективности и необходимости управления рисками, связанными с применением ветеринарных препаратов.

Как правило, протоколы объективной выборки не эффективны в том, что касается выявления редких отклонений. Если такие проявления представляют собой потенциально серьезный риск для здоровья людей, следует применять иные программы гарантий.

8.2 Риск-ориентированные программы верификации

При внедрении риск-ориентированных программ верификации следует принимать во внимание:

(a) предыдущие показатели эффективности, историю отклонений;

(b) обычно применимые элементы управления качеством;

(c) потенциальные факторы риска, которые могут быть связаны с более широким применением ветеринарных препаратов, такие как:

- высокое содержание соматических клеток в молоке или

- значимые прижизненные и посмертные данные, например поражения участков инъекций или патология в стадии разрешения

(d) иную информацию, относящуюся к отклонениям и применению препарата.

Компетентные органы могут дополнять риск-ориентированные программы верификации до заготовки разработанными риск-ориентированными программами верификации после заготовки.

8.3 Опросы

Опросы могут проводиться в целях:

(а) оценки изначальной ситуации до начала применения программы верификации;

(b) оценки эффективности и целесообразности отдельных аспектов программы контроля;

(c) мониторинга влияния, которое оказывают переменные данные, такие как местоположение, сезон или возраст, на наличие, отсутствие или концентрацию остатков.

8.4 Пересмотр

Программы контроля и верификации должны регулярно пересматриваться в целях обеспечения их непрерывной эффективности и/или целесообразности, а также в целях анализа потенциального влияния изменений в профилях рисков.

При выявлении существенных отклонений в течение какого-либо года и при соответствующем внесении изменений в программы контроля может быть целесообразным применение более высокого стандарта верификации до подтверждения эффективности корректирующих мероприятий. Следует проанализировать возможность ротации некоторых ветеринарных препаратов с более низким уровнем риска в целях включения их в программу или исключения из нее на основе истории соблюдения требований, чтобы гарантировать максимально широкий охват.

9. Отбор проб

9.1 Общие принципы

Следует внедрить надлежащие механизмы в целях предотвращения возможных ошибок при селекции и отборе проб.

Предпочтительно, чтобы отбор проб осуществлялся до объединения животных и/или продуктов с животными или продуктами других поставщиков.

9.2 Отслеживаемость/отслеживание продукта

Компетентные органы должны обеспечить возможность отслеживания происхождения всех проб в процессе отбора, хранения, отгрузки, анализа и представления информации.

Каждую пробу необходимо четко идентифицировать с тем, чтобы в случае выявления отклонений можно было провести надлежащие последующие мероприятия.

Если проводится отбор субъединиц партии, следует четко идентифицировать такие субъединицы. Необходимо отбирать пробы в количестве достаточном для того, чтобы обеспечить изъятие непереработанных единиц и сделать возможным независимое подтверждение результатов.

10. Статистические аспекты

10.1. Общие положения

Количество образцов для программ верификации системы может быть заранее задано (см. дополнительные инструкции в Приложении А).

При разработке протокола выборки важно определить цель программы и исследуемую группу. Кроме того, важно установить критерии, подлежащие применению при анализе результатов на предмет необходимости/целесообразности принятия дальнейших мер, в частности, как такие критерии и меры непосредственно относятся к охране здоровья людей.

В конечном итоге "группа", состоящая из "потребляемых единиц пищевых продуктов" имеет наибольшее значение для здоровья людей. Однако в силу того, что продовольственная безопасность обеспечивается применением надлежащих практик и мер контроля перед заготовкой, можно использовать стратегию выборки, в рамках которой проверяется целесообразность и степень соответствия таких практик и мер контроля перед заготовкой, в целях предоставления надлежащих гарантий того, что здоровье потребителей не будет подвержено негативному воздействию. Как правило, исследуемая группа для сбора информации о верификации соответствия/целесообразности перед заготовкой включает в себя те единицы, к которым должны применяться общие меры и практики контроля, в частности:

(а) продавец ветеринарного препарата, введенного в систему производства;

(b) производитель;

(d) лицо, осуществляющее переработку.

Однако поскольку потенциальные последствия для здоровья людей гораздо серьезнее в тех случаях, когда крупные единицы производства (фермы) остаются вне контроля, то, как правило, случайно выбранная группа перед заготовкой представляет собой стандартизированные единицы продукции, проданные единовременно, например, отдельное животное, цистерна молока, бочка меда или определенная весовая единица продукции рыбоводства. При этом у крупных производителей/поставщиков фактически будет больше возможностей попасть в выборку при сохранении случайности протокола выборки.

По общему правилу выводы будут сделаны исходя из преобладания или отсутствия отклоняющихся результатов в единицах, отобранных в течение производственного сезона или календарного года. Однако если проблемы выявлены в течение производственного сезона, корректирующие меры уже могли быть применены и могли начать оказывать положительное воздействие задолго до окончания производственного сезона или календарного года. В отношении небольших групп либо в отношении сценариев воздействия с низким уровнем риска или обоснованной устойчивостью могут применяться/могут потребоваться несколько производственных сезонов или календарных лет для сбора количества образцов, которое согласно статистическому определению дает надлежащую степень достоверности.

Если возможно дальнейшее уточнение и описание затронутой воздействием группы с определенными факторами рисков, такими как сезон, регион или определенный вид продукции, то корреляция протокола выборки с такими переменными является обоснованной.

Пункт, в котором производится отбор проб, определяется в зависимости от целей конкретной программы. Если цель состоит в верификации эффективности мер контроля на этапе поставки, то, как правило, отбор проб производится в точке продажи/заготовки, чтобы соотнести отобранную единицу с поставщиком или производителем.

Кроме того, отбор проб может производиться на ферме в рамках программы обеспечения качества перед заготовкой или при наличии опасений в связи с возможным использованием веществ, запрещенных компетентным органом.

Если цель состоит в верификации общей эффективности системы при обеспечении того, что общее воздействие на группу не превышает ADI, то множественные единицы выборки могут быть объединены до анализа или смешаны с выбранным и проанализированным продуктом.

Если цель состоит в верификации достоверности и эффективности программ контроля и верификации, которые имеются в наличии в стране-экспортере, то отбор проб может производиться из стандартизированных единиц экспорта в пункте ввоза. Такие вспомогательные программы верификации характеризуются совершенно иными конструктивными решениями в части их цели, исследуемой группы и видов реагирования на выявленные отклонения. Статистические таблицы, представленные в Приложении А, не относятся к таким программам, а количество образцов должно отражать степень уверенности страны-импортера в эффективности страны-экспортера.

10.2 Удержание грузов в ходе лабораторного анализа

Компетентные органы не должны в плановом порядке удерживать партии продукции, из которых была произведен случайный отбор проб, до получения аналитических результатов. Компетентные органы вправе в установленном порядке удержать партии продукции при наличии вероятности того, что риск-ориентированные испытания покажут отклоняющиеся результаты, которые представляют потенциальный риск для здоровья потребителей.

10.3 Толкование результатов

Более высокая степени уверенности достигается в случае, если программы верификации, такие как программы верификации системы на основе статистики, включая объективную выборку, а также риск-ориентированные программы (например, в отношении конкретных поставщиков или продуктов) введены в действие одновременно.

Результаты одних только риск-ориентированных программ верификации не позволяют сделать выводы о воздействии остатков ветеринарных препаратов на все слои населения. Выводы о воздействии на все слои населения могут быть сделаны путем объединения результатов:

(a) программ верификации системы на основе статистики, включая объективную выборку; и

(b) риск-ориентированных программ верификации.

10.4 Программы проведения испытаний в пунктах ввоза (специальные требования)

Компетентные органы должны рассматривать программы проведения испытаний в пунктах ввоза только в качестве вспомогательных инструментов верификации системы.

Матрицы, используемые в рамках программы проведения испытаний в пунктах ввоза, могут отличаться от тех, что используются в рамках национальных программ верификации.

За исключением случаев наличия подозрений или выявления риска для здоровья, сертификационный продукт должен подвергаться объективной выборке и программам выпуска с частотой, установленной страной-импортером на основе документов страны-экспортера о соблюдении требований. Партии продукции животного происхождения обычно неоднородны по своей природе. Зачастую они охватывают различных животных, различные фермы и даты переработки. Результаты отражают эффективность национальной системы контроля и верификации в целом и не должны распространяться на конкретные суждения о других единицах в рамках партии, за исключением случаев, когда единый фактор риска перед заготовкой является общим, а также когда выявлена прямая угроза для здоровья.

Применение прямой или целевой выборки в рамках программ выборки в пункте ввоза целесообразно только в том случае, если известно или имеются соответствующие подозрения в том, что продукты имеют одинаковый профиль риска.

При этом после выявления отклоняющихся результатов в ходе программ проведения испытаний в пунктах ввоза страны-импортеры могут увеличить общую частоту проведения испытаний непосредственно связанных пищевых продуктов животного происхождения из стран-экспортеров в течение определенного периода в качестве усиленной верификации эффективности дополнительных мер контроля, принимаемых страной-экспортером.

При интерпретации лабораторных результатов партий продуктов животного происхождения следует учитывать, что они составлены из смешанных продуктов, полученных из различных животных, ферм, а также с различными датами переработки и в этой связи являются неоднородными. По этой причине результаты не следует использовать для оценки иных единиц партии, за исключением случаев, когда такие единицы характеризуются общим фактором риска перед заготовкой, а также когда выявлен прямой риск для здоровья или имеются подозрения о наличии такого риска.

Результаты программ проведения испытаний в пунктах ввоза должны быть переданы только в случае их подтверждения с помощью методов, утвержденных в полном объеме для конкретных матриц и аналитов.

Лабораторные отчеты об отклонении результатов должны содержать:

(а) описание используемого метода;

(b) показатели эффективности метода анализа (включая доверительный интервал результата).

Лабораторные отчеты об отклонении результатов должны быть направлены всем сторонам, которые заинтересованы в них (например, собственник партии продукции и сертифицирующий компетентный орган страны-экспортера).

Компетентные органы страны-импортера должны регулярно предоставлять странам-экспортерам результаты своих программ верификации, в том числе информацию в целях отслеживаемости/отслеживания продукта.

В случае отклонения от параметров продовольственной безопасности компетентные органы страны-экспортера должны отследить продукт, принять надлежащие корректирующие меры и предоставить краткое описание таких действий стране-импортеру.

Если вид, объем и/или частота выявленных отклонений вызывают опасения в отношении того, соответствуют ли импортируемые продукты стандартам защиты здоровья людей, как это требуется страной-импортером, то необходимы дополнительные гарантии.

Страна-импортер также вправе увеличить частоту верификации пунктов ввоза в целях подтверждения того, что соответствующие гарантии фактически устраняют проблему.

Если остатки веществ, которые не должны применяться в отношении сельскохозяйственных животных ни в стране-экспортере, ни в стране-импортере, обнаружены в рамках программы проведения испытаний в пункте ввоза, компетентные органы обеих стран должны сотрудничать в целях идентификации пищевых продуктов животного происхождения, которые потенциально были заражены аналогичным образом, а также в целях решения потенциальных более существенных проблем контроля.

Решение указанных проблем требует, чтобы страна происхождения провела анализ в целях определения возможных источников таких остатков, выявления недостатков своей собственной системы контроля и мониторинга, а также в целях последующего принятия надлежащих дополнительных мер контроля и мер по урегулированию ситуации.

Если страной-экспортером является менее развитая страна, страна-импортер должна рассмотреть возможность оказания технической помощи в разрешении вопроса.

Применение новых методов выборки и проведения испытаний может выявить наличие видов и концентраций остатков, которые ранее не были известны одной или обеим сторонам. Определение источника таких остатков и их значимости может занять некоторое время.

Если наличие таких остатков связано с ранее утвержденными практиками производства, то внесение изменений, если таковые будут признаны необходимыми, может потребовать продолжительного периода времени для развития компетенций.

11. Регулятивные меры

11.1 Расследование отклонений

Компетентные органы должны расследовать каждый отклоняющийся результат в целях установления сопутствующих факторов, которые привели к его появлению, а также системной значимости выявленного случая.

Следует предпринимать попытки определить вещества и значимость их наличия в пищевых продуктах для здоровья потребителей.

Если ткани/пищевые продукты животного происхождения содержат остатки, превышающие допустимые MRL в пункте заготовки, необходимо рассмотреть следующие возможности:

(a) ветеринарный препарат применялся в нарушение инструкций на этикетке или в рецепте;

(b) применялся неутвержденный ветеринарный препарат или состав;

(d) животные, подвергнутые и не подвергнутые лечению, были объединены;

(e) имело место непреднамеренное воздействие кормов, воды или зараженной окружающей среды;

(f) пищевой продукт входит в статистически прогнозируемый небольшой процент животных с остатками, превышающими допустимые MRL, даже по истечении требуемого периода выведения;

(g) загрязнение образцов, проблемы, связанные с аналитическим методом, или аналитическая ошибка.

Лаборатории должны сообщать обо всех вызывающих подозрения положительных пробах, в отношении которых они не смогли получить положительное подтверждение с использованием установленных критериев подтверждения. Это позволит компетентным органам выявить возможные модели отклонений.

11.2 Меры при наличии отклонений: Поведение

Компетентные органы должны корректировать масштаб и вид реагирования на выявленные отклонения с учетом значимости соответствующего опасного фактора для защиты здоровья потребителей.

Компетентные органы должны принимать соразмерные меры при рассмотрении вопроса о том, является ли отклонение результатом небрежности или умысла.

В случае отдельных ошибок по незнанию или небрежности компетентные органы должны требовать проведения надлежащих мероприятий по консультированию и обучению.

В случае доказанной халатности или умысла следует рассмотреть возможность принятия мер наказания в соответствии с системой наказаний страны-участницы Кодекса (например, наложение ареста, штрафы, контроль передвижения и т.д.) в качестве средства, оказывающего сдерживающее воздействие.

В случае широко распространенных отклонений компетентные органы должны рекомендовать заинтересованным лицам и побуждать соответствующие коммерческие отрасли вводить необходимые изменения.

Компетентные органы должны проводить верификацию принятия надлежащих корректирующих мер и мониторинг положительных результатов таких мер посредством проверок/аудитов и/или выборочного/лабораторного анализа.

11.3 Меры при наличии отклонений: Продукт

Небезопасные продукты не должны признаваться пригодными для потребления людьми и подлежат соответствующей утилизации.

Если результаты отбора проб, проведенного на фермах в рамках риск-ориентированных программ верификации, не дают необходимой уверенности в том, что оставшаяся часть партии была произведена с применением надлежащих практик и мер контроля, то партия не должна быть направлена на потребление людьми до получения достаточной информации, которая обеспечит необходимую степень уверенности в безопасности такой партии.

Если результаты указывают на наличие прямого риска для здоровья потребителей, следует предпринять попытку отследить продукт и изъять все продукты, зараженные аналогичным образом.

В рамках программ объективной выборки невыявленная процентная доля может представлять гораздо большую потенциальную угрозу для потребителей, чем выявленная процентная доля. Соответственно, любые меры, принятые в отношении выявленных отклоняющихся партий, менее значимы, чем меры, принятые в отношении системы в целом.

Если меры контроля до заготовки не принимаются или не являются надежными вследствие частых случаев злоупотребления ветеринарными препаратами, более частая верификация после заготовки может быть целесообразной для обеспечения требуемой степени доверия потребителей. Это должно рассматриваться в качестве промежуточной меры только до тех пор, пока не будут введены в действие надлежащие корректирующие мероприятия в рамках программ контроля и пока они не докажут свою эффективность.

11.4 Корректирующие мероприятия при наличии отклонений

В зависимости от результатов таких расследований локальные и/или системные корректирующие мероприятия могут быть признаны целесообразными для предотвращения повторных отклонений.

Если расследование отклонений показывает, что положения о применении и дистрибуции вещества (веществ) не приемлемы, компетентные органы должны провести надлежащие корректирующие мероприятия путем изменения правил утверждения и дистрибуции.

Если расследование отклонений свидетельствует о локальных или системных отказах системы контроля, то компетентные органы должны гарантировать проведение надлежащих корректирующих мероприятий в соответствующих пунктах.

Компетентные органы должны проводить верификацию принятых мер. Соответствующие действия должны быть соразмерны в части времени и интенсивности факторам, опасным для здоровья потребителей, объему и частоте отклонений.

Если отказ системы находится вне прямого контроля оператора, компетентные органы должны предотвращать повторный отказ путем применения надлежащих мер в соответствующих контрольных пунктах.

12. Взаимодействие между программами контроля двух компетентных органов

Компетентные органы должны сотрудничать друг с другом в целях обеспечения охраны здоровья потребителей во всех странах.

Такое сотрудничество направлено на достижение более высоких гарантий по сравнению с теми, которые могут быть достигнуты только на основе программ проведения проверок в пунктах ввоза.

Страны, ведущие торговлю, должны регулярно обмениваться копиями своих программ контроля и верификации, а также результатами таких программ за предшествующие годы.

В целях содействия торговле с развивающимися странами необходимо рассмотреть возможность установления более длительных переходных периодов и оказания технической помощи в отношении всех аспектов программы контроля остатков.

Аналитические методы контроля остатков
Общие положения об аналитических методах контроля остатков

13. Введение

Аналитические методы, применимые для установления факта соблюдения максимально допустимых уровней остатков ветеринарных препаратов (MRLVD), должны быть пригодны для обычного использования компетентными органами государств-членов в рамках программ проведения испытаний для всех остатков ветеринарных препаратов и веществ, которые могут быть использованы в качестве ветеринарных препаратов. К ним относятся определенные пестициды, которые предназначены для ветеринарного применения и могут присутствовать в качестве остатков в продуктах. Указанные методы могут использоваться для анализа случайно выбранных исследуемых групп в рамках национальной программы регулятивного контроля в целях определения факта соблюдения установленных MRLVD, для анализа целевых образцов при наличии оснований подозревать отклонение от MRLVD или для сбора данных в целях их использования при оценке потребления.

Методы также могут потребоваться в рамках программ регулятивного контроля для выявления остатков веществ, в отношении которых ADI и MRLVD не были установлены Комиссией Кодекса Алиментариус. Для некоторых веществ токсикологическая оценка ведет к выводу о том, что нет необходимости устанавливать ADI или MRLVD. Для таких веществ первоочередной задачей при валидации метода является определение наименьших концентраций, при которых могут быть обнаружены остатки в пищевых продуктах и подтверждена их идентичность. Показатели эффективности, относящиеся к количественному анализу, могут быть менее важны для таких веществ, если основной проблемой является выявление и подтверждение наличия веществ в качестве остатков. Подтверждение идентичности остатков, как правило, основано на сравнении ряда характеристик выявленного вещества с известными стандартными характеристиками исследуемого остатка.

Надлежащим образом утвержденные методы не всегда доступны для всех возможных комбинаций остатков ветеринарных препаратов и пищевых продуктов. Компетентные органы, ответственные за разработку национальных программ контроля остатков, должны гарантировать применение надлежащих методов анализа остатков в целях обеспечения соблюдения установленных Кодексом MRLVD. В некоторых случаях это может потребовать разработки и валидации нового аналитического метода или расширения объема валидации существующего аналитического метода в целях охвата новой комбинации аналита и матрицы. В отношении фальсифицированной продукции могут быть приняты надлежащие регулятивные меры с учетом надежности аналитических данных.

14. Интеграция аналитических методов для контроля остатков

Аналитические методы, применимые к остаткам ветеринарных препаратов в пищевых продуктах, должны надежно выявлять наличие исследуемого аналита, определять его концентрацию и правильно идентифицировать аналит. Когда остатки, образовавшиеся в результате применения утвержденных ветеринарных препаратов, выявлены в концентрациях, превышающих установленные MRLVD, результаты должны быть подтверждены до принятия регулятивных мер принудительного характера. Что касается веществ, которые были запрещены компетентным органом для применения к сельскохозяйственным животным или для которых по токсикологическим причинам не установлены ADI и MRLVD, подтвержденное наличие остатков в пищевых продуктах в любой концентрации может привести к принятию регулятивных мер.

Основные характеристики эффективности аналитических методов, используемых в программах контроля остатков, зависят от того, предназначен ли метод для простого выявления, для определения количества или для подтверждения наличия искомого остатка. Завершение полного совместного исследования³ не является требованием для признания метода, который подлежит отнесению к одной из указанных трех категорий.

Методы скрининга являются качественными или приближенно-количественными по своей природе и используются в качестве методов скрининга для выявления наличия (или отсутствия) проб из стада или партии, которые могут содержать остатки в превышение MRLVD или иного регулятивного лимита, установленного компетентным органом. Такие методы не могут дать достаточную информацию для точного определения имеющейся концентрации или для подтверждения структуры остатка; однако они могут использоваться для того, чтобы в кратчайший срок определить, какие продукты требуют дальнейших испытаний, а какие продукты могут быть выпущены. Такие методы могут применяться к образцам в пунктах их ввода в пищевую цепь, на месте проверки или по получении образцов в лаборатории в целях определения того, содержат ли образцы остатки в превышение регулятивного предела. Такие методы, как правило, обеспечивают большую аналитическую эффективность, в некоторых случаях могут применяться вне лабораторных условий, а также могут быть менее дорогими для применения в программах регулятивного контроля по сравнению с испытаниями, проводимыми в лаборатории. Использование методов скрининга позволяет сконцентрировать лабораторные ресурсы на анализе условно-положительных (вызывающих подозрения) проб, выявленных в результате проведения данных испытаний. Указанные методы, которые должны характеризоваться определенным низким относительным числом ложноотрицательных заключений, не должны применяться отдельно в целях контроля остатков в арбитражных пробах без возможности применения должным образом утвержденных количественных методов и/или методов подтверждения к любым образцам, выявленным как потенциально отклоняющиеся от MRLVD.

Количественные методы позволяют получить количественную информацию, которая может быть использована для определения того, превышают ли остатки в конкретном образце MRLVD или иной регулятивный лимит, но не подтверждают однозначно идентичность остатка. Методы, которые дают количественные результаты, должны применяться при надлежащем статистическом контроле в рамках аналитического диапазона, который охватывает MRLVD или иной регулятивный лимит.

Методы подтверждения однозначно подтверждают идентичность остатка и могут также подтверждать количество. Методы подтверждения являются наиболее точными и зачастую основаны на объединении хроматографических и масс-спектрометрических методов, таких как жидкостная хроматография - масс-спектрометрия (LC/MS). Данные методы при их использовании в отношении комбинации остатков должны давать надежную структурную информацию в рамках установленных статистических лимитов. Если методы подтверждения не дают количественную информацию, результат количественного анализа, проведенного изначальным количественным методом, должен быть подтвержден путем анализа копий исследуемых образцов с применением изначального количественного метода или должным образом утвержденного альтернативного количественного метода.

Указанные три категории методов - метод скрининга, количественный метод и метод подтверждения - зачастую имеют некоторые общие показатели эффективности. Кроме того, для каждой категории характерны иные специальные аспекты. Понимание отношений между этими тремя категориями методов важно для разработки и функционирования сбалансированных программ контроля остатков. Указанные три категории методов могут применяться последовательно в рамках программы контроля остатков.

Пробы, "положительные" по результатам испытаний методом скрининга, считаются вызывающими подозрение и, как правило, направляются на дальнейшие лабораторные испытания с применением более точных методов. К таковым могут относиться повторные испытания копий исследуемых образцов с применением метода скрининга. Однако, как правило, в лаборатории используются количественный метод и/или метод подтверждения, чтобы установить тот факт, что образец действительно содержит остатки в превышение регулятивных лимитов. Такие испытания должны проводиться в отношении новых образцов, отбираемых из пробного материала, который использовался в первоначальном испытании методом скрининга, чтобы подтвердить тот факт, что аналит, выявленный в ходе первоначального испытания, однозначно вызывает подозрения и что MRLVD (или иной регулятивный лимит, установленный компетентным органом) превышены. Показатели эффективности или характеристики, которые должны быть определены в ходе валидации метода для каждого метода - метода скрининга, количественного метода и метода подтверждения - представлены в Главе "Свойства аналитических методов для остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах" ниже.

15. Положения, касающиеся отбора и валидации аналитических методов

15.1 Идентификация требований к методам

15.1.1 Область применения метода

Предполагаемая цель метода, как правило, определена в заявлении об области применения, где указываются аналиты (остатки), матрицы (ткани, молоко, мед и т.д.), а также диапазон концентраций, к которым применяется метод. В заявлении также указывается, предназначен ли метод для использования в целях скрининга, определения количества или подтверждения. Компетентный орган должен определить соответствующий маркерный остаток для каждого препарата, в отношении которого были установлены MRLVD, а также указать предпочтительную целевую ткань, выборку которой следует производить для проведения испытаний

15.1.2 Маркерный остаток

MRLVD выражены в форме маркерных остатков, которые могут представлять собой исходный препарат, основной метаболит, совокупность исходного препарата и/или метаболитов либо продукт реакции, образованный из остатков препарата в ходе анализа. В некоторых случаях исходный препарат или метаболит могут присутствовать в форме связанного остатка, который требует химической или ферментативной обработки или инкубации в целях его высвобождения для анализа. Важно, чтобы маркерный остаток, по возможности, представлял однозначные доказательства воздействия ветеринарного препарата. В редких случаях необходимо использовать в качестве маркерных остатков соединения, которые могут образовываться из иных источников, отличных от воздействия ветеринарного препарата. В таких случаях требуется дополнительная информация, чтобы констатировать воздействие ветеринарного препарата в качестве вероятного источника остатка. Примером такой ситуации является использование семикарбазида, который может образовываться из иных источников, в качестве маркерного остатка для препарата нитрофуразон.

15.1.3 Целевая ткань

Как правило, компетентный орган выбирает в качестве целевой ткани, подвергаемой испытаниям на наличие остатков ветеринарных препаратов в рамках программы контроля остатков, съедобную ткань, в которой маркерный остаток присутствует в самых высоких концентрациях и наиболее устойчив. Для липофильных веществ обычной целевой тканью является жир. Для большинства иных веществ целевой тканью являются печень или почки в зависимости от основного пути выведения. Одной из этих тканей, как правило, является целевая ткань, предназначенная для использования при проведении испытаний пищевых продуктов животного происхождения отечественного производства. Ткани органов могут быть недоступны для испытаний импортируемых продуктов, поэтому ткани мускул могут быть целевыми тканями для испытаний таких продуктов. В некоторых случаях, например, если введение препаратов осуществляется в виде инъекционных составов, могут потребоваться испытания мускульных тканей, взятых с вызывающих подозрения мест инъекций. Руководители регулятивных программ и руководители лабораторий должны четко определить цели испытаний и аналитические требования в части целевых тканей, маркерных остатков и диапазонов концентраций, чтобы гарантировать применение надлежащих методов в рамках программ регулятивного контроля. В некоторых случаях компетентные органы также могут использовать биологические жидкости, в частности мочу или сыворотку, для выявления наличия или отсутствия исследуемых остатков.

15.2 Имплементация иных руководств Комиссии Кодекса Алиментариус

Комиссия Кодекса Алиментариус выпустила руководство для лабораторий, участвующих в проведении испытаний импортируемых/экспортируемых пищевых продуктов⁴, где таким лабораториям рекомендуется:

(a) применять внутренние процедуры контроля качества, в частности те, что описаны в "Гармонизированном руководстве по внутреннему контролю качества в аналитических химических лабораториях"⁵;

(b) участвовать в надлежащих программах проверки квалификации для анализа пищевых продуктов, которые соответствуют требованиям, изложенным в "Международном гармонизированном протоколе о проверке квалификации (химических) аналитических лабораторий"⁶;

(c) соблюдать общие критерии для испытательных лабораторий, изложенные в Руководстве ISO/IEC 17025:2005 "Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий"; а также

(d) по возможности, использовать методы, которые были утверждены в соответствии с принципами, установленными Комиссией Кодекса Алиментариус.

Методы, применимые для анализа остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах, должны быть способны выявлять соединения, включенные в программы контроля остатков. Извлечение для анализа, а также прецизионность в отношении пищевых продуктов должны соответствовать критериям, установленным в иных разделах настоящего документа. Методы, должны применяться в рамках установленной лабораторной системы управления качеством, которая соответствует принципам, изложенным в приведенном выше документе о внутреннем контроле качества. При использовании в рамках программ регулятивного контроля остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах методов, в отношении которых не проводились межлабораторные испытания для определения показателей эффективности, процедуры контроля и обеспечения качества, использующие такие методы, требуют тщательного определения, имплементации и мониторинга. Что касается методов, в отношении которых были проведены межлабораторные испытания, показатели эффективности, такие как извлечение и прецизионность, определяются по результатам, полученным в ходе исследования. Что касается метода, подтвержденного в одной лаборатории, должны быть получены данные в целях определения ожидаемых показателей эффективности метода при его использовании аналитиками в этой лаборатории. Необходимо проводить мониторинг непрерывной эффективности с помощью системы управления качеством, которая внедрена в лаборатории.

15.3 Валидация метода и соответствие назначению

Процесс валидации метода предназначен для демонстрации того, что метод соответствует назначению. Это означает, что надлежащим образом квалифицированный аналитик, применяя специальное оборудование и материалы, а также следуя процедурам, описанным в методе, может получить надежные и достоверные результаты в рамках установленных статистических пределов для анализа образца. Валидация должна затрагивать вопросы маркерного остатка, целевой ткани и диапазона концентрации, выявленного лабораторией в рамках консультаций с руководителем программы контроля остатков. Если создается протокол метода с применением надлежащих аналитических стандартов, результаты в рамках установленных предельных технических характеристик должны быть получены с использованием тех же или эквивалентных пробных материалов квалифицированным аналитиком в опытной лаборатории по контролю остатков.

Межлабораторные исследования эффективности метода, как правило, удовлетворяют аналитическим требованиям для их применения в рамках регулятивной программы. В отношении таких методов проводится надлежащим образом спланированное межлабораторное исследование аналитиками в независимых лабораториях, чтобы участники использовали разные источники реагентов, материалов и оборудования.

Количественные методы, изученные совместно согласно пересмотренному гармонизированному протоколу, принятому в 1995 году Международной ассоциацией аналитических сообществ (AOAC International), Международным союзом теоретической и прикладной химии (IUPAC) и Международной организацией по стандартизации (ISO), прошли оценку как минимум в 8 лабораториях при отсутствии сложного оборудования или иных необычных требований (в таких случаях требуется как минимум 5 участвующих лабораторий)⁶. Совместные исследования качественных методов в настоящий момент требуют как минимум 10 участвующих лабораторий. В рамках совместных исследований, проводимых до 1995 г., оценка метода осуществлялась как минимум в шести лабораториях посредством приемлемого статистически спланированного исследования. Такие межлабораторные исследования эффективности метода, как правило, удовлетворяют аналитическим требованиям для их применения в рамках регулятивной программы, поскольку с помощью таких исследований получена информация об эффективности метода разными аналитиками в разных лабораториях. Однако сравнительно немного аналитических методов, которые в настоящий момент используются в программах контроля остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах, прошли валидацию с помощью таких межлабораторных исследований. Планы совместных исследований основаны на анализе закодированных материалов для повторных испытаний, которые представляют собой сочетание аналитов, матриц и концентраций, входящих в область применения метода, и предполагают независимую экспертную оценку плана и результатов исследования. В некоторых случаях могут проводиться межлабораторные исследования, которые не насчитывают минимальное число лабораторий, требуемое для квалификации в качестве совместного исследования. Такие исследования, если они проведены с использованием тех же научных принципов планирования, оценки и пересмотра, которые применяются к совместным исследованиям, могут дать полезную информацию об эффективности метода многим аналитикам в разных лабораториях, но они не обеспечивают ту же степень статистической достоверности, которая достигается по результатам совместных исследований.

Межлабораторные и совместные исследования методов, как правило, не охватывают все возможные комбинации остатков, тканей и видов животных, к которым метод может впоследствии применяться. Область применения методов может быть расширена, чтобы охватить родственные аналиты, дополнительные ткани, виды животных или продукты (или их комбинацию, не включенную в изначальное межлабораторное исследование) путем проведения дополнительных внутрилабораторных исследований. Аналитические результаты исследований расширения области применения метода могут требовать дополнительной проверки перед их использованием в рамках регулятивной программы. По возможности, аналитические результаты, полученные с использованием методов, которые не были утверждены с помощью традиционного межлабораторного исследования, должны сравниваться с результатами, полученными с использованием методов, утвержденных в рамках совместных или межлабораторных исследований или испытанных с использованием пробных материалов из признанных квалификационных программ. Сравнение должно быть основано на статистически приемлемом плане исследования с использованием частей тех же (однородных) образцов. Данные таких исследований должны пройти независимую экспертизу со стороны третьего квалифицированного лица (например, отделом по обеспечению качества, группой экспертов, учеными, специализирующимися в области регулирования, аудиторами национального центра сертификации) в целях определения соизмеримости эффективности метода.

Некоторые методы контроля остатков, пригодность которых для определения соответствия MRLVD была доказана, имеют историю применения в одной или нескольких экспертных лабораториях, однако в отношении них не проводилось официальное межлабораторное исследование. Пригодность указанных методов была доказана в момент изначального применения в регулятивных целей. После этого их использование продолжалось в течение длительного периода времени в связи с отсутствием альтернативных утвержденных методов или в силу того, что они были предпочтительными по причинам, которые могут включать в себя использование доступных технологий, издержки, надежность и пригодность к использованию в рамках ограничений национальной программы. Несмотря на отсутствие доказательств, полученных по результатам совместных или межлабораторных испытаний метода, показатели эффективности метода были доказаны посредством его успешного применения и благодаря данным по контролю качества в одной или нескольких лабораторий с течением времени.

Многие регулятивные лаборатории используют методы контроля остатков ветеринарных препаратов, в отношении которых не проводилось межлабораторное исследование. Данной ситуации способствуют такие факторы, как требование о наличии специальных знаний или оборудования, стоимость таких исследований, недостаток надлежащих лабораторий-партнеров, неустойчивость аналита и/или образца и быстро меняющиеся технологии. Хотя в течение многих лет внимание к эквивалентности аналитических результатов было основано на использовании стандартизированных методов, показатели эффективности которых были определены на основе совместного исследования, в настоящее время аккредитованные лаборатории работают в условиях, когда отдельная лаборатория должна нести ответственность за доказывание того, что применимые методы и полученные аналитические результаты отвечают критериям эффективности, установленным в рамках консультаций с клиентом. В отсутствие методов, утвержденных посредством межлабораторных испытаний, регулятивным лабораториям приходится зачастую применять аналитические методы, в отношении которых проводились исследования в рамках их собственной лаборатории для характеристики эффективности метода.

15.4 Валидация в отдельной лаборатории - подход на основе критериев

Руководство по валидации методов в отдельной лаборатории "Гармонизированное руководство по валидации методов анализа в отдельной лаборатории" было опубликовано IUPAC в качестве технического отчета⁷. Руководство по процедуре⁸признает, что методы, утвержденные в рамках межлабораторного исследования, не всегда доступны или применимы, особенно в отношении методов на основе множественных аналитов/множественных субстратов, а также в отношении новых аналитов. В таких случаях валидация методов может быть проведена в отдельной лаборатории на предмет их соответствия общим критериям отбора методов анализа, а также дополнительным критериям:

(а) валидация метода осуществляется в соответствии с протоколом, признанным на международном уровне (например, указанное выше Руководство IUPAC по валидации методов анализа в отдельной лаборатории);

(b) использование метода отражено в системе управления качеством согласно стандарту ISO/IEC 17025 (2005) или принципам надлежащей лабораторной практики;

(с) метод должен быть дополнен информацией о точности, достигнутой, например, посредством

- регулярного участия в программах проверки квалификации, при наличии;

- калибровки с использованием сертифицированных стандартных образцов, если применимо;

- исследований на извлечение, проводимых при ожидаемых концентрациях аналита;

- верификации результата с помощью иных утвержденных методов, при их наличии.

Подход на основе критериев, который объединяет модель валидации в отдельной лаборатории с требованием, чтобы методы соответствовали определенным требованиям к эффективности, был принят некоторыми регулятивными органами.

Признаки аналитических методов для остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах

16. Введение

Необходимо определить показатели эффективности аналитических методов, используемых для установления факта соответствия MRLVD, а также оценить соответствующим образом предлагаемые методы. Это позволит получить надежные аналитические результаты, а также обеспечит надежную основу для определения остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах для товаров в международной торговле. В представленной выше главе "Общие положения об аналитических методах контроля остатков" рассматриваются общие виды или категории регулятивных методов, а также содержится схема использования таких аналитических методов с учетом их предполагаемого назначения в нормативно-правовой базе. Ниже представлены признаки, общие для трех категорий методов (метод скрининга, количественный метод и метод подтверждения), в целях установления факта соблюдения MRLVD, установленных Кодексом. Кроме того, описаны дополнительные признаки, которые применимы только к одной или двум категориям методов.

17. Принципы разработки методов

Разработка аналитического метода требует наличия аналитиков, имеющих опыт в работе с подлежащими применению аналитическими технологиями, а также наличия соответствующего лабораторного пространства, оборудования и финансовой поддержки. До начала деятельности по разработке метода следует определить предполагаемое назначение метода и необходимость в нем в рамках программы контроля остатков, включая требуемые параметры эффективности. К иным факторам относятся требуемая область применения метода (исследуемые соединения или класс соединений и виды пробных материалов), потенциальные интерферирующие вещества, требуемые показатели эффективности системы измерений, соответствующие физико-химические свойства, которые могут влиять на эффективность метода, специфический характер заданной системы проведения испытаний и то, каким образом его следует определять, данные об устойчивости аналита и реагента, а также чистота реагентов, приемлемые рабочие условия, которые соответствуют критериям эффективности метода, руководства по подготовке проб, факторы окружающей среды, которые могут влиять на эффективность метода, соображения безопасности, а также иная специальная информация, которая имеет значение для потребностей программы. В частности, следует оценивать устойчивость стандартов в нормальных условиях хранения и использования и в ходе обработки проб. Следует определять устойчивость аналита в пробах в обычных условиях хранения проб до проведения анализа, в том числе в период, в течение которого проба может храниться до проведения потенциального повторного анализа в целях подтверждения результата.

Определение показателей эффективности метода имеет значение, поскольку с их помощью агентства по продовольственной безопасности могут получить необходимую информацию для разработки программ в сфере здравоохранения и управления ими. Показатели эффективности аналитических методов также обеспечивают основу для принятия надлежащих управленческих решений при последующем планировании, оценке и распоряжении продуктом. Что касается ветеринарной отрасли, это служит руководством к получению точного знания о том, каких показателей следует достигать при разработке аналитических процедур. Общая выгода состоит в получении четко определенных коэффициентов эффективности аналитического метода. Требования к эффективности метода могут различаться в зависимости от того, используется ли метод в целях скрининга, определения количества или подтверждения остатков, для которых были установлены максимально допустимые уровни, или остатков препаратов, для которых ADI и MRLVD не были рекомендованы. В последнем случае компетентный орган вправе установить минимальный стандарт эффективности, которому должны соответствовать аналитические методы, используемые в целях регулятивного контроля. Однако если в пищевых продуктах не выявляются никакие безопасные концентрации указанных соединений, компетентный орган вправе периодически пересматривать лимиты в целях обеспечения того, что они отражают совершенствования в области технологии и аналитических способностей. Если такие лимиты не были официально установлены компетентным органом, они, как правило, устанавливаются de facto путем выявления возможностей методов, используемых в регулятивных лабораториях.

18. Аналитические показатели эффективности

18.1 Показатели эффективности методов скрининга

Методы скрининга по своей природе являются, как правило, качественными или приближенно-количественными. Их цель состоит в отделении проб, которые не содержат определяемых остатков, превышающих пороговые значения ("отрицательные пробы") от тех, которые содержат остатки, превышающие такие значения ("положительные пробы"). В этой связи стратегия валидации направлена на установление пороговых концентраций, при превышении которых результаты считаются "положительными", определение на основе статистики доли "ложноположительных" и "ложноотрицательных" результатов, проведение испытаний на интерференцию, а также на установление надлежащих условий использования.

Что касается испытаний при скрининге, в частности тех, где используются технологии испытательного комплекта, термин "чувствительность" относится к самым низким концентрациям, при которых заданный аналит может быть с достоверностью обнаружен в рамках установленных статистических пределов. В рамках программы AOAC Performance Tested Program_ для испытательных комплектов это определяется экспериментальным путем посредством испытаний как минимум 30 пробных материалов, свободных от остатков и содержащих аналит в концентрации, повышенной до целевого уровня. Пробные материалы должны происходить как минимум из шести различных источников (то есть, как минимум 5 копий от каждого из 6 источников); при этом все должны давать положительный результат при повышении концентрации до целевого уровня. Три и более отрицательных результата свидетельствуют о неудачных испытаниях на чувствительность. Если один или два результата являются отрицательными, следует повторить эксперимент; при повторном проведении эксперимента два отрицательных результата свидетельствуют о неудаче. Следует повторить эксперимент с известным исследуемым материалом в целевых концентрациях, если такой материал имеется в наличии.

Термин "избирательность" метода скрининга относится к способности испытаний установить, что образцы, которые показывают отрицательную реакцию, являются истинно отрицательными. Кроме того, испытания должны быть способны отличить наличие целевых соединений или групп соединений от иных веществ, которые могут присутствовать в пробном материале. Эти способности, как правило, не столь велики, как способности количественных методов, поскольку методы скрининга зачастую используют структурные характеристики, общие для группы или класса соединений. Такие методы, которые в целом относятся к категории методов скрининга, зачастую основаны на подавлении роста микроорганизмов, иммунологическом анализе или хромогенных реакциях, которые могут неоднозначно идентифицировать соединение. Избирательность методов скрининга может быть повышена при их использовании в качестве системы обнаружения после применения хроматографических или иных способов разделения. Чтобы продемонстрировать коэффициент избирательности, равный как минимум 90%, с 95-процентной степенью достоверности (которая рекомендована для испытаний при скрининге), проводится анализ 30 копий в отношении репрезентативных холостых матричных образцов, полученных как минимум из шести разных источников. Все результаты должны быть отрицательными. Дополнительные испытания на потенциальную интерференцию и перекрестную реактивность могут быть проведены в отношении холостых матричных образцов, с повышенной концентрацией потенциальных интерферирующих веществ, в частности иных препаратов, которые могут применяться при лечении животных, потенциальных загрязнителей окружающей среды, метаболитов препаратов или иных родственных по химическому составу соединений. В этих случаях реакции также должны быть отрицательными, если указанные соединения присутствуют в концентрациях, которые, как можно обоснованно полагать, присутствуют в образцах.

"Пограничное" или пороговое значение для испытаний определенного соединения устанавливается при проведении экспериментов на концентрацию/реакцию, как правило, с использованием 30 копий (как минимум из шести источников), при повышении концентрации. Когда установлены концентрации, при которых все 30 копий дают отрицательную реакцию и все 30 копий дают положительную реакцию, эксперимент повторяется с использованием холостых матричных образцов при повышенных четырех концентрациях с равными интервалами между "всеми отрицательными" и "всеми положительными" концентрациями. Испытания дополнительного набора проводятся при концентрации, которая на 20% превышает "все положительные" концентрации. Статистический анализ результатов позволяет пользователю установить надежную концентрацию обнаружения при требуемом уровне достоверности (как правило, 95%)⁹.

18.2 Показатели эффективности количественных методов

Избирательность, то есть способность аналитического метода выявлять и отличать ответный сигнал конкретного соединения при наличии других соединений, которые могут присутствовать в пробном материале, особенно важна для определения показателей эффективности методов, используемых в рамках программ регулятивного контроля остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах. Следует принимать во внимание два аспекта: способность метода давать ответный сигнал, свободный от интерференций других соединений, которые могут присутствовать в образцах или в выборке образцов, а также способность метода однозначно идентифицировать ответный сигнал как относящийся исключительно к конкретному соединению. Что касается количественного метода, требование состоит в том, чтобы сигнал, используемый для количественного определения, относился только к целевому аналиту и не содержал доли совместно экстрагированных материалов. Хроматографический анализ на основе пиков, которые не полностью отделены, дает менее надежные количественные результаты. Использование детекторов конкретных элементов, длины волн детектирования или масс-селективных детекторов, которые являются специфическими для конкретных соединений или структур, в сочетании с хроматографическим разделением улучшает избирательность количественных методов для остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах.

Помимо избирательности метода, следует доказать способность метода давать надежный количественный результат. Такое доказывание основано на двух факторах:

(a) приближенность результата к истинному или принятому значению концентрации аналита, присутствующего в пробном материале, выраженная в терминах "точность", "правильность" или "систематическая погрешность"; и

(b) способность метода давать достоверные результаты в части определения копий, выраженная в терминах "прецизионность" ("повторяемость" и "воспроизводимость").

Рекомендуется, чтобы метод, используемый для подтверждения установленных Кодексом MRLVD, соответствовал стандартам эффективности для правильности и прецизионности, перечисленным в Таблице 1, где относится к коэффициенту изменчивости, определенного с помощью анализируемых холостых матричных образцов, с повышенной концентрацией до извлечения, в - это общая лабораторная изменчивость, которая на 10% состоит из оценки изменчивости подготовки проб¹⁰.

Таблица 1. Критерии эффективности, которым должны соответствовать методы, используемые в качестве количественных аналитических методов для подтверждения MRLVD для остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах¹¹

Концентрация мкг/кг	Коэффициент изменчивости (CV)				Правильность
Концентрация мкг/кг	Повторяемость (внутри лаборатории ), %	Повторяемость (внутри лаборатории ), %	Воспроизводимость (между лабораториями ), %	Воспроизводимость (между лабораториями ), %	Диапазон среднего % извлечения
	35	36	53	54	50 - 120
1 - 10	30	32	45	46	60 - 120
10 - 100	20	22	32	34	70 - 120
100 - 1000	15	18	23	25	70 - 110
	10	14	16	19	70 - 110

Правильность метода может быть определена на основе анализа сертифицированного стандартного материала путем сравнения результатов с теми, что были получены с использованием другого метода, для которого ранее были точно установлены параметры эффективности (как правило, совместно исследованный метод), или, в отсутствие стандартных материалов или методов, утвержденных в рамках межлабораторных испытаний, - путем определения извлечения аналита с повышенной концентрацией до известных холостых пробных материалов. Определение правильности как извлечения часто используется при валидации методов в отношении остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах, поскольку сертифицированный стандартный материал и методы, утвержденные в рамках межлабораторных испытаний, зачастую недоступны. Точность измерений тесно связана с систематической ошибкой (погрешность аналитического метода) и извлечением аналита (измеренного как процент извлечения). Требования точности методов варьируются в зависимости от планового регулятивного использования результатов. Точность должна быть тщательно охарактеризована при концентрациях, близких к MRLVD или к целевым концентрациям с точки зрения регулятивных мер (как правило, при концентрациях, превышающих целевую концентрацию в 0,5 - 2,0 раза), чтобы гарантировать, что регулятивные меры принимаются только в отношении образцов, содержащих остатки в превышение регулятивных лимитов, что может быть подтверждено с определенным уровнем статистической достоверности.

Извлечение, как правило, выражается в виде процентной доли аналита, определенного экспериментальным путем после повышения концентрации пробных материалов при известных концентрациях, и должно оцениваться для концентраций, охватывающих аналитический диапазон метода. При толковании извлечений важно признавать, что аналит, добавленный к образцу, может демонстрировать иное поведение по сравнению с тем же аналитом, образующимся в естественных условиях (остатком лекарственных препаратов). В ряде случаев количество извлекаемого исследуемого остатка (выхода продукции или извлеченной доли) меньше совокупных присутствующих исследуемых остатков. Причиной этого могут служить потери в ходе извлечения, внутриклеточное связывание остатков, наличие конъюгатов или иные факторы, которые не в полной мере представлены экспериментами по извлечению, проводимыми с холостыми тканями с повышенной концентрацией аналита. Ожидается, что при сравнительно высоких концентрациях аналитическое извлечение достигнет ста процентов. При более низких концентрациях, особенно при использовании методов, предполагающих этапы экстенсивной экстракции, изоляции и концентрации, степень извлечения может быть ниже. Независимо от средней степени наблюдаемых извлечений, извлечение с низкой изменчивостью более предпочтительно, чтобы можно было принять надежные поправки на извлечение к окончательному результату, когда это необходимо. Поправки на извлечение должны соответствовать руководству Комиссии Кодекса Алиментариус¹¹.

Прецизионность, которая количественно определяет изменения между повторными измерениями исследуемых образцов того же пробного материала, также является важным фактором при определении случаев, когда остаток в пробе следует считать превышающим MRLVD или иные регулятивные лимиты. Прецизионность метода, как правило, выражается через внутрилабораторные изменения (повторяемость) и межлабораторные изменения (воспроизводимость), если в отношении метода проводились межлабораторные испытания. При валидации метода в отдельной лаборатории прецизионность определяется на основе экспериментов, проводимых в разные дни с использованием как минимум шести различных тканевых пулов, различных серий реагентов, по возможности различного оборудования и т.д., а также проводимых, по возможности, разными аналитиками. Прецизионность метода, как правило, выражается как среднеквадратическое отклонение. Еще одним полезным термином является "относительное среднеквадратическое отклонение", или коэффициент изменения (среднеквадратическое отклонение, деленное на абсолютную величину арифметического среднего). Оно может быть представлено как процентная доля путем умножения на сто.

Изменчивость метода, достигнутая в лаборатории, которая разработала метод, как правило, меньше изменчивости, достигнутой в другой лаборатории, которая впоследствии использует данный метод. Если метод не может продемонстрировать надлежащий стандарт эффективности в той лаборатории, где он был разработан, нельзя ожидать, что он будет более эффективным в других лабораториях.

Количественные методы обычно основаны на сравнении реакции аналита в пробе с реакцией стандартов аналита в растворе при известных концентрациях. При разработке и валидации метода следует сначала определить калибровочную кривую, чтобы оценить реакцию детектора на стандарты в диапазоне концентраций. Такие концентрации (как минимум 5 плюс холостая) должны охватывать полный спектр аналитического интереса, а образующаяся в результате кривая должна быть статистически выражена. При этом хотя согласно рекомендованной практике следует включать надлежащую холостую пробу в калибровочные образцы, это не означает, что экстраполяция в область кривой ниже низкого стандарта является приемлемой для получения количественного результата. Аналитическая функция устанавливает связь между реакциями для аналита, извлеченного из пробного материала при различных концентрациях в пределах спектра аналитического интереса. Для аналитов, для которых были установлены MRLVD или регулятивные лимиты в конкретном пробном материале (матрице), реакция обычно определяется для известных холостых пробных материалов и для холостых пробных материалов с повышенной концентрацией при диапазоне концентраций выше и ниже MRLVD (рекомендуется использовать 6 различных источников холостых материалов).

Экспериментальные данные аналитической функции могут использоваться для расчета аналитического извлечения при каждой концентрации. Они особенно важны в случаях, когда наличие матричных совместно экстрагируемых веществ меняет реакцию аналита по сравнению с аналитическими стандартами. Линейность определяется посредством аналитических функциональных экспериментов и представляет собой статистическое выражение кривой, полученной для анализа пробных материалов, с повышенной концентрацией при целевых концентрациях. Как правило, она определяется посредством линейного регрессионного анализа данных, исходя из наличия линейной реакции. Становится все более распространенным среди методов для остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктов брать за основу количественного определения стандартную кривую, полученную путем добавления стандарта к известному холостому репрезентативному матричному материалу в диапазоне надлежащих концентраций, который охватывает целевую величину (аналитическую функцию). Использование такой "тканевой стандартной кривой" для калибровки подразумевает поправку полученных аналитических результатов на извлечение.

Кроме того, необходимо установить самые низкие пределы, при которых может осуществляться надежное обнаружение, количественное определение или подтверждение наличия аналита с использованием конкретного аналитического метода. Предел обнаружения можно на практике описать как самую низкую концентрацию, при которой аналит может быть обнаружен в пробе. Его можно оценить с использованием среднеквадратического отклонения от линейного регрессионного анализа стандартной кривой, полученной в рамках описанного выше аналитического функционального эксперимента¹². При использовании данного подхода предел обнаружения рассчитывается посредством точки пересечения кривой с осью y (исходя из положительного значения) плюс _, умноженное на три. Указанный подход позволяет получить консервативную оценку предела обнаружения. Предел обнаружения также можно оценить посредством измерений репрезентативных тестовых материалов следующим образом: самая слабая соответствующая реакция аналита в холостой пробе плюс ее среднеквадратическое отклонение, умноженное на три. Зачастую необходимо повышать концентрацию тестовых материалов при концентрации, приводящей к едва различимой реакции, для получения приблизительной величины среднеквадратического отклонения холостой пробы при использовании указанного подхода.

Предел количественного определения (LOQ), который также называют пределом квантификации, может быть установлен посредством тех же экспериментов с использованием точки пересечения кривой с осью y плюс _, умноженное на десять. Что касается методов, используемых для обоснования MRLVD, установленных Комиссией Кодекса Алиментариус, предел количественного определения должен соответствовать критериям прецизионности и точности (извлечения), как указано в Таблице 1, и должен быть равным или менее половины значений MRLVD. При этом если предел количественного определения метода ниже, чем фактические концентрации, в отношении которых проводится мониторинг на их соответствие MRLVD, то валидация и последующее применение такого метода должны быть основаны на самом низком калиброванном уровне (LCL), который, как правило, равен 0,5 x MRLVD. При использовании в рамках регулятивной программы пределы обнаружения и количественного определения представляют собой важные параметры, если метод будет применяться для оценки подверженности остаткам, если может возникнуть интерес в мониторинге остатков при концентрациях ниже MRLVD или при проведении анализа остатков веществ, для которых отсутствуют ADI или MRLVD. При мониторинге соблюдения MRLVD важно, чтобы LCL был включен в анализ, который надлежащим образом демонстрирует, что концентрация MRL может быть надежно определена. LCL метода, используемого в обоснование MRLVD, не должен быть меньше LOQ. Руководство по процедуре рекомендует использовать термин "предел определения" в разделе "Термины, подлежащие применению в рамках подхода на основе критериев"⁸.

18.3 Показатели эффективности методов подтверждения

Избирательность, то есть способность метода однозначно идентифицировать ответный сигнал как относящийся к конкретному соединению, является первичным фактором для методов подтверждения. Некоторые инструментальные технологии, в частности, инфракрасная спектроскопия на основе преобразования Фурье или масс-спектрометрия, могут быть в достаточной степени избирательными для обеспечения однозначной идентификации. Зачастую методы подтверждения основаны именно на этих технологиях.

Как правило, требуется как минимум четыре точки идентификации для соответствия принятым критериям эффективности в рамках регулятивных методов. Считается, что методы, основанные на масс-спектрометрии высокого разрешения, дают большую степень надежности благодаря более точным измерениям массы веществ по сравнению с измерениями, полученными с использованием методик масс-спектрометрии низкого разрешения. Требования эффективности, предъявляемые к методам подтверждения, основаны на GC/MS и LC/MS низкого разрешения, как показано в недавней публикации международной экспертной организации¹³, представлены в Таблице 2.

Таблица 2: Требования к эффективности для относительной интенсивности ионов (пробы в сравнении со стандартом) с использованием различных аналитических методик масс-спектрометрии¹⁰

Относительная интенсивность ионов (% от основного пика)	GC-MS (ионизация электронным ударом) (относительная)	GC/MS (химическая ионизация) GC/MS/MS LC-MS, GC-MS/MS (относительная)
>50%
20% - 50%
10% - 20%

Считается, что одна идентификационная точка должна быть присвоена каждому структурно значимому ионному осколку, обнаруженному с использованием метода масс-спектрометрии низкого разрешения. При использовании тандемного инструмента с низким разрешением, например "тройного квадрупольного" масс-спектрометра, вторичные осколки выявляются из первичных осколков, которые выделяются на первой стадии спектрометра. Тот факт, что такие структурно значимые осколки образованы из фрагментации крупного осколка (родительского или исходного иона), связанного с молекулой, дает большую степень достоверности, и каждому такому дочернему иону или продукту иона присваивается значение, равное 1,5 идентификационной точки. Комбинация исходного иона и двух продуктов иона дает 4 необходимые идентификационные точки при использовании инструментов MS/MS с низким разрешением в рамках метода подтверждения.

Дополнительная степень достоверности обеспечивается при использовании масс-спектрометров высокого разрешения в рамках метода подтверждения, поскольку высокое разрешение дает более точную идентификацию массы веществ и может быть использовано для предварительной оценки элементного состава каждого осколка. Что касается одинарного масс-спектрометра высокого разрешения, каждому структурно значимому осколку присваивается значение, равное двум идентификационным точкам; при этом продуктам иона, которые образуются в процессе экспериментов MS/MS высокого разрешения, присваивается значение идентификационной точки, равное 2,5 для каждого. Кроме того, должно быть измерено как минимум одно ионное соотношение, чтобы исключить возможность образования осколков одной и той же массы веществ, возникающих из изобарных соединений аналогичной структуры.

Иные методики, используемые в совокупности, могут достичь степени избирательности, сопоставимой с методиками подтверждения. Например, идентификация может быть подтверждена с помощью совокупности таких методов, как:

(а) тонкослойная хроматография;

(b) газожидкостная хроматография конкретных элементов и сопутствующие системы обнаружения;

(d) определение относительного времени удерживания, специфического для конкретных соединений, с использованием нескольких хроматографических систем различной полярности.

Такие процедуры должны применяться при установленных MRLVD аналита. Если такой метод подтверждения, как масс-спектрометрия, недоступен, информация об избирательности, связанная с анализом остатков конкретных ветеринарных препаратов в образце, может быть получена из различных источников¹⁴. Такая информация может быть зафиксирована в структурированных журналах, содержащих всю информацию, которая позволяет сделать вывод о том, что посредством метода в образце было обнаружено конкретное соединение при измеряемых концентрациях согласно отчету. Принимая во внимание, что никакое однократное измерение или однократный анализ не могут дать желаемое однозначное подтверждение идентичности соединения и/или присутствующего количества, составленная объединенная информация свидетельствует о том, что аналитик добросовестно предпринял усилия, чтобы прийти к логичному результату, совместимому с доступными данными и иной имеющейся информацией. Примеры аналитических методик, которые могут обеспечивать соответствие критериям аналитических методов подтверждения, представлены в Таблице 3.

Таблица 3. Примеры методов обнаружения, подходящих для анализа веществ в целях подтверждения, рекомендованных Консультацией в г. Мишкольц¹⁰

Метод обнаружения	Критерий
LC или GC и масс-спектрометрия	При мониторинге достаточного количества осколков ионов
LC с детектором на основе фотодиодной матрице	Если УФ-спектр является характерным
LC-флуоресценция	В сочетании с другими методами
Двумерная тонкослойная хроматография (спектрофотометрия)	В сочетании с другими методами
GC с детектором электронного захвата (ECD), с азотно-фосфорным детектором (NPD), с пламенно-фотометрическим детектором (FPD)	Только в сочетания с двумя или более методами разделения^а
Дериватизация	Если она не являлась предпочтительным методом
LC-иммунограмма	В сочетании с другими методами
LC-УФ/Видимая область спектра (VIS) (одночастотная)	В сочетании с другими методами

------------------------------

^a Иные хроматографические системы (с применением стационарных и/или подвижных фаз различной избирательности) или иные методы.

------------------------------

Хотя методы подтверждения в целом представляют собой инструментальные методы, наблюдение патологических или иных морфологических изменений, которые точнее свидетельствуют о подверженности классу ветеринарных препаратов, может потенциально служить методом подтверждения, если оно характеризуется достаточной чувствительностью и прецизионностью.

18.4 Общие характеристики эффективности методов, применяемых в рамках программ регулятивного контроля

Имеются некоторые дополнительные факторы, которые следует учитывать при отборе надлежащих методов для использования в программах регулятивного контроля остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах. Методы должны быть устойчивыми (стабильными), экономически эффективными, относительно несложными, подвижными и способными к одновременной обработке ряда образцов с минимальными временными затратами. Кроме того, должна быть установлена устойчивость аналита.

Испытания на устойчивость должны проводиться с использованием стандартного подхода на основе факторного анализа в целях определения каких-либо критических контрольных точек¹⁵. Как правило, к факторам, которые включены в анализ, являются изменения объемов или концентраций реагентов, pH, время и температура инкубации или реакции, качество реагента, а также различные партии или источники реагента или хроматографического материала. Испытания на устойчивость метода подтверждения могут потребоваться, если метод существенно отличается от ранее утвержденного количественного метода (если метод использует иные процедуры экстракции или дериватизации, отличные от тех, что используются при количественном методе).

Под экономической эффективностью понимается использование реагентов и поставок, которые поставляются по первому требованию местными поставщиками с соблюдением доброкачественности, а также оборудование, для которого общедоступны запасные детали и обслуживание. Эффективность метода повышается, если многочисленные пробы могут быть проанализированы одновременно. Это сокращает время анализа каждого образца и, как правило, уменьшает расходы на образец, поскольку анализ образцов предполагает определенные фиксированные издержки независимо от того, исследуются ли образцы по отдельности или более крупными партиями. Способность метода объединить несколько образцов в партию важна при необходимости анализа больших количеств проб в короткие или фиксированные сроки. Подвижность представляет собой характеристику аналитического метода, которая позволяет переносить его из одного места в другое без потери установленных характеристик аналитической эффективности.

Устойчивость аналита в ходе анализа должна быть установлена для стандарта и для аналита, присутствующего в пробном материале, в ходе обработки в рамках полного анализа для всех методов, используемых в программах регулятивного контроля, и для всех типичных условий хранения образца до проведения его анализа. Период, выбранный для устойчивости при хранении, должен охватывать предполагаемый период, когда образец может храниться для всех требуемых видов анализа, в том числе при применении методов скрининга, количественных методов и методов подтверждения. Целесообразно провести исследование хранения для периода, который как минимум на 90 дней превышает ожидаемый период завершения скрининга, количественного и подтверждающего анализа и представления результатов при наличии сомнений и требований повторного анализа.

19. Принципы разработки и валидации методов контроля остатков

19.1 Отбор надлежащего исследуемого материала для валидации

Лаборатории должны продемонстрировать, что методы, используемые для анализа регулятивных проб, были надлежащим образом утверждены. Традиционно межлабораторное валидационное исследование метода является предпочтительным подходом, позволяющим получить аналитические данные для определения показателей эффективности метода. Однако были разработаны и другие модели, к которым относятся межлабораторные испытания при участии меньшего количества лабораторий по сравнению с тем, которое требуется для проведения полноценного совместного исследования, в также валидация в отдельной лаборатории на основе тщательной внутренней оценки эффективности метода, которая подтверждена системой управления качеством, независимыми проверками и анализом профессионального уровня или исходных материалов, при наличии.

При разработке и валидации методов контроля остатков данные должны быть получены из трех видов пробного материала. Контрольный исследуемый материал, полученный от животных, не подвергнутых лечению, дает информацию об аналитических исходных данных и о матричных интерференциях. Исследуемый материал в повышенных концентрациях, содержащий известное количество аналитов, добавленных к контрольному материалу, позволяет получить информацию о способности метода извлекать исследуемый аналит в заданных условиях. Ткани должны быть получены из нескольких источников для охвата вариаций, обусловленных такими факторами, как различия в рационе питания, животноводческих практиках, в поле и породе животных. Рекомендуется использовать как минимум шесть источников материала.

В некоторых случаях известные пробные материалы, не содержащие ветеринарных препаратов, могут быть недоступны для использования в лабораториях по контролю остатков. В таких случаях может быть использован эквивалентный пробный материал. Эквивалентные пробные материалы могут состоять либо из той же матрицы, что и исследуемая пробная матрица из неизвестного источника, либо из другой матрицы из известного источника, не содержащего ветеринарных препаратов, который близко соответствует пробной матрице. Во всех случаях лаборатория по контролю остатков должна доказать, что эквивалентный пробный материал не подвержен интерференциям со стороны препарата и демонстрирует удовлетворительную степень извлечения образца в повышенных концентрациях. Кроме того, если материал из неизвестного источника используется для количественных методов или методов скрининга, рекомендуется применение второго метода для демонстрации того, что матрица не содержит остатков ветеринарного препарата. Лаборатория по контролю остатков должна под свою ответственность доказать соответствие эквивалентного пробного материала назначению.

Наконец, анализ полученных естественным путем тканей сельскохозяйственных животных, которые были подвергнуты лечению ветеринарными препаратами, позволяет получить информацию о биологических или иных процессах взаимодействия, которые могут иметь место при анализе образцов в целях контроля остатков.

19.2 Неопределенность измерений

Лаборатории должны предоставлять своим заказчикам по их запросу информацию о неопределенности измерений или заявление о достоверности в связи с количественными результатами, полученными посредством каждого количественного метода. Руководство по оценке неопределенности измерений разработано IUPAC и опубликовано иными независимыми научными организациями¹⁶.

19.3 Применение внутренних стандартов

Методы контроля остатков иногда разрабатываются с использованием внутренних стандартов аналитического контроля. Надлежащим образом используемый внутренний стандарт восполнит некоторую аналитическую изменчивость анализа, повысив прецизионность. Однако внутренний стандарт, примененный ненадлежащим образом, может скрыть переменные значения, которые составляют важную часть аналитических измерений. При использовании внутреннего стандарта его следует применять к образцу как можно раньше в ходе процедуры, предпочтительно к исследуемому материалу до начала анализа. Внутренний стандарт должен отражать извлечение целевого аналита единообразным и прогнозируемым способом. Внутренний стандарт, который не отражает поведение целевого аналита в методе, приведет к существенным ошибкам в подсчете окончательного результата. Следует с осторожностью выбирать внутренние стандарты в целях обеспечения того, чтобы они не изменяли процентное извлечение исследуемого аналита и не создавали препятствия процессу измерений. Важно знать объем и предсказуемость влияния внутреннего стандарта на аналитический метод. Внутренние стандарты при их надлежащем использовании могут существенно повысить эффективность метода.

19.4 Вопросы окружающей среды

Если методы контроля остатков могут быть подвержены крайне изменчивым физическим условия проведения испытаний, этот факт следует учитывать при разработке и валидации таких методов. Решение указанных проблем позволит повысить устойчивость метода. Теплые среды могут требовать наличия более термостойких реагентов, в то время как растворители, используемые при анализе, должны быть в меньшей степени летучими, а требования к исследуемому образцу - более лояльными. Более холодные среды могут требовать, чтобы реагенты и растворители обладали другими физическими свойствами, в частности имели более низкую точку замерзания и лучшие характеристики сольватации, в целях обеспечения эффективной экстракции аналита. Температура окружающей среды может влиять на время, необходимое для проведения анализа, а также на скорость реакции, гравитационное разделение и цветные проявления. Указанные соображения могут затруднить усилия по стандартизации методов для использования в различных условиях окружающей среды вследствие необходимости адаптировать методы в целях уравновешивания данных факторов. При анализе физических условий, в которых будет использоваться метод, важно помнить, что мерная стеклянная посуда и другие аналитические инструменты подвергаются калибровке для их использования при специальных температурах или в заданном диапазоне температур. Их использование за пределами таких температур может поставить под сомнение результаты испытаний.

19.5 Выбор модели валидации

Аналитический метод, разработанный и используемый только в одной лаборатории, может иметь ограниченное применение в рамках программ по контролю остатков, за исключением случаев, когда речь идет о соответствии точным прогнозируемым результатам метода валидации в отдельной лаборатории в связи с аккредитацией в рамках стандарта ISO/IEC-17025 или эквивалентных процедур аккредитации для испытательных лабораторий. Надежность представленных значений может вызывать опасения даже при наличии усиленных процедур контроля качества, если такие значения не подтверждены данными постоянных программ проверки квалификации, сравнением с надлежащим методом, который был утвержден в рамках межлабораторного исследования, или с иными формами межлабораторного сравнения результатов. Предпочтительно, чтобы метод был утвержден как минимум тремя лабораториями. Методы, которые прошли тщательную валидацию в отдельной лаборатории с применением надлежащим образом разработанных испытаний на устойчивость, должны быть способны к успешному прохождению совместного исследования с участием как минимум восьми различных лабораторий.

Принципы проведения валидации метода в отдельной лаборатории, межлабораторного испытания метода или совместного исследования метода контроля остатков одинаковы. Пробы для оценки эффективности метода должны быть неизвестны аналитику, должны быть отобраны случайным образом и содержать остатки в количестве, приближенном к MRLVD или к иным целевым концентрациям. В наличии также должны быть пробы с содержанием аналита выше и ниже исследуемой концентрации и холостые исследуемые материалы. Необходимо получить как минимум три отдельных набора данных за три периода анализа как минимум в трех отдельных случаях (с перерывом как минимум в один день), предпочтительно в рамках анализа копий в целях улучшения статистической оценки эффективности метода, а также оценки межсуточной изменчивости. Следует иметь в виду, что указанные требования являются минимальными. Установлению стандартов эффективности метода на основе статистики способствует увеличение числа независимых аналитиков и лабораторий, проводящих испытания метода, а также количества исследуемых образцов. При валидации в отдельной лаборатории рекомендуется, чтобы несколько аналитиков проводили испытания метода, что позволит принять надлежащие меры по обеспечению внутрилабораторной эффективности. Рекомендуется расширение валидации в целях включения в этот процесс иных лабораторий предпочтительно до такого количества, которое требуется для проведения совместного исследования. Анализ слепых дубликатов, как требуется в протоколе совместного исследования⁸, только в восьми лабораториях с использованием одного или двух видов животных и тканей дает ограниченную оценку качества общей повторяемости и воспроизводимости. Валидация метода, подвергнутого совместному исследованию, может быть расширена в целях охвата дополнительных тканей и видов животных в рамках последующих исследований, проводимых отдельной экспертной лабораторией, по необходимости.

19.6 Система управления качеством

Система управления качеством является важным компонентом анализа остатков. С ее помощью аналитики проводят мониторинг факторов, связанных с анализом образца, а независимые эксперты осуществляют контроль, гарантирующий надлежащее выполнение аналитической программы. Применение аккредитованной системы управления качеством бесценно для потребителей, производителей и законодательных органов в целях обоснования принятия решений органами по контролю остатков, повышения надежности аналитических результатов, а также предоставления данных о качестве в рамках программ контроля остатков для подтверждения продовольственной безопасности в части остатков ветеринарных препаратов в пищевых продуктах. Лабораториям регулятивного контроля рекомендуется принимать меры по обеспечению качества, совместимые с принципами, опубликованными IUPAC.

------------------------------

¹ GUIDELINES FOR THE DESIGN AND IMPLEMENTATION OF NATIONAL REGULATORY FOOD SAFETY ASSURANCE PROGRAMME ASSOCIATED WITH THE USE OF VETERINARY DRUGS IN FOOD PRODUCING ANIMALS (CAC/GL 71-2009). Принято в 2009 г. Пересмотр в 2012 и в 2014 гг.

² Определение, использованное в Руководстве для производства, переработки, маркировки и продажи органических пищевых продуктов (CAC/GL 32-1999).

³ Хорвиц, У. 1995. Протокол по разработке, проведению и толкованию исследований эффективности метода. Pure and Applied Chemistry, 67:331-343.

⁴ CAC/GL 27-1997. Руководство для оценки компетенции испытательных лабораторий, участвующих в контроле импорта и экспорта пищевых продуктов.

⁵ Pure and Applied Chemistry, 67 (1995): 649-666.

⁶ Pure and Applied Chemistry, 78 (2006): 145-196.

⁷ Томпсон, M., Эллисон С.Л.Р. и Вуд Р. (2002) Гармонизированное руководство по валидации методов анализа в отдельной лаборатории. Pure and Applied Chemistry 74: 835-855.

⁸ ФАО/ВОЗ Руководство по процедуре Комиссии Кодекса Алиментариус.

⁹ Финней, Д.Дж. (1978) Статистический метод при биологическом анализе, 3-е издание. MacMillan Publishing Co., Нью-Йорк.

¹⁰ Файгель А., Амбрус А. ред. (2000) Принципы валидации методов, Королевское общество химии, Кембридж, Соединенное Королевство.

¹¹ CAC/GL 37-2001 Гармонизированное руководство IUPAC для использования информации о данных по "извлечению" при аналитических измерениях; см. также Томпсон M., Эллисон С., Файгель А., Уиллетс П. и Вуд Р. (1999) Гармонизированное руководство по использования информации о данных по "извлечению" при аналитических измерениях, Pure Applied Chemistry, 71: 337-348.

¹² Миллер, Дж.К., и Миллер, Дж.Н. (1993) Статистика для аналитической химии, 3-е издание, Ellis Horwood Ltd., Чичестер.

¹³ Бетем, Р., Баусон, Дж. О., Гейл, Дж., Хеллер, Д., Лехотаи, С., Лу, Дж., Муссер, С., Прайс, П. и Штайн, С. (2003) Установление соответствия назначению методов масс-спектрометрии. Journal of the American Society for Mass Spectrometry 14: 528-541.

¹⁴ Стефани, Р.У. (2003). SPECLOG - Реестр спецификаций. CRD-9, Комитет Кодекса по остаткам ветеринарных препаратов в пищевых продуктах, 14-я сессия, Арлингтон, Вирджиния, США, 4-7 марта.

¹⁵ Йоуден, У.Дж., и Штайнер, E.Х. (1975) Статистическое руководство Ассоциации химиков-аналитиков, состоящих на государственной службе, AOAC International, Гейтерсберг, VA.

¹⁶ Руководство EURACHEM/CITAC Количественное определение неопределенности в аналитических измерениях, http://www.measurementuncertainty.org/mu/guide/index.html, дата обращения: 18 сентября 2007 г.

¹⁷ В рамках теории вероятности и статистики гипергеометрическое распределение представляет собой дискретное (состоящее из отдельных, не связанных друг с другом частей) распределение вероятностей, которое описывает число удачных исходов в последовательности n, выведенное из конечной совокупности без повторения.

¹⁸ Такое сито можно заменить ситом по стандарту США со стандартной сеткой N40 (размер отверстия 0,420 мм)

¹⁹ Таблицы случайных чисел состоят из случайно сгенерированных последовательностей цифр (0 - 9). Для повышения удобства считывания предусмотрены пробелы, например между каждой 4-ой цифрой или между каждым 10-м рядом. Считывание может начинаться с любого места (в произвольном порядке), однако начавшись, должно продолжаться вдоль строки или по столбцу, НЕ перескакивая. Пример: извлечение из таблицы чисел случайной выборки: 3680 2231 8846 5418 0498 5245 7071 2597.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас

Получить бесплатный доступ

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Приложение А. Стратегии отбора проб

Приложение В. Отбор продуктов

Приложение С. Показатели эффективности мультиметодов для определения остатков (MRM) ветеринарных препаратов

ГАРАНТ:

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас