Методика обнаружения пирогенобразующих микроорганизмов в дистиллированной воде, 0,9% растворе натрия хлорида и 5%, 10%, 25% или 40% растворах глюкозы (дополнение к методическим указаниям "Микробиологический контроль в аптеках" от 24 декабря 1984 г.) (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 11 сентября 1990 г. N 5191-90)

Введение

Причиной пирогенности дистиллированной воды, предназначенной для изготовления инъекционных растворов, а также самих инъекционных растворов является заражение их микроорганизмами и продуктами их распада.

Известно, что причиной пирогенности в подавляющем большинстве случаев являются грамотрицательные (пирогенобразующие) микроорганизмы, в составе клеточной оболочки которых имеются липополисахариды. Грамположительные микроорганизмы, как правило, не вызывают пирогенной реакции - их пирогенная активность в 10000-100000 раз меньше, чем у грамотрицательных микроорганизмов.

При пересмотре нормативов предельного содержания микроорганизмов в растворах для инъекций была учтена избирательная идентификация грамотрицательных (пирогенобразущих) микроорганизмов.

Методика избирательного обнаружения грамотрицательных микроорганизмов, по количеству которых можно судить о пирогенности растворов вводится как дополнение к пункту 3.1.1. вышеуказанных методических указаний.

Предлагаемая методика позволит бактериологическим лабораториям санэпидстанций, лечебно-профилактических учреждений, а также контрольно-аналитическим лабораториям, контролирующих растворы для инъекций, более целенаправленно проводить эти исследования.

1 мл исследуемого образца, взятого непосредственно перед стерилизацией, засевают по 0,5 мл на поверхность двух чашек Петри мясо-пептонным агаром и термостатируют в течение 5 суток при температуре 30-35°С. На предметные стекла пипеткой наносят капли 3 раствора гидроксида калия, одна капля служит контролем, а в другие петлей вносят каждый вид выросших колоний микроорганизмов и тщательно перемешивают. Если в течение 60 секунд происходит образование желеобразной массы, суспензия тянется за петлей,# образу нити, то исследуемый раствор содержит пирогенобразующие микроорганизмы. Если образования геля не происходит, раствор остается гомогенным, то в исследуемом растворе отсутствуют пирогенобразующие микроорганизмы.

Примечание: применяемые предметные стекла, пипетки должны быть вымыты хромовой смесью и простерилизованы

Нормативы предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов в дистиллированной воде и растворах для инъекций

NN	Наименование	Предельно допустимое содержание микроорганизмов в 1
1.	Растворы для инъекций до стерилизации, не позднее 1-1,5 часа после изготовления:
1.1.	Глюкозы 5%, 10%, 25% и 40%	пирогенобразующих - 10
1.2.	Натрия хлорида 0,9%	общее количество - 50
2.	Дистиллированная вода, используемая для изготовления инъекционных растворов	пирогенобразующих - 5 общее количество - 15-2#

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

В.И. Чибураев