Методические указания по фотометрическому измерению концентраций амикацина в воздухе рабочей зоны (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 10 октября 1991 г. N 5942-91)

М.м. 781,8

Амикацин - 1/-1 (-)-4-амино-2-окси-бутироил/-2-дезокси-4-(6-дезокси-6-амино-Д-гликоз ил 6-(3-дезокси-3-амино-Д-альфа-гликозид) стрептомицина сульфат. Кристаллический порошок белого цвета, без запаха и вкуса, гигроскопичен, легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте, ацетоне, эфире, хлороформе. Стабилен в растворах. Температура плавления 220-230°С (с разложением).

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает ото- и нефротоксическим действием. Слабый аллерген.

ПДК в воздухе - 0,1 .

Характеристика метода

Метод основан на измерении оптической плотности окрашенного в желтый цвет дигидролютидинового производного, образующегося в результате конденсации аминогруппы молекулы антибиотика с ацетил-ацетоном и формальдегидом при 356 нм.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания вещества в анализируемом объеме раствора - 5 мкг.

Нижний предел измерения содержания вещества в воздухе - 0,05 (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,05 до 1,5 .

Определению не мешает присутствие стрептомицина. Мешает присутствие канамицина, мономицина, сизомицина, гентамицина.

Суммарная погрешность измерения не превышает 10%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час 10 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр.

рН-метр.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели, ТУ 95.72.-05-77.

Водяная баня.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100, 500 и 1000 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 250 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл.

Стаканы химические, ГОСТ 19908-85, вместимостью 50 мл.

Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.

Воронки с пористой пластинкой N 1-ПС-1.

Насос водоструйный.

Реактивы, растворы и материалы

Амикацин.

Ацетил-ацетон, ГОСТ 10259-78, ч.д.а., перегнанный при 135,5-138°С.

Формалин, ГОСТ 1625-75, технический, 30% раствор в воде.

Кислота фосфорная, концентрированная, ГОСТ 5663-75, х.ч.

Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-75, х.ч.

Кислота борная, ГОСТ 9656-75, ч.д.а.

Смесь фосфорной, уксусной и борной кислот (раствор А) готовят, помещая последовательно такие количества перечисленных кислот, чтобы содержание каждой соответствовало 0,2 М концентрации, и доводят до метки водой.

Натр едкий, ГОСТ 4328-77, х.ч., 1,0 М раствор (раствор Б).

Буферная смесь рН 2,56, готовят, смешивая 1000 мл раствора А и 150 мл раствора Б.

Реактив С: к 50 мл буферной смеси добавляют 4,0 мл ацетил-ацетона, 10,0 мл формальдегида, перемешивают и доводят до 150,0 мл буферной смесью. Устойчив 1 неделю.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией амикацина 100 мкг/мл готовят растворением точной навески стандартного образца антибиотика в воде. Устойчив 1 месяц.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией амикацина 10 мкг/мл готовят разведением стандартного раствора N 1 в воде. Устойчив 1 неделю.

Фильтры АФА-ВП-20.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. Для определения 1/2 ПЛК следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 1 месяц.

Подготовка к измерению

Градуировочные растворы (устойчивы 2 часа) готовят согласно таблице 3.

Таблица 3

Шкала градуировочных растворов

N стандарта	Стандартный раствор N 2, мл	Стандартный раствор N 1, мл	Дистиллированная вода, мл	Содержание амикацина в градуировочном растворе, мкг
1	0	0	2,5	0
2	0,5	-	2,0	5
3	-	0,5	2,0	50
4	-	1,0	1,5	100
5	-	1,5	1,0	150

Во все пробирки шкалы добавляют по 2,5 мл реактива С и нагревают в кипящей водяной бане 15 минут, охлаждают при комнатной температуре. Измеряют на спектрофотометре оптическую плотность окрашенных в желтый цвет растворов при длине волны 356 нм с толщиной слоя раствора 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания вещества в градуировочных растворах (в мкг).

Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, заливают 5 мл воды, выдерживают при перемешивании 25-30 минут. При необходимости раствор фильтруют через воронку с пористой пластинкой. Для анализа отбирают 2,5 мл раствора антибиотика и обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного анализируемого раствора измеряют по отношению к контрольному раствору, который готовят одновременно и аналогично пробам.

Количественное измерение содержания амикацина в мкг во взятой аликвоте проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию амикацина "С" в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

С = (а * в) / (б * V), где

а - содержание амикацина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Справочное

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20°С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

, где

- объем воздуха, отобранный для анализа, л;

Р - барометрическое давление, кПа; (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20°С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить на соответствующий коэффициент.

ПРИЛОЖЕНИЕ 2
Справочное

Коэффициент K
для приведения объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79

°С	Давление Р, кПа (мм рт. ст.)
	97,33 (730)	97,86 (734)	98,4 (738)	98,93 (742)	99,46 (746)
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458
-18	1,1036	1,1097	1,1159	1,1218	1,1278
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986
-06	1,0640	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772
-02	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535
+02	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459
+06	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309
+10	0,9944	0,9990	1,0054	1,0108	1,0162
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9880	0,9884
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9955
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248

ПРИЛОЖЕНИЕ 2
(продолжение)

°С	Давление Р, кПа (мм рт. ст.)
	100 (750)	100,53 (954)	101,06 (758)	101,33 (760)	101,86 (764)
-30	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1705	1,1763	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-06	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-02	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+02	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+06	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9669	0,9721	0,9773	0,9755	0,9851
+28	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9542	0,9594	0,9646	0,9670	0,9723
+34	09418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	09297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

ПРИЛОЖЕНИЕ 3

Вещества, определяемые по ранее утвержденным и опубликованным Методическим указаниям

Наименование вещества		Опубликованные Методические указания
1.	Поливинилхлорид хлорированный	МУ на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установок. М.,1981, с. 235
2.	1,2,3,5-цис-4,6-гексаокси-клогексан (мезоинозит)	"-"
3.	Сополимер стирола хлорметилированного и 2% п-дивинилбензола	"-"
4.	Фторангидрид перфторпеллоргоновой кислоты	Методические указания по ионометрическому измерению концентраций водорода в воздухе рабочей зоны. Вып. 21, М., 1986, с. 322
5.	Тетрахлорсилан (контроль по хлористому водороду)	Методические указания на фотометрическое определение хлористого водорода в воздухе. Вып. 1-5, М., 1981, с. 83.

ГАРАНТ:

Нумерация рисунков приводится в соответствии с источником

Рисунок 2. Диффузионная ячейка

Рисунок 3

Рисунок 4
Сорбционная трубка

Рисунок 5
Накопительная (а) и осушительная (б) колонки

Рисунок 6
Схема отбора проб воздуха рабочей зоны

Рисунок 7
Газовая схема подключения накопительной колонки

Рисунок 8
Введение накопительной колонки в испаритель

Рисунок 9
Схема установки для сорбции ФН-1 из градуировочного раствора

Рисунок 10
Пробоотборник воздуха пассивного действия (пассивный дозиметр ДМ-2)

Рисунок 11
Прибор для отгонки аммиака

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

М.И. Наркевич