Методические указания МУК 4.1.1143-02 "Измерение концентраций Тиаметоксама методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ)

Методические указания МУК 4.1.1143-02
"Измерение концентраций Тиаметоксама методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ)

Дата введения: 1 января 2003 г.
Введены впервые

1. Вводная часть

Фирма-производитель: НОВАРТИС АГРО АГ (Швейцария).

Торговое название: АКТАРА.

Действующее вещество: тиаметоксам (ЦГА 293343).

3-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-5-метил-[1,3,5]оксадиазинан-4-илиден-N-н итроамин (ИЮПАК).

М.м. 291,7

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 139,1°С.

Давление паров при 25°С: Па.

Коэффициент распределения н-октанол/вода: .

Растворимость при 25°С (г/л): ацетонитрил - 78, ацетон - 42,5 lbхлорметан - 43, метанол - 10,2, этилацетат - 5,7, толуол - 0,6, вода - 4,1/

Стабильность к гидролизу при 25°С: более 1 года (рН 5 и 7), 4,2 дня (pH 9).

В присутствии света в водных фотолитических условиях тиаметоксам быстро деградирует с периодом полураспада 2, 3 дня.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность для крыс - 1 560 мг/кг; острая дермальная токсичность для крыс - более 2 000 мг/г; острая ингаляционная токсичность для крыс - 3 720 воздуха. Тиаметоксам не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика. для рыб более 100 мг/л (96 ч).

Гигиенические нормативы

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,4 .

ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 .

Область применения препарата

Тиаметоксам является системным инсектицидом. Он воздействует на никотиново-ацетилхолиновый рецептор нервной системы насекомых, обладает быстрой желудочной и контактной активностью. Вещество обладает широким спектром активности против сосущих, грызущих и почвенных насекомых на овощных, зерновых и цветочных культурах, фруктовых и цитрусовых деревьях, хлопчатнике и рисе.

2. Методика измерения концентраций Тиаметоксама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента". Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений	6
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме	1 нг
Предел обнаружения в воздухе при отборе 20 воздуха	0,005
Диапазон определяемых концентраций	0,005-0,05
Среднее значение определения	95,0%
Стандартное отклонение (S)	6,85%
Относительное стандартное отклонение (DS)	2,96%
Доверительный интервал среднего	7,61%
Суммарная погрешность измерения	не превышает 23%

2.2. Реактивы и материалы

Тиаметоксам с содержанием д.в. 99,3%, (Новартис, Швейцария)
Ацетон, ч.д.а.	ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии	ТУ 6-09-4326-76
Вода дистиллированная, деионизованная или перегнанная над
Спирт метиловый, х.ч.	ГОСТ 6995-77
Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные, предварительно промытые ацетоном, затем ацетонитрилом	ТУ 6-09-2678-77

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Altex (США) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом Р8, зернением 7 мкм
Хроматографическая колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом-130-С16 Т или Диасорбом-130-С8 Т, зернением 7 мкм (АО БиоХимМак, РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)
Микрошприц для жидкостного хроматографа, вместимостью 50-100 мкл
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-76
Весы аналитические типа ВЛА-200	ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный	ГОСТ 10696-75
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное	ТУ 25-11-1414-78
Барометр	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0-55°С	ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1 000 мл	ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 25 и 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Пробирки центрифужные	ГОСТ 25336-82Е
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Воронки химические, конусные, диаметром 34-40 мм	ГОСТ 25336-82Е
Груша резиновая
Фильтродержатели
Стеклянные палочки

2.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" или ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест".

Воздух со скоростью 4 л/мин пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне 0,005 следует отобрать 20 л воздуха.

Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при температуре -12°С в течение 30 дней, в холодильнике при 4-6°С - в течение 7 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Очистка растворителей

Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием. Ацетон очищают перегонкой над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г и 2 г ).

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 330 мл метанола, переносят в мерную колбу вместимостью 1 000 мл, добавляют 670 мл бидистиллированной или деионизованной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

2.5.3. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ смесью метанол-вода (33:67, по объему) в течение 30-45 мин при скорости подачи растворителя 0,7 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5-15 мин).

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор тиаметоксама с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,3% д.в., в метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в морозильной камере при -12°С не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора тиаметоксама соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4°С не более 2 дней.

2.5.5. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного тиаметоксама с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации тиаметоксама в растворе в мкг/мл.

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10-12 минут. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.2. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США)

Колонка стальная длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом RP8, зернением 7 мкм.

Температура колонки	комнатная
Подвижная фаза	метанол-вода (33:67, по объему)
Скорость потока элюента	0,7 мл/мин
Рабочая длина волны	255 нм
Чувствительность	0,01 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания тиаметоксама	5,14-5,62 мин
Линейный диапазон детектирования	110 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2).

Альтернативные неподвижные фазы:

- Хроматографическая колонка стальная (15 см х 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С8 Т (5 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин 30 с.

- Хроматографическая колонка стальная (15 см х 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С16 Т (7 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание тиаметоксама рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

, где

X - содержание тиаметоксама в пробе воздуха, ;

С - концентрация тиаметоксама в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20°С), .

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

4. Разработчики

Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.

ВНИИ фитопатологии, 143050 Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко