Методические указания по стерилизации ксенобиопротезов раствором глутарового альдегида (утв. управлением по внедрению новых лекарственных средств и медицинской техники Министерства здравоохранения СССР и главным управлением карантинных инфекций Министерства здравоохранения СССР 10, 19 сентября 1986 г. N 28-6/26)

1. Общие положения

1.1. Методические указания предназначены для работников лечебно-профилактических учреждений, научно-исследовательских лабораторий и опытно-промышленных участков, которые готовят ксенобиопротезы клапана сердца (биопротез аортального клапана свиной - БАКС) и артериальные ксенобиопротезы сосуда (АКС) для имплантации пациентам.

1.2. Ксенобиопротезы БАКС и АКС относятся к изделиям медицинского назначения, которые подлежат обязательной стерилизации перед применением.

1.3. БАКС состоит из биологической части - биополимерного клапанно-аортального комплекса (аортальный клапан свиньи), предварительно подвергнутого химической обработке, и искусственной части - функционального поддерживающего каркаса (изготовлен из полипропилена с обшивкой из полиэфирной (нити и фторопласта).

1.4. АКС состоит из биологической части - сонной артерии крупного рогатого скота, предварительно подвергнутой химической обработке, и искусственной части - наружного укрепляющего каркаса из полотна основовязанного сетчатого медицинского (ПОСМ-3).

1.5. Стерилизацию БАКС и АКС проводят в 0,5%-ном (по активно действующему веществу - АДВ) растворе глутарового альдегида, приготовленном на фосфатном буферном растворе.

1.6. Глутаровый альдегид относится к умеренно опасным веществам при ингаляционном воздействии и попадании в желудок; обладает выраженным раздражающим действием в отношении кожных покровов и слизистых оболочек.

1.7. БАКС и АКС, подвергнутые стерилизации 0,5%-ным раствором глутарового альдегида и отмытые в соответствии с режимами, рекомендованными в настоящих "Методических указаниях" (п.п. 4.8.1. и 4.8.2.), не обладают общетоксическими и аллергенными свойствами.

1.8. Стерилизация БАКС и АКС 0,5%-ным раствором глутарового альдегида не вызывает разрушения волокнистых структур биологической части протезов, не изменяет их биомеханические характеристики.

2. Подготовка БАКС и АКС к стерилизации

2.1. Биологический материал (клапанно-аортальные комплексы свиньи и сонные артерии крупного рогатого скота) забирают на мясокомбинате после убоя животных. Артерии выделяют вместе с окружающей клетчаткой. Материал не должен быть загрязнен содержимым желудка или кишечника.

2.2. Забранный биологический материал помещают в стерильные емкости (в стерильный 0,85%-ный раствор хлорида натрия) и при температуре 4-8°С поставляют в учреждение-изготовитель в сроки, не превышающие четырех часов после убоя животных.

2.3. Сразу после доставки биологический материал отмывают от крови проточной питьевой водой (ГОСТ 2874-82) при температуре 12-18°С в течение одного-двух часов, очищают от окружающих тканей и оставляют для дальнейшего отмыва в проточной воде на 16-18 часов.

2.4. Отмытый и очищенный биологический материал подвергают химической обработке, включающей структурирование ткани. Указанную обработку проводят в соответствии с требованиями нормативно-технической документации на БАКС и АКС.

2.5. При подготовке БАКС выполняют следующие манипуляции.

2.5.1. Перед началом структурирования клапанно-аортальных комплексов створки клапана расправляют, помещая между створками и стенкой аортального синуса стерильные тампоны из ваты.

2.5.2. По окончании процесса структурирования из клапанно-аортального комплекса выкраивают необходимую для изготовления протеза часть, которую подшивают на функциональный поддерживающий каркас (п. 1.3). Для предотвращения высыхания биологической части в процессе сборки биопротеза указанный материал погружают в стерильную емкость со стерильным 0,85%-ным раствором хлорида натрия.

2.5.3. Каркас предварительно стерилизуют 0,5%-ным раствором глутарового альдегида, приготовленным на фосфатном буферном растворе (п. 3.4). Стерилизацию проводят в емкости из темного стекла или полипропилена в течение 10 суток при температуре 22-25°С.

2.5.4. К готовому БАКС (с вложенными согласно п. 2.5.1 ватными тампонами) с помощью шовного материала прикрепляют ярлык из фторопласта, на котором указывают месяц и год изготовления биопротеза.

2.6. При подготовке АКС выполняют следующие манипуляции.

2.6.1. В ходе структурирования сонных артерий перед последним этапом обработки производят дополнительную очистку артерий от разволокнившейся в процессе обработки адвентиции, перевязку коллатералей и проверку герметичности стенки сосудов. На этом же этапе для получения АКС необходимой длины сшивают два сосуда соответствующего диаметра. После этого производят замер параметров сосуда для его маркировки и приготовления соответствующего каркаса.

2.6.2. По окончании процесса структурирования на сосуд надевают каркас (п. 1.4), сшитый с помощью шовного материала и предварительно простерилизованный паровым методом при температуре 120°С в течение 45 минут.

2.7. Все манипуляции, указанные в п.п. 2.5 и 2.6, производят с соблюдением правил асептики (в боксе или заменяющем его помещении, используя стерильные посуду, инструменты и шовный материал).

2.8. После сборки (п.п. 2.5.4 и 2.6.2) ксенобиопротезы БАКС и АКС готовы к стерилизации.

3. Приготовление 0,5% раствора глутарового альдегида.

3.1. 0,5%-ный (по АДВ) раствор глутарового альдегида на фосфатном буферном растворе, имеющем pH 8,2-8,9 (приложение 1), готовят из 25%-ного раствора глутарового альдегида, выпускаемого заводом химреактивов "Reanal" (ВНР).

3.2. Исходный раствор глутарового альдегида подлежит регулярному контролю на содержание АДВ (п. 1 прил. 2). Концентрацию глутарового альдегида в каждой емкости проверяют после вскрытия бутыли и при дальнейшем использовании не реже 1 раза в два месяца.

3.3. Расчет количества исходного раствора глутарового альдегида, необходимого для приготовления 1 (л) рабочего (0,5%-ного) раствора, проводят по следующей формуле:

,

где V - объем исходного раствора глутарового альдегида, необходимый для приготовления 1 рабочего раствора, (мл);

471,7 - коэффициент, рассчитанный с учетом плотности исходного раствора глутарового альдегида.

3.4. Для приготовления 1 рабочего (0,5%-ного) раствора глутарового альдегида в мерную посуду вместимостью 1 вносят рассчитанный объем исходного раствора вещества (п. 3.3.) и доводят фосфатным буферным раствором до 1 .

3.5. Рабочий раствор глутарового альдегида готовят и проверяют на содержание АДВ (п. 2, прил. 2) непосредственно перед использованием.

4. Проведение стерилизации

4.1. Стерилизацию БАКС проводят в широкогорлой емкости из темного стекла или полипропилена.

АКС стерилизуют надетым на стеклянный стержень (глухой дрот Л-80) с наконечником из силиконовой медицинской трубки в стеклянной пробирке (высота мм, внутренний диаметр 17 мм) с навинчивающейся пластмассовой крышкой.

4.2. Указанные в п. 4.1 емкости (для АКС - пробирки со стеклянным стержнем внутри), закрыв ватно-марлевыми пробками, предварительно подвергают стерилизации паровым методом. Крышки к емкостям стерилизуют отдельно этим же методом при температуре 120°С в течение 45 минут.

4.3. Готовый ксенобиопротез (БАКС с вложенными ватными тампонами, АКС надетый на стеклянный стержень) помещают в соответствующую стерильную емкость, которую заполняют 0,5%-ным раствором глутарового альдегида (п. 3.4). Емкость герметично закрывают крышкой и прикрепляют этикетку с указанием даты начала и окончания стерилизации. Работу проводят в асептических условиях.

4.4. Время стерилизационной выдержки при температуре 22-25°С составляет: при стерилизации БАКС - 10 суток, при стерилизации АКС - 5 суток.

При стерилизации стеклянную емкость с ксенобиопротезом необходимо держать в темном месте.

4.5. Работу по стерилизации БАКС и АКС регистрируют в специальных журналах (прил. 3).

4.6. По окончании стерилизации проводят контроль стерильности ксенобиопротезов (раздел 5 настоящих "Методических указаний"). После получения заключения о стерильности испытуемой партии изделий ксенобиопротезы могут быть использованы по назначению.

4.7. Перед имплантацией БАКС или АКС пациенту наружную поверхность емкости (пробирки), содержащей ксенобиопротез, протирают с помощью стерильного пинцета (корнцанга) стерильной марлевой салфеткой, смоченной 6%-ным раствором перекиси водорода (по АДВ), и оставляют на 30 минут на стерильном подносе.

Спустя указанное время емкость открывают и осторожно, не касаясь ее краев, с помощью стерильных пинцетов извлекают ксенобиопротез (в случае АКС - стеклянный стержень с надетым на него ксенобиопротезом) из раствора глутарового альдегида.

4.8. Для удаления из изделия стерилизующего средства выполняют следующие манипуляции, строго соблюдая правила асептики.

4.8.1. При работе с БАКС из него извлекают ватные тампоны и в течение 90 минут при интенсивном помешивании ксенобиопротез отмывают в 500 стерильного 0,85%-ного раствора хлорида натрия (температура раствора 25-30°С) со сменой раствора каждые 15 минут.

4.8.2. При работе с АКС ксенобиопротез снимают со стержня и в течение 150 минут промывают при постоянном помешивании в 500 стерильного 0,85%-ного раствора хлорида натрия (температура раствора 25-30°С), 8-кратно меняя раствор через каждые 15-20 минут. Внутреннюю поверхность АКС промывают с помощью стерильного шприца.

4.8.3. Для указанных манипуляций используют стерильные широкогорлые стеклянные емкости (банки) объемом 500 , простерилизованные паровым методом.

4.8.4. БАКС и АКС, отмытые от глутарового альдегида согласно режимам, указанным соответственно в п.п. 4.8.1 и 4.8.2, готовы для имплантации.

4.9. Если отмытый, подготовленный к имплантации БАКС или АКС по каким-либо причинам не был использован, он подлежит повторной стерилизации в соответствии с п.п. 4.1-4.4 настоящих "Методических указаний".

4.10. В случае, когда после окончания стерилизации БАКС или АКС сразу не используют для имплантации пациентам, ксенобиопротезы оставляют, не вскрывая емкостей, погруженными в раствор глутарового альдегида, в котором проводили стерилизацию. Срок хранения изделий - один год при температуре от +4°С до +25°С.

5. Контроль стерильности

5.1. Контроль стерильности БАКС и АКС проводят бактериолог и лаборант бактериологической лаборатории учреждения-изготовителя.

5.2. Контролю на стерильность подлежит одно изделие из каждой партии, содержащей до 30 ксенобиопротезов.

Партией называется количество изделий одного наименования, одновременно заложенных на стерилизацию.

5.3. Перед