Методические указания МУК 4.1.2377-08 "Измерение концентраций метконазола в воздухе рабочей зоны методом капиллярной газожидкостной хроматографии" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 16 июня 2008 г.)

Методические указания МУК 4.1.2377-08
"Измерение концентраций метконазола в воздухе рабочей зоны методом капиллярной газожидкостной хроматографии"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 16 июня 2008 г.)

Дата введения: 5 сентября 2008 г.
Введены впервые

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для измерения концентрации метконазола в воздухе рабочей зоны в диапазоне 0.04-0.4 .

(1RS,5RS;1RS,5SR)-5-(4-xлорбензил)-2,2-диметил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)цикло-пентанол (IUРАС)

Смесь цис- и транс-изомеров. Кристаллический порошок белого цвета, без запаха. Технический продукт представляет собой смесь цис- и транс-изомеров, в которой преобладает цис-метконазол (80:20). Плотность 1.4 (при 0°С). Температура плавления 100-108°С. Давление паров мПа (при 20°С). Растворимость в воде 30.4 (при 20°С, рН 7,5). Коэффициент распределения н-октанол - вода (при 25°С). Растворимость в органических растворителях (, при 24°С): этилацетат-260, метанол-403, ацетон-363, дихлорметан-481. Термически и гидролитически стабилен.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность для крыс - 660 мг/кг; острая дермальная токсичность для крыс - 2000 мг/кг, остарая ингаляционная токсичность для крыс >5,6 (4 ч).

Область применения:

Метконазол - высокоэффективный системный фунгицид, проявляющий активность против фузариума, септорий, альтернарий, церкоспореллы, мучнистой росы, применяемый на озимом рапсе, озимой пшенице и яровом ячмене путем наземного опрыскивания в период вегетации.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,4 .

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей , при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций метконазола выполняют методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД).

Концентрирование метконазола из воздушной среды осуществляют на фильтр "синяя лента", экстракцию с фильтров проводят этилацетатом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,5 нг (каждого изомера). Средняя полнота извлечения с фильтров - 84,71%.

Определение выполнено методом абсолютной калибровки по сумме цис- и транс-изомеров метконазола.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой	Номер Госреестра 14516-95
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104
Меры массы	ГОСТ 7328
Микрошприц типа МШ-1М, вместимостью 1	ТУ 2.833.105
Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО "ОПТЭК", г. Санкт-Петербург)	Номер Госреестра 18860-05
Барометр-анероид М-67	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0-55°С	ТУ 215-73Е
Колбы мерные 2-100-2 вместимостью 100	ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10	ГОСТ 29227

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

транс-Метконазол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,1%, (фирма "BASF")
цис-Метконазол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,3%, (фирма "BASF")
Азот особой чистоты, из баллона	ГОСТ 9293-74
Ацетон, осч	ГОСТ 2306
Натрий углекислый, хч	ГОСТ 83
Спирт этиловый ректификованный	ГОСТ Р 51652 или ГОСТ 18300
Этилацетат ректификованнный

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с	ТУ 64-1-2851-78
Баня водяная
Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные	ТУ 6-09-2678-77
Воронка Бюхнера	ГОСТ 9147
Воронки конусные диаметром 40-45 мм	ГОСТ 25336
Груша резиновая
Колба Бунзена	ГОСТ 25336
Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 150	ГОСТ 9737
Насос водоструйный	ГОСТ 25336
Пинцет
Стаканы химические с носиком, вместимостью 150	ГОСТ 25336
Стекловата
Стеклянные палочки
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50
Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария
Установка для перегонки растворителей
Фильтродержатель (аллонж)
Хроматографическая колонка капиллярная ZB-50, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха и относительной влажности не более 80%.

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров, отбор проб.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Очистка ацетона

Ацетон перегоняют над небольшим количеством и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.1.2. Очистка этилацетата

Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.2. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.2.1. Исходный раствор цис-метконазола для градуировки (концентрация 500 ). В мерную колбу вместимостью 100 помещают 0,05 г цис-метконазола, растворяют в 50-60 этилацетата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.

7.2.2. Исходный раствор транс-метконазола для градуировки (концетрация 500 ). В мерную колбу вместимостью 100 помещают 0,05 г транс-метконазола, растворяют в 50-60 этилацетата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре < - 15°С в течение месяца.

7.2.3. Раствор N 1 цис-метконазола для градуировки (концентрация 10 ). В мерную колбу вместимостью 100 помещают 2 исходного раствора цис-метконазола с концентрацией 500 (п. 7.2.1.), разбавляют этилацетатом до метки.

7.2.4. Раствор N 1 транс-метконазола для градуировки (концентрация 10 ). В мерную колбу вместимостью 100 помещают 2 исходного раствора транс-метконазола с концентрацией 500 (п. 7.2.2.), разбавляют этилацетатом до метки.

Градуировочный раствор N 1 и 2 хранят в морозильной камере при температуре < -15°С в течение месяца. Эти растворы используют для установления времени удерживания каждого изомера при хроматографировании.

7.2.5. Раствор N 3 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки (концентрация по 50 каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 50 помещают по 5 исходных растворов цис- и транс-метконазола с концентрацией 500 (п.п. 7.2.1. и 7.2.2.), разбавляют этилацетатом до метки.

Раствор N 3 хранят в морозильной камере при температуре < -15°С в течение 30-ти дней.

7.2.6. Рабочие растворы NN 4-7 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки и внесения (концентрация по 5.0-0.5 каждого изомера). В 4 мерные колбы вместимостью 100 помещают по 1.0; 2.0; 5.0 и 10.0 градуировочного раствора N 3 с концентрацией 50 (п. 7.2.5.), доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы NN 4-7 с концентрацией цис- и транс-метконазола по 0.5, 1.0, 2.5 и 5.0 каждого изомера, соответственно.

Растворы хранят в холодильнике при температуре 4-6°С в течение 14-ти дней.

Эти растворы метконазола используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено".

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочные характеристики цис- и транс-метконазола, выражающие зависимость площадей пиков от концентрации каждого изомера в растворе , устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.

В испаритель хроматографа вводят по 1 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.3.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков каждого изомера действующего вещества.

Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более, чем на 14% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.3.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный термоионным детектором.

Колонка капиллярная ZB-50, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм.

Температура детектора: 350°С

испарителя: 280°С

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150°C. выдержка 1.3 мин, нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 280°С, выдержка 13.1 мин.

Скорость газа 1 (азот): 22.3 см/сек, давление 80 кПа, поток 0.67 .

Газ 2: деление потока 1:13.4; сброс 8.9 .

Водород: 14 .

Воздух: 200 .

Хроматографируемый объем: 1

Ориентировочное время выхода: цис-метконазола - 13.55 мин,

транс-метконазола - 14.40 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0.5-5.0 нг (каждого изомера).

7.4. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр бумажного фильтра "синяя лента" должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетоном порциями 25-30 , сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

Для оценки квалификации растворителей применительно к задачам подготовки фильтров проводят контроль чистых по процедуре пробоподготовки и измерения, изложенных в п.п. 9. и 7.3.1.

8. Отбор и хранение проб воздуха

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". Воздух с объемным расходом 2-4 аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации метконазола на уровне 0.1 ОБУВ (предел обнаружения) для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 25 воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в морозильной камере при температуре < -15°С - 30 дней.

9. Выполнение измерений

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 , заливают 10 этилацетата, помещают на встряхиватель на 15 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этилацетата объемом 10 , выдерживая на встряхивателе по 5 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35°C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 этилацетата и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.3.1

10. Обработка результатов анализа

Концентрацию метконазола в пробе воздуха (X), , рассчитывают по формуле:

, где

и - концентрация цис- и транс-метконазола в хроматографируемом растворе, найденные по градуировочным графикам в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, ;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, ;

- объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20°С), .

,

где Т - температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), град. С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.

u - расход воздуха при отборе пробы, ,

t - длительность отбора пробы, мин.

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны.

За результат анализа принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений и , расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d):

.

,

где d - норматив оперативного контроля сходимости, ;

- норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 12%).

11. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде:

- результат анализа в характеристика погрешности , % , Р = 0,95 или

, Р = 0,95,

где - абсолютная погрешность.

,

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание метконазола в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0.04 "*

12. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

______________________________

* - 0.04 - предел обнаружения при отборе 25 воздуха рабочей зоны.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко